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痰热清注射液对急性肺损伤大鼠的保护作用及实验机制的研究

作　者: 闫龙
导　师: 黄小民
学　校: 浙江中医药大学
专　业: 中西医结合临床内科
关键词: 痰热清注射液急性肺损伤 NF-κB p65 氧化抗氧化
分类号: R563
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：本实验通过大鼠尾静脉注射LPS(lipopolysaccharide),建立急性肺损伤ALI (acute lung injury)大鼠模型,研究痰热清注射液对ALI大鼠肺组织形态学、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)多形核中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils, PMN)、肺组织氧化抗氧化因子及核因子-κb (NF-κB)的影响,探讨其对ALI的治疗作用及可能机制,为其临床应用于感染所致的ALI/ARDS提供理论参考。方法：1.将56只SD大鼠随机分为正常对照组、LPS模型2h、4h、6h组,痰热清治疗2h、4h、6h组,共7组,每组8只。正常对照组经尾静脉注入无菌生理盐水1ml作为对照,LPS模型组予尾静脉注入LPS(5mg/kg)造模,痰热清治疗组予LPS造模后,从另一尾静脉注射痰热清1mL进行治疗。然后在相应时间段麻醉取血后处死大鼠,予肺泡灌洗、并取肺组织。2.光镜下观察肺组织病理学改变,测定肺湿/干比重(W/D),计算支气管肺泡灌洗液(BALF)多形核中性粒细胞比例(PMN%),测定肺通透指数(LPI)以评价肺损伤程度。3.化学法检测肺组织匀浆一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量的变化。4.免疫组织化学染色后观察NF-κB p65在蛋白水平上的表达差异。5.采用SPSS17.0统计软件分析处理数据。结果：1.与正常对照组相比,LPS模型组肺组织有明显的形态、病理学改变；肺泡灌洗液PMN%、肺W/D、LPI明显增加(P<0.01)。表明LPS可成功复制大鼠ALI模型。与相应时间段LPS模型组相比,各时间段肺泡灌洗液PMN%、肺W/D、LPI明显降低(P<0.01)。2.各时间段模型组肺组织MDA和NO含量较正常组明显增加(P<0.01),SOD及GSH-px含量明显下降(P<0.01)。痰热清治疗4、6h组肺组织内MDA和NO含量与相应时间段模型组比较明显下降(P<0.01),而肺组织SOD、GSH-px活性则明显升高(P<0.01)。3.各时间段LPS模型组NF-κB p65的阳性指数值较正常组升高(P<0.01)。痰热清2h组NF-κB p65阳性指数与LPS模型2h组相比无统计学差异(P>0.05)；痰热清4h与6h组阳性指数值较相应时间点模型组明显降低(P<0.01),且与正常对照组无统计学差异。结论：1.痰热清注射液对ALI大鼠有保护作用,可以减轻其组织形态学改变,减轻肺损伤程度。2.痰热清注射液对ALI大鼠的保护作用可能与清除过多氧自由基,提高机体抗氧化能力,促进其趋于动态平衡等相关。3.痰热清注射液对ALI大鼠的保护作用可能与其抑制NF-κB的表达及活化,抑制其进一步转录各种炎症细胞因子。

全文目录

中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-10
一、实验材料与方法  10-15
  (一) 实验材料  10
    1. 实验动物  10
    2. 药物试剂  10
    3. 仪器设备  10
  (二) 实验方法  10-14
    1. 实验动物分组造模  10-11
    2. 实验动物标本采集  11
    3. 标本检测  11-14
  (三) 统计学方法  14-15
二、结果  15-18
  (一) 肺组织病理学改变  15
    1. 肺组织肉眼观  15
    2. 肺组织镜下病理  15
  (二) 肺损伤指标的变化比较  15-16
    1. 支气管肺泡灌洗液中性粒细胞  15
    2. 肺通透指数  15-16
    3. 肺湿干比  16
  (三) 肺组织氧化抗氧化指标的变化比较  16
  (四) 肺组织NF-κBp65蛋白表达的变化比较  16-18
三、分析与讨论  18-24
  (一) 内毒素性肺损伤模型的建立  18
  (二) 急性肺损伤的发生机制  18-21
    1. 自由基在急性肺损伤中的作用  18-20
    2. NF-κB p65与炎症因子在急性肺损伤中的作用  20-21
    3. 中医对急性肺损伤的病因病机的认识  21
  (三) 痰热清注射液治疗作用的可能机制  21-23
    1. 痰热清注射液的药理学研究  21-22
    2. 通过调节氧化抗氧化失衡  22-23
    3. 通过NF-κB p65的调节  23
  (四) 小结  23-24
四、结论  24-25
参考文献  25-28
附图  28-31
致谢  31-32
文献综述  32-41
  参考文献  39-41

痰热清注射液对急性肺损伤大鼠的保护作用及实验机制的研究

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