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靶向MIF的siRNA对小鼠大肠癌肝转移的影响

作　者: 杨荣娇
导　师: 何兴祥
学　校: 广东药学院
专　业: 消化内科学
关键词: 靶向MIF的siRNA 大肠癌 大肠癌肝转移
分类号: R735.34
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 21次
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内容摘要


目的讨论靶向巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor , MIF)的siRNA对BALB/c小鼠大肠癌肝转移的影响及其可能的机制。方法1.实体瘤的获得。2.盲肠造疝原位接种瘤块法建立小鼠大肠癌肝转移模型:按我们过去报道的盲肠造疝原位接种瘤块法建立小鼠大肠癌肝转移模型。术后1w ,建模小鼠腹部皮下可触及一约绿豆大小的结节。术后4w ,可见1.8cm*1.5cm*1.4cm大小的瘤块,行肝组织病理检查可见肝转移灶,建模成功。3.靶向MIF的siRNA转染干预:将成功建模的小鼠随机分为3组。分别每周两次肿瘤原位注射相同体积的靶向MIF的siRNA(MIF siRNA,0.15ng/kg)、NS–siRNA(0.15ng/kg)及生理盐水(NS,0.15ng/kg),治疗4周。治疗结束3天后,处死小鼠。4.肝脏连续切片,HE染色观察各组小鼠大肠癌肝转移。5.ELISA检测血清MIF及血管内皮生长因子(VEGF)浓度。6.免疫组织化学染色检测肝转移灶微血管密度。结果MIF siRNA组、NS- siRNAR组及NS组的大肠癌肝转移率分别为10%、60%与70%(x~2=8.30,p<0.05),小鼠血清MIF分别为(20±4)pg/ml、(72±8)pg/ml与(78±7)pg/ml,(p<0.05) ;小鼠血清VEGF分别为(20±4)pg/ml、(77±9)pg/ml与(77±10)pg/ml,( p<0.05 );肝转移灶的MVD分别为(19±3)、(29±6)与(35±7),(p<0.05)。结论靶向MIF的siRNA降低了小鼠大肠癌肝转移的发生率,其机制可能是靶向MIF的siRNA抑制了MIF表达,下调VEGF的表达,减少了MVD。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-8
第一章 前言  8-18
  1.1 大肠癌流行病学特点  8
  1.2 大肠癌肝转移  8-9
  1.3 巨噬细胞移动抑制因子（MIF）  9-10
  1.4 RNAi (RNA interference  10-16
    1.4.1 RNAi 的特点  10-11
    1.4.2 RNAi 技术中的相关问题  11-12
    1.4.3 siRNA 的制备方法  12-14
    1.4.4 RNAi 的应用  14-16
  1.5 VEGF  16-18
第二章 本课题的立题背景、研究意义及研究内容  18-21
  2.1 立题背景和研究意义  18
  2.2 国内外研究现状  18-19
  2.3 研究内容  19
    2.3.1 HE 染色观察大肠癌肝转移情况  19
    2.3.2 ELISA 检测靶向MIF 的siRNA 对血清MIF 及VEGF 浓度的影响  19
    2.3.3 免疫组织化学染色检测肝转移灶微血管密度（MVD）  19
  2.4 本研究的创新点  19-21
第三章 靶向MIF的siRNA对小鼠大肠癌肝转移的影响  21-33
  3.1 材料与方法  21-23
    3.1.1 材料  21-23
  3.2 实验方法  23-28
    3.2.1 实体瘤的获得  23-24
    3.2.2 盲肠造疝原位接种瘤块法建立小鼠大肠癌肝转移模型  24-25
    3.2.3 靶向MIF 的siRNA 转染干预  25-26
    3.2.4 HE 染色观察大肠癌肝转移情况  26-27
    3.2.5 ELISA 检测血清 MIF 及 VEGF 的浓度  27-28
    3.2.6 免疫组织化学染色(SP 法)  28
  3.3 结 果  28-31
    3.3.1 肝转移情况  28-30
    3.3.2 小鼠血清 MIF 以及 VEG  30-31
    3.3.3 肝转移灶 MVD 检测结果  31
  3.4 讨论  31-33
结论  33-34
参考文献  34-40
攻读学位期间发表的论文  40-52
中英文缩略语对照  52-53
致谢  53

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 大肠肿瘤
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