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ANG-1对大鼠糖尿病视网膜病变新生血管形成的影响

作　者: 陈桦
导　师: 曾莉
学　校: 南昌大学
专　业: 眼科学
关键词: 血管生成素-1 血管内皮生长因子 糖尿病视网膜病变
分类号: R774.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:通过建立大鼠糖尿病视网膜病变模型,将血管生成素-1(Ang-1)注射于大鼠眼玻璃体腔内,观察Ang-1对糖尿病大鼠视网膜血管内皮细胞生长因子(VEGF)及新生血管形成的影响,为Ang-1治疗糖尿病视网膜病变提供有实用价值的实验依据。方法:48只健康SD大鼠,随机抽取16只作为正常对照组(A组),标准条件饲养。另外32只大鼠以65mg/kg的剂量行左下腹腔注射10%链尿佐菌素溶液(STZ),并于24小时后检测血糖,将餐后血糖浓度持续稳定大于16.7mmol/L的大鼠定为糖尿病模型,相同条件喂养4个月后行眼底血管荧光造影检查大鼠出现视网膜病变(DR)即为成模,当即随机分为两组(每组16只),阳性对照组(B组)和Ang-1治疗组(C组)。阳性对照组(B组)行双眼玻璃体腔注射磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)5μl,Ang-1治疗组(C组)行双眼玻璃体腔注射160μg/mL Ang-1 5μl。三天后重复上述处理一次,继续观察三天后处死三组大鼠取视网膜组织免疫组化法检测比较VEGF的表达,病理切片HE染色比较突出视网膜内界膜内皮细胞核数。结果:(1)免疫组化法检查:阳性对照组(B组)与正常对照组(A组)比较视网膜VEGF免疫组化染色表达水平明显增强,积分光密度测定值比较差异有统计学意义(P<0.05);Ang-1治疗组(C组)与正常对照组(A组)比较视网膜VEGF免疫组化染色表达水平明显增强,积分光密度测定值比较差异有统计学意义(P<0.05);Ang-1治疗组(C组)与阳性对照组(B组)相比VEGF免疫组化染色表达较弱,积分光密度值比较差异有统计学意义(P<0.05);(2)HE染色病理学切片示:阳性对照组(B组)与正常对照组(A组)比较突破视网膜内界膜内皮细胞核数明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);Ang-1治疗组(C组)与正常对照组(A组)比较突破视网膜内界膜内皮细胞核数明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);Ang-1治疗组(C组)与阳性对照组(B组)比较突破视网膜内界膜内皮细胞核数减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠出现糖尿病视网膜病变时视网膜会产生大量的VEGF,将Ang-1注射于玻璃体腔内对STZ诱导的糖尿病视网膜病变大鼠VEGF的表达有一定的抑制作用,并有效的降低了视网膜新生血管的生成,从而对糖尿病视网膜病变起到一定的治疗作用。

全文目录


摘要  3-5
ABSTRACT  5-10
第1章 引言  10-12
第2章 材料与方法  12-18
  2.1 实验材料  12-13
    2.1.1 研究对象  12
    2.1.2 实验试剂  12
    2.1.3 实验仪器  12-13
  2.2 实验方法  13-18
    2.2.1 溶液的配置  13
    2.2.2 糖尿病视网膜病变模型的建立  13-14
      2.2.2.1 饲养条件  13
      2.2.2.2 模型建立  13-14
      2.2.2.3 实验分组及处理  14
    2.2.3 给药方法  14
    2.2.4 标本的采集  14-15
    2.2.5 检测指标及方法  15-17
      2.2.5.1 免疫组织化学方法检测  15-16
      2.2.5.2 视网膜组织病理检测  16
      2.2.5.3 免疫组化结果评定  16
      2.2.5.4 组织 HE 染色切片结果评定  16-17
    2.2.6 统计学分析  17-18
第3章 结果  18-20
  3.1 糖尿病视网膜病变大鼠全身及眼部情况  18
    3.1.1 大鼠全身情况  18
    3.1.2 眼底血管荧光造影观察眼后段情况  18
  3.2 免疫组化法检测视网膜中 VEGF 表达的结果  18-19
  3.3 视网膜组织病理学检查结果  19-20
第4章 讨论  20-26
  4.1 STZ 诱导 SD 大鼠糖尿病模型建立的机制  20-21
  4.2 糖尿病视网膜病变的病理改变  21-22
  4.3 血管内皮细胞生长因子（VEGF）的影响  22-23
  4.4 血管生成素-1（ANG-1）与糖尿病视网膜病变  23-26
第5章 结论  26-27
第6章 问题与展望  27-28
致谢  28-29
参考文献  29-34
攻读学位期间的研究成果  34-35
附带综述  35-46

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中图分类: > 医药、卫生 > 眼科学 > 视网膜及视神经疾病 > 视网膜疾病
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