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芹菜素对TRAIL诱导卵巢癌CoC1细胞凋亡的影响
作 者: 唐爱琼
导 师: 谢宛玉
学 校: 南华大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 卵巢癌 API 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 凋亡 增敏作用
分类号: R737.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 25次
引 用: 0次
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内容摘要
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目的研究芹菜素(API)是否通过抑制NF-kappaB活性,促进凋亡诱导配体 的学位论文">肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人卵巢癌CoC1细胞凋亡。方法体外培养人卵巢癌CoC1细胞。全自动生化分析仪测定细胞培养基的乳酸脱氢酶(LDH)活性。台盼蓝拒染法检测细胞死亡率。碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)定量分析细胞凋亡率(亚二倍体DNA含量细胞百分率)。ELISA测定细胞Caspase-3活性。DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA梯形条带。Western Bloting检测细胞蛋白的表达。结果基于细胞培养基LDH活性测定的细胞毒性试验结果表明,API和TRAIL对人卵巢癌CoC1细胞毒性的EC50值分别是340μmol/L和795ng/mL;20μmol/L API与TRAIL合用,其CoC1细胞毒性显著增强,EC50值为29 ng/mL。药物合并效应的CI值是0.1273。细胞计数结果证实,API和TRAIL导致细胞死亡的EC50值分别是134μmol/L和234ng/mL; 20μmol/LAPI与TRAIL合用,其CoC1细胞死亡率显著增高,EC50值为37 ng/mL;CI值为0.4322。PI染色FCM分析结果发现:20μmol/L API和20ng/mL TRAIL以及两者合用的细胞凋亡率分别是8.83%±2.33%、8.32%±2.80%和69.50%±4.65%。溶媒组、20μmol/L API和20ng/mL TRAIL以及两者合用作用48小时,比色法检测结果显示,人卵巢癌CoC1细胞Caspase-3的活性分别是培养基组的1.1、1.3、1.4和6.5倍。20μmol/L API预孵育4小时,再加入20 ng/mL的TRAIL处理44小时,展示出典型DNA梯形条带图谱。Western Blot分析结果表明,API以浓度和时间依赖的方式抑制CoC1细胞NF-κB(p65)蛋白表达和下降IκBα蛋白磷酸化水平。结论1.亚毒性浓度的API具有增强TRAIL诱导人卵巢癌CoC1细胞凋亡作用。2. API敏化TRAIL诱导人卵巢癌CoC1细胞凋亡的机制与抑制NF-κB(p65)蛋白表达和IκBα蛋白磷酸化有关。
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全文目录
中文摘要 4-6 英文摘要 6-8 前言 8-11 材料与方法 11-15 结果 15-26 讨论 26-30 结论 30-31 参考文献 31-35 中英文缩略词表 35-36 综述 36-47 参考文献 42-47 攻读硕士学位期间完成、发表论文情况 47-48 致谢 48
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 卵巢肿瘤
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