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聚乙烯亚胺修饰纳米羟基磷灰石基因载体的转染率研究

作　者: 吴正茂
导　师: 段晓明
学　校: 南华大学
专　业: 消化内科
关键词: 羟基磷灰石聚乙烯亚胺基因载体转染效率分散稳定性
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:评估用聚乙烯亚胺修饰后纳米羟基磷灰石基因载体的分散稳定性能和转染率,为提高纳米羟基磷灰石基因载体分散稳定性能和转染率奠定理论基础。方法:向HA纳米颗粒胶体液中加入一定浓度的聚乙烯亚胺溶液,透射电镜下观察聚乙烯亚胺修饰后羟基磷灰石纳米颗粒的形貌及粒径;用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计分析修饰后的HA纳米颗粒携带、保护DNA的能力,及nHAP-PEI/DNA解离的方式,Zeta电位仪测定nHAP-PEI和HA在酸、碱、中性环境中的电位, MTT比色法检测nHAP-PEI(10KD)对HepG2细胞的毒性,选用增强型绿色荧光蛋白质粒pEGFP-N1与nHA-PEI结合后,分别转染真核细胞HepG2、Hela、SW620,计算其转染率。结果:nHAP-PEI(10KD)分散程度好,粒径60-80nm,在PH7.2时,Zeta电位42.87mV,修饰后的HA纳米颗粒负载量较未经修饰的HA高,且有携带、保护DNA的能力。结合到HAP-PEI纳米颗粒上的DNA能用PB溶液洗脱下来,能转染实验中的细胞,转染效果最好的是HepG2细胞,其次Hela、SW620,转染率高于PEI(10KD)、nHA,但低于脂质体。结论:通过阳离子PEI修饰HAP,可有效将增强型绿色荧光蛋白质粒转入HepG2细胞,HAP-PEI(10KD)纳米颗粒复合物有望成为基因传递的有效载体。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-8
一、前言  8-10
二、材料和方法  10-20
三、结果  20-29
四、讨论  29-36
五、结论  36-37
参考文献  37-41
综述  41-50
成果目录  50-51
致谢  51

聚乙烯亚胺修饰纳米羟基磷灰石基因载体的转染率研究

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