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NLK-shRNA对H1299肺腺癌细胞增殖抑制的实验研究

作　者: 董苏伟
导　师: 宋鑫
学　校: 昆明医学院
专　业: 肿瘤学
关键词: 非小细胞肺癌 NLK 细胞周期 增殖 凋亡
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：肿瘤是一类细胞周期病。细胞周期调控失常、细胞增殖失控被认为是恶性肿瘤发生的重要机制；前期研究认为,NLK与多种肿瘤的增殖与凋亡密切相关。本研究拟证实在非小细胞肺癌中阻断内源性NLK的表达对NSCLC细胞生物学行为的影响,为进一步研究NSCLC发病分子机理提供科学依据。方法：Westemblotting验证NLK在NSCLC细胞系：A549、H1299、NCI-H1581、NCI-H522及SK-MES-1中的表达情况；利用慢病毒载体系统构建NLK-shRNA干扰载体,感染H1299肺腺癌细胞系,获得NLK干扰细胞系,并以此为研究对象,利用real-time PCR验证慢病毒感染后NLK的表达水平；细胞增殖实验、克隆形成实验、流式细胞周期检测及凋亡实验研究NLK与NSCLC细胞增殖、凋亡的生物学行为的关系。结果：Westemblotting结果显示：NLK在A549、H1299、NCI-1581、NCI-H522及SK-MES-1五株非小细胞肺癌细胞系中均有表达；NLK-shRNA慢病毒干扰载体感染NSCLC H1299细胞系后,real-time PCR检测结果显示内源性NLK表达被抑制；●阻断内源性NLK表达后,细胞增殖实验结果提示细胞增殖能力减弱；克隆形成实验结果显示细胞克隆形成减少；流式细胞周期结果发现细胞周期发生G1期阻滞;凋亡实验证实凋亡细胞比例显著增加。结论：NLK异常表达可能通过影响细胞的增殖与凋亡参与NSCLC的恶性演进。

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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