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氯通道在Disulfiram/copper诱导的人急性淋巴性白血病细胞凋亡中的作用

作 者: 曹国振
导 师: 王立伟
学 校: 暨南大学
专 业: 生理学
关键词: 氯通道 细胞凋亡 膜片钳技术 双硫仑
分类号: R733.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 66次
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内容摘要


目的:研究氯通道双硫仑诱导的人急性淋巴母细胞白血病Molt4细胞凋亡中的作用。方法:1)膜片钳技术记录全细胞电流;2)活细胞实时成像技术分析和测量细胞体积变化;3) Hoechst核染色法观察细胞膜通透性;4)流式细胞术检测凋亡。结果:1)47%低渗刺激作用于Molt4细胞可激活一个具有明显外向优势的容积敏感氯电流,并且可以被氯通道阻断剂阻断;2)47%低渗刺激引起的细胞肿胀可诱发Molt4细胞产生调节性细胞容积减小(regulatory volume decrease, RVD),这一容积调节过程可被氯通道阻断剂NPPB部分阻断;3) Molt4细胞在等渗环境中存在氯通道的活动,产生容积敏感背景氯电流。氯通道阻断剂可抑制此电流并导致细胞容积增大(肿胀);4)联合应用抗酗酒药双硫仑(Disulfira)和氯化铜可激活Molt4细胞氯通道,产生容积敏感的氯电流,并诱发凋亡性细胞容积减小(Apototic Volume Decrease, AVD)。双硫仑/氯化铜激活的氯电流以及诱发的AVD过程可被氯通道阻断剂NPPB所阻断;5) Hoechst33258染色显示,双硫仑/氯化铜可使细胞膜通透性增高(膜透化),这一作用可被NPPB阻断;6)流式细胞术检测表明,双硫仑/氯化铜可诱导Molt4细胞凋亡,氯通道阻断剂NPPB可部分阻断其作用。结论:1) Molt4细胞表达容积敏感性氯通道;2)容积敏感性氯通道参与低渗和等渗状态下的Molt4细胞容积调节,以及正常细胞容积的维持;3)容积敏感性氯通道可能通过AVD或者膜透化而参与双硫仑/铜诱导的Molt4细胞凋亡。

全文目录


中文摘要  4-5
Abstract  5-6
目录  6-7
1 前言  7-14
  1.1 细胞凋亡与人类疾病  7
  1.2 细胞凋亡与细胞容积调节  7-9
  1.3 细胞凋亡与氯通道  9-10
  1.4 白血病及其临床治疗  10-12
  1.5 Disulfiram(双硫仑,DS)简介  12-13
  1.6 研究目的  13
  1.7 研究内容  13-14
2 材料与方法  14-27
  2.1 材料  14-17
  2.2 方法  17-27
3 结果  27-43
  3.1 氯通道参与Molt4细胞的容积调节  27-34
  3.2 氯通道参与双硫仑与铜离子诱导的Molt4细胞的凋亡性容积缩小过程  34-39
  3.3 氯通道参与双硫仑与铜离子诱导的Molt4细胞的凋亡  39-43
4 讨论  43-46
  4.1 氯通道参与了Molt4细胞的容积调节过程  43-44
  4.2 氯通道参与了DS/Cu~(2+)诱导的Molt4细胞凋亡  44-46
5 结论  46-47
参考文献  47-52
主要缩略词汇表  52-53
攻读学位期间发表的学术论文目录  53-54
致谢  54

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病
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