学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

中枢CRF受体对可卡因戒断及外周CRF受体对前列腺癌细胞凋亡的影响

作　者: 王丽娜
导　师: 李胜男
学　校: 南京医科大学
专　业: 药理学
关键词: 可卡因 皮质纹状体 CRF相关肽 CRF受体 LTP 4CRF UCN2 凋亡 Bcl-2 Bax 前列腺癌
分类号: R737.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 19次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasingfactor,CRF)相关肽及其受体广泛分布于中枢和外周,并具有多种生物学效应。然而,其在中枢神经系统和外周的作用截然不同,甚至有时起到相反的作用。因此,研究CRF相关肽分别在中枢和外周的作用及其机制有着重要的意义。CRF相关肽具有调节应激行为、情绪活动、食物摄取及药物成瘾等作用,并且通过HPA轴发挥抑制炎症的作用。而在外周,CRF相关肽可保护心血管系统、促进炎症反应,并对代谢以及肿瘤生长有明显的影响。在中枢的皮质纹状体及外周的前列腺癌组织中均有大量的CRF相关肽及其受体的表达,但其对可卡因戒断情况下皮质纹状体通路突触可塑性和前列腺癌细胞凋亡的作用尚未完全明了。本文研究发现:在中枢系统中,CRF能增强可卡因戒断情况下大鼠皮质纹状体神经通路LTP,且不同亚型受体具有不同作用:CRF激活CRFR1均能增强生理和可卡因戒断病理情况下大鼠皮质纹状体神经通路LTP,而激活CRFR2只增强可卡因戒断大鼠的皮质纹状体神经通路LTP。在外周,CRF通过CRFR1,调节Bax/Bcl-2比例从而促进小鼠RM-1前列癌细胞凋亡。同时,UCN2却通过CRFR2磷酸化Akt和CREB,上调Bcl-2,下调Bax表达,最终抑制RM-1细胞凋亡。综上所述,本实验首次研究CRF相关肽及其受体对可卡因戒断大鼠的皮质纹状体神经通路LTP及对小鼠RM-1前列腺癌细胞凋亡的作用及机制,从一个侧面初步阐述了CRF受体在中枢和外周的不同作用。第一部分CRF相关肽及其受体对可卡因戒断大鼠的皮质纹状体神经通路LTP的影响同其它成瘾药物类似,可卡因滥用主要表现为长期滥用和高复吸率。在最近15年中,许多的研究证实下丘脑及下丘脑外CRF系统能影响可卡因滥用。可卡因成瘾过程中可能涉及类似于学习和记忆的机制,而这种机制需要皮质纹状体通路的参与。同时,皮质纹状体通路已经被广泛认为是习惯形成和存储的大脑中心。LTP是研究突触可塑性的重要实验模型。本文工作初步探讨了在可卡因戒断情况下,CRF受体的两种亚型对大鼠皮质纹状体突触可塑性的影响。实验结显示无论在可卡因戒断组还是在生理盐水组,CRF均呈剂量依赖性地增强大鼠皮质纹状体神经通路LTP。这一结果表明CRF相关肽可能会通过增强皮质纹状体神经通路LTP来导致复吸。在可卡因戒断组中,预先给予CRFR1选择性拮抗剂(NBI27914)或者CRFR2选择性拮抗剂(astression2B),CRF诱导增强的LTP均能被逆转;然而在生理盐水组中,CRF诱导增强的LTP只能被astression2B减弱。值得注意的是,外源性给予UCN2(CRFR2选择性激动剂)可以显著性增强可卡因戒断大鼠的皮质纹状体神经通路LTP,而对生理盐水组脑片的LTP没有影响;UCN2的LTP增强作用被astression2B完全阻断。综合本研究的实验结果,CRFR1在生理条件和可卡因戒断情况下均表达并发挥了增强大鼠皮质纹状体神经通路LTP,然而CRFR2只有在可卡因戒断情况下才发挥此作用。综上所述,在可卡因戒断情况下,CRF相关肽能增加皮质纹状体神经通路LTP,而这一改变能促进应激导致的可卡因复吸。更重要的是,不同的CRF受体介导了不同的功能,其中CRFR1在生理和可卡因戒断病理情况下都能增强皮质纹状体神经通路LTP,而CRFR2只在可卡因戒断情况下参与调节神经适应性变化。这些研究结果提示CRFR2的功能在可卡因戒断后发生了明显改变,这种特异性变化可能是可卡因复吸的一个重要机制,有可能成为新的药物作用靶点来影响可卡因戒断后的复吸。第二部分不同CRF受体对小鼠RM-1前列癌细胞凋亡的影响CRF相关肽及其受体在外周的作用特别是对肿瘤的影响成为当前的研究热点。2002年,几位美国学者在人类前列腺癌标本中首次发现了UCN,然而有关CRFR的表达及其在前列腺癌细胞中的具体生理病理作用尚未报导。本文第二部分主要探讨了CRFRs在小鼠RM-1前列癌细胞中的表达及对凋亡的影响:通过半定量RT-PCR、细胞免疫荧光以及Westernblotting,在mRNA和蛋白水平检测到CRFR1和CRFR2均表达于RM-1细胞中;在CRF介导的促凋亡作用中,它能通过下调Bcl-2(抗凋亡基因)及上调Bax(促凋亡基因)的蛋白表达从而增强线粒体膜电位超级化,最终激活caspases-9。与之相反,UCN2能上调Bcl-2,下调Bax的蛋白表达,最终抑制凋亡。以上两种受体对于凋亡发挥的相反的作用均可被相应的拮抗剂所阻断。同时,在UCN2对CRFR2的作用中,Akt和CREB在短时间内先后被激活且呈时间依赖性,且预先给予LY29004(PI3K抑制剂)处理后,CREB磷酸化被显著抑制,Bcl-2蛋白表达降低,此结果表明Akt和CREB可能参与了CRFR2介导的小鼠RM-1前列癌细胞抗凋亡作用。综上所述,本文工作首次发现CRF两种亚型的受体表达于小鼠RM-1前列癌细胞中,且对凋亡具有相反的作用。这些CRF相关肽对前列腺癌细胞凋亡的影响能够帮助我们了解更多关于CRF系统在前列腺癌的作用,以及提供了一个潜在的治疗前列腺癌的靶点。

全文目录


英文缩略词表  5-6
摘要  6-9
Abstract  9-13
第一部分 CRF相关肽及其受体对可卡因戒断大鼠的皮质纹状体神经通路LTP的影响  13-36
  前言  13-15
  材料和方法  15-29
    1 实验材料  15
    2 实验方法  15-17
    3 实验结果  17-25
    4 讨论  25-28
    5 结论  28-29
  参考文献  29-36
第二部分 不同CRF受体对小鼠RM-1前列癌细胞凋亡的影响  36-65
  前言  36-38
  材料与方法  38-58
    1 实验材料  38
    2 实验方法  38-42
    3 实验结果  42-54
    4 讨论  54-57
    5 结论  57-58
  参考文献  58-65
综述  65-80
  References  72-80
附录  80-81
硕士在读期间发表论文  81-82
致谢  82

相似论文

  1. 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
  2. CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
  3. 沙利度胺衍生物的设计合成及抗肿瘤活性研究,R965
  4. 塞来昔布与β-榄香烯联合给药的抗肿瘤作用及其机制研究,R96
  5. TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
  6. 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
  7. 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子甘油醛-3-磷酸脱氢酶的影响,S858.31
  8. PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞钙信号的影响及其机理初探,S858.28
  9. 血管生成调节因子对性成熟小鼠卵泡及其血管发育的影响,S852.2
  10. β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
  11. 伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1联合诱导Vero细胞凋亡的研究,S856.9
  12. 黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导锦鲤原代肝细胞凋亡机制的初步研究,S856.9
  13. 沉默BMPR-IB基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡及BMP通路相关基因表达的影响,S828
  14. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
  15. Foxol对小鼠颗粒细胞凋亡的影响,S865.13
  16. 蜂毒素对人肝癌HepG-2细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用及部分机制研究,R735.7
  17. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  18. WWOX在胆管癌组织中的表达及其对胆管癌细胞生物学行为的影响,R735.8
  19. 18氟—氟代脱氧葡萄糖诱导Eca-109食管癌细胞凋亡的初步研究,R735.1
  20. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导仓鼠肾细胞凋亡信号转导机制的研究,S856.9
  21. MRS联合DWI对前列腺癌的诊断价值,R737.25

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 男性生殖器肿瘤 > 前列腺肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com