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Tat及其介导的纳米粒子的穿膜机制研究

作　者: 乔永萍
导　师: 任磊；张其清
学　校: 厦门大学
专　业: 生物医学工程
关键词: Tat及其复合物细胞穿膜机制
分类号: R319
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

Tat多肽来源于HIV-1,能介导多种外源性物质如基因、蛋白、多肽、化学合成的纳米颗粒性物质等进入细胞甚至细胞核,它是一种很有前途的载体材料,可能成为基因治疗和药物治疗的载体。然而迄今为止,有关Tat及其介导的物质的穿膜递送机制仍然不清楚。本文首先提取骨髓基质干细胞（BMSCs）,一方面为研究穿膜机制提供细胞,另一方面为提取的干细胞及其诱导分化奠定基础;然后探讨了Tat及其介导的明胶-硅氧烷、Au-Au₂S和Au纳米粒子作为潜在的基因和药物释放载体在BMSCs和Hela细胞的穿膜递送作用。本文的主要研究结果如下:1)密度梯度离心法分离和培养得到了较为纯化的兔骨髓基质干细胞（BMSCs）,并成功地诱导其分化为成骨细胞。2) Tat在＜25μM浓度范围时无细胞毒性;穿膜效率随浓度的增加而提高,但当浓度在10μM时达到饱和,无血清培养比有血清培养内化效率高,破坏ATP和4℃时内化效率下降;Tat以脂筏介导的巨胞饮方式进入BMSCs和Hela细胞。3) Tat介导的明胶-硅氧烷纳米粒子的穿膜递送在4℃时受到抑制并具有ATP依赖性;以脂筏介导的巨胞饮方式进入BMSCs,而以clathrin蛋白受体介导的内化方式和脂筏介导的巨胞饮两种途径进入Hela细胞。4) Tat介导的近红外敏感的Au-Au₂S纳米粒子穿膜递送在4℃受到抑制并具有ATP依赖性;以clathrin蛋白受体介导的内化方式和脂筏介导的巨胞饮两种途径进入BMSCs,而以脂筏介导的巨胞饮内化方式进入Hela细胞。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-10
第一章绪论  10-30
  1.1.细胞  10-11
  1.2.Protein transductions domains(PTDs)  11-21
  1.3.本课题的提出和研究内容  21-23
  参考文献  23-30
第二章兔骨髓基质干细胞体外培养及定向诱导为成骨细胞  30-47
  2.1.引言  30
  2.2.材料和方法  30-37
  2.3.结果与讨论  37-45
  2.4.小结  45-46
  参考文献  46-47
第三章 Tat穿膜机制的初步研究  47-71
  3.1.引言  47-48
  3.2.材料和方法  48-55
  3.3.结果和讨论  55-68
  3.4.小结  68-69
  参考文献  69-71
第四章 Tat介导的明胶-硅氧烷纳米颗粒穿膜递送的初步研究  71-90
  4.1.引言  71
  4.2.材料和方法  71-77
  4.3.结果与讨论  77-87
  4.4.小结  87-88
  参考文献  88-90
第五章 Tat介导的Au-Au_2S和不同形状的Au纳米颗粒穿膜递送的初步研究  90-117
  5.1.引言  90-91
  5.2.材料和方法  91-96
  5.3.结果与讨论  96-114
  5.4.小结  114-115
  参考文献  115-117
全文结论  117-118
致谢  118-119

Tat及其介导的纳米粒子的穿膜机制研究

内容摘要

全文目录

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