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减毒沙门氏菌携带siRNA-STAT3质粒治疗小鼠移植性前列腺癌的实验研究

作　者: 刘喜东
导　师: 周庆伟
学　校: 吉林大学
专　业: 生物医学工程
关键词: 前列腺癌减毒沙门氏菌 STAT3 RNA干涉
分类号: R737.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:观察以减毒沙门氏菌携带siRNA-STAT3质粒对小鼠前列腺移植癌的治疗效果。方法:构建小鼠前列腺移植癌模型,随机分组,将转化有siRNA-STAT3质粒的减毒沙门氏菌经局部注射到模型构建成功的小鼠体内。观察小鼠一般状态,记录肿瘤体积的变化,RT-PCR和western bolt方法分析STA3及其下游基因Bcl-2、c-Myc、HiF1、cyclinD1的mRNA和蛋白表达水平,铺板法观察菌群分布,HE染色观察肿瘤的形态学变化,免疫组化检查STAT3、HiF1及PCNA蛋白表达情况,流式细胞术检测肿瘤凋亡。结果:(1)小鼠前列腺移植癌模型构建成功,携带有siRNA-STAT3质粒沙门氏菌治疗组移植性前列腺癌瘤体生长受到明显抑制,瘤重减轻;(2)铺板法检测菌群分布显示减毒沙门氏菌具有嗜肿瘤特性且在肿瘤内长期存活;肝内分布次之,再次为肺,在脾中分布最低;(3)流式细胞术检测显示pGC-Si-STAT3治疗组肿瘤细胞早期凋亡率达到29.1%;pGC-Si-Scramble组肿瘤细胞早期凋亡率为14.7%;而mock未治疗组仅为8.5%;(4)pGC-Si-STAT3治疗组肿瘤组织的STAT3 mRNA和蛋白表达明显降低;其下游基因Bcl-2、c-Myc的mRNA及HiF1、cyclinD1蛋白的表达水平都不同程度的受到抑制;(4)免疫组织化学结果显示pGC-Si-STAT3治疗组肿瘤组织的STAT3、HiF1及PCNA表达下调。结论:以减毒沙门氏菌作为运载体携带siRNA-STAT3质粒通过调控STAT3下游基因表达,诱导凋亡,对小鼠移植性前列腺癌具有显著的抑瘤效果。

全文目录

提要  4-6
英文缩写词表  6-8
第1章绪论  8-19
  1.1 前列腺癌的研究进展  8-13
  1.2 癌基因STAT3与肿瘤研究进展  13-16
  1.3 减毒沙门氏菌在肿瘤基因治疗中的研究进展  16-19
第2章材料和方法  19-27
  2.1 材料  19-20
  2.2 方法  20-27
第3章结果  27-35
  3.1 减毒沙门氏菌在小鼠体内的分布  27-28
  3.2 携带有siRNA-Stat3质粒的鼠沙门氏菌对小鼠移植性前列腺癌的治疗效果  28
  3.3 病理学结果  28-32
  3.4 基因表达观测  32-34
  3.5 流式细胞术（Flow cytometry）测凋亡  34-35
第4章讨论  35-39
第5章结论  39-40
参考文献  40-47
致谢  47-48
中文摘要  48-50
Abstract  50-52

减毒沙门氏菌携带siRNA-STAT3质粒治疗小鼠移植性前列腺癌的实验研究

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