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苦马豆根瘤菌次生代谢产物的研究

作　者: 刘巧利
导　师: 韦革宏
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 微生物学
关键词: 根瘤菌 次生代谢产物 化学成分 抑菌活性
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 35次
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内容摘要


本试验以13株苦马豆根瘤菌为材料,对根瘤菌次生代谢产物进行化学成分系统预试和抑菌活性的研究,并对菌株CCNWGS0187氯仿萃取物进行分离纯化。化学成分系统预试的结果显示苦马豆根瘤菌可以产生大量结构复杂的次生代谢产物,例如黄酮类、生物碱类、氨基酸类、甾体、酚类、香豆素内酯以及蒽醌等类物质。说明根瘤菌中极可能具有合成此类化合物的生物合成途径,而且与寄主植物代谢途径紧密关联。抑菌实验结果显示大多供试菌对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都有一定的抑制作用。石油醚相和乙酸乙酯相萃取物对两种病原菌抑制效果比较弱。正丁醇和水相萃取物对大肠杆菌的抑制作用较强,氯仿相萃取物对金黄色葡萄球菌的抑制作用较强。菌株CCNWGS0187对两种病原菌的抑制效果较其他菌株明显,其氯仿、正丁醇和水相萃取物的MIC和MBC值与抗生素的值接近或小于常用抗生素的值。通过硅胶柱层析、重结晶等手段分离纯化CCNWGS0187发酵液氯仿萃取物,共获得3种化合物,编号为IV,VII,VIII;分别属于α-氨基酸不饱和内酯、甾体萜类、脂肪酸。化合物VIII经MS,1H-NMR,13C-NMR,DEPT,H-HCOSY分析鉴定为十六碳饱和脂肪酸。

全文目录


摘要  5-6
Abstract  6-9
第一章 文献综述  9-21
  1.1 植物内生菌的研究  9-14
    1.1.1 内生菌的起源、分布及其生物多样性  10
    1.1.2 内生菌次生代谢产物的多样性  10-11
    1.1.3 内生菌产生的生物活性物质  11-14
    1.1.4 内生菌与宿主植物的相互作用  14
  1.2 苦马豆次生代谢产物的研究  14-17
    1.2.1 主要有效化学成分  15
    1.2.2 主要的药理作用  15-17
  1.3 根瘤菌的相关研究  17-19
    1.3.1 根瘤菌与豆科植物的共生固氮体系  17-18
    1.3.2 根瘤菌次生代谢产物  18-19
    1.3.3 苦马豆根瘤菌的研究  19
  1.4 本研究的目的与意义  19-21
第二章 苦马豆根瘤菌代谢物化学成分初探  21-28
  2.1 材料  21
    2.1.1 实验材料  21
    2.1.2 实验仪器  21
    2.1.3 试剂  21
  2.2 方法  21-24
    2.2.1 菌株的活化  21
    2.2.2 菌株的发酵和产物的提取  21
    2.2.3 发酵产物定性检测  21-24
  2.3 结果与分析  24-27
    2.3.1 试管反应结果  24-25
    2.3.2 滤纸片以及薄层层析（TLC）显色反应结果  25-26
    2.3.3 目标菌株CCNWGS0187 系统预试结果  26-27
  2.4 讨论  27-28
第三章 苦马豆根瘤菌发酵提取物的抗菌活性研究  28-33
  3.1 材料  28
    3.1.1 菌种  28
    3.1.2 培养基  28
    3.1.3 试剂  28
    3.1.4 仪器  28
  3.2 方法  28-29
    3.2.1 滤纸片法测13 株供试菌株发酵产物的抑菌活性  28-29
    3.2.2 二倍稀释法测定菌株CCNWGS0187 各萃取相MIC 和MBC  29
  3.3 结果与分析  29-31
    3.3.1 抑菌活性实验  29-30
    3.3.2 菌株CCNWGS0187 的MIC 和MBC 的测定  30-31
  3.4 讨论  31-33
第四章 菌株CCNWGS0187 发酵提取物的化学成分研究  33-41
  4.1 材料  33
    4.1.1 材料  33
    4.1.2 试剂  33
    4.1.3 仪器  33
  4.2 方法  33-34
    4.2.1 次生代谢产物的提取  33-34
    4.2.2 分离纯化  34
    4.2.3 化学定性鉴定  34
    4.2.4 纯度检测  34
    4.2.5 结构解析  34
  4.3 结果与分析  34-38
    4.3.1 萃取物制备  34
    4.3.2 各样品的分离纯化  34-36
    4.3.3 各化合物的纯度鉴定  36-37
    4.3.4 各样品的化学定性鉴定  37
    4.3.5 化合物VIII 的理化性质  37
    4.3.6 化合物VIII 结构解析  37-38
  4.4 讨论  38-41
第五章 结论  41-43
  5.1 苦马豆根瘤菌化学成分初探结果  41
  5.2 抗菌活性实验结果  41-42
  5.3 菌株CCNWGS0187 化学成分研究  42-43
参考文献  43-48
附录  48-51
致谢  51-52
作者简介  52

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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