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目的：研究氢离子相关通道(NHE, V-ATPase, H+-K+-ATPase)在人原发性肝癌细胞中的表达,以及在控制肿瘤细胞生长、分化及转移中的作用,从而为原发性肝癌的治疗提供新的药物靶点。方法：选择正常人肝脏和原发性肝癌手术切除病人,分为正常肝脏组和肝癌组。运用Real-Time RT-PCR技术,Western-Blot技术分别检测其中氢离子相关通道的mRNA和蛋白质表达。选取健康雄性BABL/cnu/nu,裸鼠年龄5-6w,体重20-25g,由第三军医大学实验动物中心提供,SPF级条件下饲养,成功建立裸鼠人肝癌细胞株皮下-肝内移植模型后,随机分成建模组,泮托拉唑20mg组(PPZ 20mg),泮托拉唑40mg组(PPZ 40mg),泮托拉唑80mg组(PPZ 80mg), BafilomycinA1组(BM),二甲基亚砜组(DMSO)。每天腹腔内注射相应药物,按1w,2w,3w,4w不同时间点,分批对应处死裸鼠,开腹观察体内肿瘤生长,变化的情况,并在HE染色下进一步观察病理变化情况。结果：①.正常肝脏与肝癌内氢离子相关通道mRNA表达情况：正常肝脏组与肝癌组比较,V-ATPase c, V-ATPase a, V-ATPase C, NHE1四个通道的mRNA表达肝癌组高于正常肝脏组。②.正常肝脏与肝癌内氢离子相关通道蛋白质表达情况：正常肝脏组与肝癌组比较,V-ATPase c在肝癌组中的表达明显高于正常肝脏组(P<0.01)；V-ATPase a, V-ATPase C,V-ATPase B, NHE1, NHE3在正常肝脏组与肝癌组中的表达相似(P>0.05); H+-K+ATPase alpha, H+-K+ATPase beta在正常肝脏组与肝癌组中均无表达。③.氢离子相关通道抑制剂对肝癌细胞生长的影响：建立裸鼠人肝癌皮下-肝内移植模型成功率约100%。泮托拉唑三个剂量组(20mg,40mg,80mg)与建模组相比分别在1周,2周,3周,4周均能有效的抑制肿瘤生长,肿瘤体积指数下降,比较差异有统计学意义(p<0.05),并在三个剂量组间存在递减关系。.而Bafilomycin A1组与DMSO组相比分别在1周,2周,3周,4周作用相似(p>0.05).与建模组相比,均有使肿瘤减小的趋势。另外,组织学观察表明,泮托拉唑组实体瘤内见大量的坏死组织。结论：(1)氢离子相关通道中V-ATPase c, V-TAPase a, V-ATPase C,NHE1的mRNA在肝癌中表达明显增高,但只有V-ATPase c的蛋白质表达在肝癌中明显增高。(2) V-ATPase抑制剂能明显抑制肝癌细胞的生长,促进肝癌细胞的坏死.
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