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化浊养胃法对肝胃不和证大鼠食欲及相关神经肽影响的实验研究

作　者: 孙中强
导　师: 李佃贵；裴林
学　校: 河北医科大学
专　业: 中医内科学
关键词: 化浊养胃瘦素食欲素A 肝胃不和激怒模型
分类号: R259
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:观察化浊养胃法治疗对肝胃不和证大鼠食欲、食欲素A及瘦素水平的影响,探讨其相互关系,试图从另一个角度初步探讨在肝胃不和证治疗中浊对食欲变化影响的可能机制。方法:清洁级雄性Wistar大鼠58只,体重200-240g,由河北医科大学实验动物中心提供,随机将大鼠分为Ⅰ模型检测组(n=8);Ⅱ实验组(n=50)。对Ⅰ组大鼠随机分为模检1组(n=4)和模检2组(n=4)。对Ⅱ组采用随机区组设计分为5组,每组大鼠10只,即正常组(A)、激怒模型对照组(B)、药物治疗低剂量组(C)、药物治疗中剂量组(D)、药物治疗高剂量组(E)。每日上午9点各组给以一定量的鼠食,由河北医科大学实验动物中心提供,次日上午9点测定各组鼠食剩余量。对模检2组、激怒模型对照组、药物治疗低剂量组、药物治疗中剂量组、药物治疗高剂量组5组大鼠进行鼠尾疼痛刺激激怒方法建立模型。连续造模7天后,模检1组和模检2组禁食12小时进行模型检验,检验期间造模各组大鼠继续进行造模刺激。模型检验方法:首先从行为上观察,刺激组大鼠饮水、进食明显减少,体重随之下降,甚至不思饮食的症状,情志上表现为困倦状,并出现毛发变暗、枯黄样变化;其次从实验室检查上来检测,对8只检验大鼠采取断头法处死,大鼠断头后快速留取血标本,采用酶联免疫吸附法进行血清瘦素水平测定,对比两组大鼠检测结果,模检2组大鼠血清瘦素水平高于模检1组,对检测结果进行两样本配对t检验提示两组差异有统计学意义,造模成功。造模成功后对各组大鼠停止继续激怒刺激,正常组和激怒模型对照组大鼠每日2ml蒸馏水灌胃进行假治疗,各药物治疗组开始每日应用不同剂量化浊养胃汤灌胃治疗,将中药浓缩为原液的1/10,由河北省中医药研究院煎制。C组按成人剂量的10倍量给大鼠灌胃给药,每次0.5ml中药浓缩液加1.5ml蒸馏水;D组按成人剂量的20倍量给大鼠灌胃给药,每次1 ml中药浓缩液加1ml蒸馏水。、E组按成人剂量的40倍量给大鼠灌胃给药,每次2ml中药浓缩液。各组每天灌胃给药一次。连续治疗7天后对所有分组大鼠同天上午采取断头法处死,大鼠断头后快速在冰盒上分离出下丘脑及留取血标本,采用酶联免疫吸附法进行血清瘦素水平测定,采用放射免疫法对血浆和下丘脑组织中的食欲素A进行测定。本实验的目的在于,根据不同剂量药物治疗组与对照组的检测结果,观察药物治疗对大鼠食欲、食欲素A及瘦素水平的影响,从而从理论上初步探讨在肝胃不和证治疗中化浊养胃法对食欲变化影响的可能机制。结果:1大鼠食量变化:正常组食量始终比较稳定;造模期激怒模型对照组及各药物治疗组大鼠食量迅速减少,下降趋势明显;治疗期激怒模型对照组大鼠食量继续保持低食欲状态,食量恢复不明显,药物治疗低剂量组大鼠食量逐步回升,但日均食量仍远低于正常组大鼠,药物治疗中剂量组大鼠食量逐步稳定回升,到治疗期结束已基本恢复到接近正常组大鼠日均食量水平,药物治疗高剂量组大鼠食量回升趋势明显,治疗后期食量甚至已经超过正常组大鼠日均食量。2大鼠体重变化:初始分组后:各组大鼠之间的体重无显著性差异(P>0.05)。造模成功后:各组大鼠体重对比有显著性差异(P<0.01),两两比较结果显示正常组与其他各组大鼠体重均有显著性差异(P<0.001),除正常组外其它各组间大鼠体重均无显著性差异(P>0.05),从均数看刺激造模各组大鼠体重明显低于正常组(224.10±10.34g)。治疗后:各组大鼠体重对比有显著性差异(P<0.01),两两比较结果显示正常组(A)和药物治疗高剂量组(E)之间、药物治疗中剂量组(D)和药物治疗高剂量组之间大鼠体重均无显著性差异(P>0.05),A组与D组相比0.01<P<0.05,激怒模型对照组(B)和药物治疗低剂量(C)组间大鼠体重无显著性差异(P>0.05),B组、C组和A组、D组、E组之间大鼠体重均有显著性差异(P<0.001),从均数看A组(223.90±10.19g)、D组(217.70±10.92g)、E组(220.50±11.56g)大鼠体重明显高于B组(184.10±7.58g)、C组(190.40±9.97g)大鼠体重。3大鼠血清瘦素水平:各组大鼠血清瘦素水平对比有显著性差异(P<0.001)。两两比较结果显示激怒模型对照组和药物治疗低剂量组之间大鼠血清瘦素水平无显著性差异(P>0.05),其他各组间大鼠血清瘦素水平均有显著性差异(P<0.05),从均数看激怒模型对照组(16.38±1.69ng/ml)和药物治疗低剂量组(15.10±1.65ng/ml)大鼠血清瘦素水平明显高于其他三组,药物治疗中剂量组(11.06±0.76ng/ml)和药物治疗高剂量(10.29±0.57ng/ml)组大鼠血清瘦素水平接近于正常组(11.99±0.60ng/ml)。4大鼠血浆食欲素A水平:各组大鼠血浆食欲素A水平对比有显著性差异(P<0.001)。两两比较结果显示正常组和药物治疗中剂量组之间大鼠血浆食欲素A水平无显著性差异(P>0.05),其他各组间大鼠血浆食欲素A水平均有显著性差异(P<0.05),从均数看激怒模型对照组(700.35±23.59pg/ml)和药物治疗低剂量组(652.16±22.95pg/ml)大鼠血浆食欲素A水平明显高于其他三组,药物治疗中剂量组(581.31±22.53pg/ml)和药物治疗高剂量(548.33±29.99pg/ml)组大鼠血浆食欲素A水平接近于正常组(576.51±15.06pg/ml)。5大鼠下丘脑食欲素A水平:各组大鼠下丘脑食欲素A水平对比有显著性差异(P<0.001)。两两比较结果显示正常组和药物治疗中剂量组之间大鼠下丘脑食欲素A水平无显著性差异(P>0.05),其他各组间大鼠下丘脑食欲素A水平均有显著性差异(P<0.05),从均数看激怒模型对照组(3.52±0.24pg/μg)低于药物治疗低剂量组(3.82±0.26pg/μg)大鼠下丘脑食欲素A水平,并明显低于其他三组大鼠下丘脑食欲素A水平,药物治疗中剂量组(5.18±0.33pg/μg)和药物治疗高剂量(5.54±0.31pg/μg)组大鼠下丘脑食欲素A水平接近于正常组(4.94±0.25pg/μg)。6大鼠血清瘦素水平与血浆食欲素A水平的相关性:大鼠血清瘦素水平(x)与血浆食欲素A水平(y)呈显著正相关关系,直线回归方程为y=367.549+18.8331x (r=0.8165,p<0.01)。7大鼠血清瘦素水平与下丘脑食欲素A水平的相关性:大鼠血清瘦素水平(x)与下丘脑食欲素A水平(y)呈显著负相关关系,直线回归方程为y=8.1209-0.2717x (r=-0.8526,p<0.01)。8大鼠血浆食欲素A水平与下丘脑食欲素A水平的相关性:大鼠血浆食欲素A水平(x)与下丘脑食欲素A水平(y)呈显著负相关关系,直线回归方程为y=11.8539-0.0119x (r=-0.8585,p<0.01)。结论:1.通过连续激怒刺激法建立大鼠肝胃不和证模型,模型大鼠表现为饮水、进食明显减少,甚至不思饮食,呈困倦状,毛发变暗、枯黄样变化,体重随之下降,失去正常体重曲线;如不给予治疗,进食状况及体重不能在短时间内恢复,营养不良的状态得不到及时纠正。2.通过化浊养胃的方法可以明显提高肝胃不和证大鼠的食量和体重,其营养状况相比非治疗状态下大鼠得到快速明显的恢复,这一现象可能与该方法药物影响了瘦素、食欲肽A等食欲相关神经肽的分泌水平有关。3.与不采取治疗的大鼠相比,采用化浊养胃法治疗的大鼠血清瘦素和血浆食欲素A分泌水平明显降低,下丘脑食欲素A分泌水平明显升高,并随着药量的加大这种差异越明显。4.通过连续激怒刺激法建立的大鼠肝胃不和证模型,大鼠血清瘦素水平与血浆食欲素A水平表现为正相关关系,血清瘦素水平与下丘脑食欲素A水平表现为负相关关系,血浆食欲素A水平与下丘脑食欲素A水平表现为负相关关系。

全文目录

中文摘要  4-8
英文摘要  8-14
研究论文化浊养胃法对肝胃不和证大鼠食欲及相关神经肽影响的实验研究  14-38
  前言  14-16
  材料与方法  16-23
  结果  23-25
  附图  25-28
  附表  28-30
  讨论  30-35
  参考文献  35-38
综述  38-47
致谢  47-48
个人简历  48

化浊养胃法对肝胃不和证大鼠食欲及相关神经肽影响的实验研究

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