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马铃薯种质资源离体保存的研究

作　者: 刘迎春
导　师: 石岭
学　校: 内蒙古农业大学
专　业: 蔬菜学
关键词: 马铃薯 节间 离体保存 缓慢生长保存 超低温保存
分类号: S532
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 156次
引　用: 2次
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内容摘要


马铃薯属无性繁殖蔬菜,传统的保存方法需每年进行种质更新,不仅容易受自然灾害和病虫害影响,而且耗费大量的人力、财力和物力。目前,国际交流的日益频繁,马铃薯资源引进成为我国马铃薯育种的重要内容,安全、有效的保存种质资源成为现阶段我国马铃薯育种的重要课题。为克服传统保存方法所面临的难题,本试验以引自日本的马铃薯品系06-10为试材,以节间作为外植体,进行了种质资源缓慢生长和超低温保存研究。主要结果如下:1在MS+IAA0.5mg/L+KT0.1mg/L的基本培养基中,添加20g/L山梨醇能有效抑制马铃薯的生长,保存5个月存活率达93.75%。2在MS+IAA0.5mg/L+KT0.1mg/L的基本培养基中,添加70、90g/L的蔗糖能有效抑制马铃薯的生长,保存5个月存活率达87.5%。3在MS+IAA0.5mg/L+KT0.1mg/L的基本培养基中,添加10、13g/L琼脂,没有对马铃薯的生长起到明显的抑制作用。4在MS+IAA0.5mg/L+KT0.1mg/L的基本培养基中,添加200mg/L矮壮素（CCC）和4mg/L脱落酸（ABA）,可有效抑制马铃薯的生长,保存5个月存活率达81.25%。5确立了马铃薯节间玻璃化法超低温保存技术体系。程序如下:切取马铃薯节间10mm,在0.5mol/L蔗糖的MS培养基上预培养3d后,再将节间切至2～3mm,先在室温下用60%PVS2预处理液处理20min,再于0℃下用PVS2脱水处理40min,换用新鲜的PVS2溶液,然后将材料直接投入液氮冷冻保存。1d后取出,40℃水浴快速化冻2min,1.2mol/L蔗糖的MS培养液洗涤两次,每次10min,然后转至MS+IAA0.5mg/L+KT0.1mg/L+GA30.3m/L的MS培养基中,25℃暗培养7d后转为正常光下培养,15d后存活率高达88.87%。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-9
第一章 引言  9-16
  1 问题的提出  9-11
  2 前人研究进展  11-15
    2.1 缓慢生长保存  12-13
      2.1.1 低温保存  12
      2.1.2 高渗透压保存  12-13
      2.1.3 生长抑制剂保存  13
      2.1.4 降低氧分压保存  13
      2.1.5 干燥保存法  13
    2.2 超低温保存  13-15
      2.2.1 超低温保存的原理  14
      2.2.2 影响超低温保存的因素  14-15
        2.2.2.1 材料的特性  14
        2.2.2.2 预处理  14
        2.2.2.3 冰冻保护剂种类  14
        2.2.2.4 冰冻方法  14-15
        2.2.2.5 液氮保存  15
        2.2.2.6 解冻  15
        2.2.2.7 解冻后的处理  15
  3 本试验的目的和意义  15-16
第二章 马铃薯种质资源缓慢生长保存的研究  16-27
  1 材料和方法  16-17
    1.1 试验材料的预培养  16
    1.2 试验方法  16-17
      1.2.1 不同浓度山梨醇处理保存马铃薯组培苗  16
      1.2.2 不同浓度蔗糖处理保存马铃薯组培苗  16
      1.2.3 不同浓度琼脂处理保存马铃薯组培苗  16
      1.2.4 不同浓度矮壮素(CCC)处理保存马铃薯组培苗  16
      1.2.5 不同浓度脱落酸(ABA)处理保存马铃薯组培苗  16-17
  2 结果与分析  17-25
    2.1 不同浓度山梨醇对马铃薯组培苗保存的影响  17-18
    2.2 不同浓度蔗糖对马铃薯组培苗保存的影响  18-20
    2.3 不同浓度琼脂对马铃薯组培苗保存的影响  20-22
    2.4 不同浓度矮壮素(CCC)对马铃薯组培苗保存的影响  22-23
    2.5 不同浓度脱落酸(ABA)对马铃薯种质保存的影响  23-25
  3 讨论  25-27
    3.1 山梨醇处理  25
    3.2 蔗糖处理  25
    3.3 琼脂处理  25-26
    3.4 矮壮素(CCC)处理  26
    3.5 脱落酸(ABA)处理  26
    3.6 小结  26-27
第三章 马铃薯种质资源超低温保存的研究  27-32
  1 材料和方法  27-28
    1.1 供试材料  27
    1.2 试验方法  27-28
      1.2.1 预培养  27
      1.2.2 冰冻保护剂处理  27
      1.2.3 液氮保存  27
      1.2.4 恢复生长  27-28
  2 结果与分析  28-29
    2.1 蔗糖浓度及预培养时间对保存后节间存活率的影响  28
    2.2 PVS_2处理时间对保存后节间存活率的影响  28-29
    2.3 不同冷冻时间对保存后节间存活率的影响  29
    2.4 恢复培养基对保存后节间存活率的影响  29
  3 讨论  29-32
    3.1 预处理与超低温保存存活率的关系  29-30
    3.2 冰冻保护剂及化冻方式与超低温保存存活率的关系  30
    3.3 液氮中保存时间与存活率的关系  30-32
第四章 结论  32-33
  1 山梨醇处理  32
  2 蔗糖处理  32
  3 琼脂处理  32
  4 矮壮素(CCC)处理  32
  5 脱落酸(ABA)处理  32
  6 超低温保存马铃薯的最佳程序  32-33
致谢  33-34
参考文献  34-36
附图  36-41
作者简介  41

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 薯类作物 > 马铃薯（土豆）
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