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不同电针频率对山羊痛阈和中枢脑啡肽表达水平的影响

作　者: 周敏雁
导　师: 丁明星
学　校: 华中农业大学
专　业: 特种经济动物饲养
关键词: 电针脑啡肽山羊频率痛阈表达水平
分类号: S858.27
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 44次
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内容摘要

电针镇痛(Electroacupuncture, EA)是一种以电刺激代替传统手针而达到镇痛效果的现代方法。大量的研究表明,电针不仅具有镇痛的作用,而且具有双向调节作用,能使手术中的动物生理指标保持稳定,术后更易于恢复。20世纪60年代以来,针刺被广泛运用于动物手术中麻醉。反刍动物针刺镇痛效果远好于其他种属动物,其针刺复合药物的使用不仅克服了单纯药物麻醉引起的瘤胃臌气、胃内容物反流等问题,而且显示出极好的镇痛效果,具有良好的应用前景。小动物(如大鼠)体内研究表明,中枢的内源性阿片肽类物质(脑啡肽、p-内啡肽、强啡肽)在针刺镇痛中起着非常重要的作用。不同频率诱导脑内不同镇痛物质的释放,产生不同的镇痛效果。低频(2-30 Hz)主要引起脑啡肽和p-内啡肽的释放,高频(30-100 Hz)诱导脊髓内强啡肽释放,2／100 Hz交替电针能同时诱导这三种阿片肽的释放。兽医实践表明反刍动物针刺镇痛的适宜频率为高频(30-100 Hz),高于人和小实验动物的适宜频率(2-15 Hz),其针刺镇痛效果优于其他种属动物。然而,反刍动物的调节机制是否与人和小实验动物相同尚不清楚。针刺镇痛理论的研究使针灸真正意义上被西方医学所接受,并被广泛应用于人医临床实践。目前,兽医针刺镇痛理论尚没有严谨的实验支持,这已成为我国兽医针灸在国内外推广应用的瓶颈。脑啡肽是参与针刺镇痛调节的主要中枢阿片肽物质之一,其释放具有频率依赖性。目前,人们尚不清楚高频电针山羊中枢脑啡肽释放的频谱规律。本实验旨在研究不同频率电针刺激下,山羊的痛阈变化及中枢脑啡肽表达量与分布规律,确定山羊电针的最佳镇痛频率,阐明中枢脑啡肽参与反刍动物高频针刺镇痛的作用机理,为针刺镇痛在兽医临床的运用与推广提供理论依据。本实验选取健康成年杂交山羊35只,体重为23-27 kg,随机分为5组(对照组、2 Hz、40 Hz、60 Hz和100 Hz)。电针组山羊采用“百会-髫甲”、“耳根-三阳络”组穴电针30 min,电针结束时测定山羊痛阈,然后灌流固定并取脑,制作石蜡切片,采用SABC免疫组化法,观察各组山羊中枢内脑啡肽在相关镇痛核团伏核、隔区、尾核、杏仁核、视上核、下丘脑室旁核、下丘脑腹内侧核、中脑导水管周围灰质、黑质、中缝背核、臂旁核、蓝斑核、中缝大核及脊髓背角中的表达情况。采用钾离子透入法测定痛阈,结果表明电针频率为60 Hz时山羊的镇痛效果最佳,可使山羊痛阈提高91%,与其他电针组相比有显著性差异(P<0.05)；其次为40 Hz电针组,能提高山羊痛阈69%(P<0.05),与100 Hz、2 Hz电针组相比差异显著；100 Hz组效果优于2Hz组,但无显著性差异,分别提高山羊痛阈41%和35%(P>0.05)。脑啡肽免疫组化结果显示,电针频率为40 Hz和60 Hz时,脑啡肽在伏核、隔区、尾核、杏仁核、中脑导水管周围灰质、下丘脑室旁核、下丘脑腹内侧核、PAG、黑质及蓝斑的表达量最多,与对照组相比差异显著(P<0.05)；60 Hz电针组伏核、隔区、尾核、杏仁核、中脑导水管周围灰质、下丘脑室旁核和蓝斑内脑啡肽表达量高于40 Hz电针组,其中杏仁核和中脑导水管周围灰质显著高于40 Hz(P<0.05)。电针频率为100 Hz时臂旁核内脑啡肽的含量高于其他组,与对照组差异显著(P<0.05)；电针频率为2 Hz时,脊髓内脑啡肽含量最高,与对照组差异显著(P<0.05)。中缝大核和视上核内所有电针组脑啡肽含量变化不明显,与对照组差异不显著(P>0.05)。电针提高山羊的痛阈,60 Hz对山羊的镇痛效果最佳；脑啡肽参与山羊针刺镇痛的调节,且不同核团脑啡肽的释放对电针频率有一定的依赖性；山羊伏核、杏仁核、隔区、尾核、下丘脑室旁核、下丘脑腹内侧核、中脑导水管周围灰质、中缝背核、黑质、臂旁核、蓝斑对高频电针刺激敏感,释放大量脑啡肽调节针刺镇痛作用,而脊髓背角释放脑啡肽介导低频电针镇痛。

全文目录

摘要  7-9
ABSTRACT  9-12
缩略词表  12-13
1 引言  13-24
  1.1 文献综述  13-22
    1.1.1 针刺镇痛研究进展  13-17
    1.1.2 脑啡肽研究进展  17-18
    1.1.3 镇痛相关核团研究进展  18-22
  1.2 研究内容  22
  1.3 研究目的及意义  22-24
2 材料和方法  24-32
  2.1 材料  24-26
    2.1.1 实验动物  24
    2.1.2 主要仪器设备  24
    2.1.3 主要化学试剂  24-25
    2.1.4 主要溶液试剂配制  25-26
  2.2 实验方法  26-31
    2.2.1 针刺镇痛  26-27
    2.2.2 痛阈测定  27
    2.2.3 灌流固定  27-28
    2.2.4 取材  28
    2.2.5 组织切片  28-29
    2.2.6 免疫组化  29-31
  2.3 数据分析  31-32
3. 结果分析  32-37
  3.1 不同频率电针对山羊痛阈的影响  32-33
  3.2 不同频率电针对山羊中枢M-ENK表达量的影响  33-37
4 讨论  37-46
  4.1 不同频率电针对痛阈的影响  37-38
  4.2 不同频率电针对山羊中枢内M-ENK表达量的影响  38-43
  4.3 高频电针镇痛实验动物选择  43-44
  4.4 电针的影响因素  44-45
  4.5 免疫组化的影响因素  45-46
5 结论  46-47
6 问题与展望  47-48
参考文献  48-63
致谢  63-64
附录  64-77

不同电针频率对山羊痛阈和中枢脑啡肽表达水平的影响

内容摘要

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