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药用植物北柴胡不定根离体培养和显微结构研究

作　者: 韩丹
导　师: 郝建平
学　校: 山西大学
专　业: 植物学
关键词: 北柴胡不定根组织培养次生代谢产物柴胡皂苷显微结构
分类号: R282.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 40次
引　用: 2次
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内容摘要

北柴胡(Bupleurum chinese DC.)是伞形科(Umbelliferae)柴胡属(BupleurumL.)的多年生草本植物和常用大宗药材,也是《中华人民共和国药典》规定的药用柴胡的原植物,为药用柴胡的正品。北柴胡以根入药,根中含有以柴胡皂苷为主要药用成分的次生代谢物质,具有抗病毒、抗细菌内毒素、抗炎、抗肿瘤、抗惊厥、解热、降血脂以及促进分泌、保肝、提高免疫力等功效,药用价值很高。本论文以北柴胡的不定根为研究对象,比较了基本培养基、外源植物激素、光照条件、温度以及碳源对不定根诱导的影响;通过设置不同的培养条件(光照、pH、温度等)和不同的营养条件(不同浓度的碳、氮、磷源,不同的盐浓度等),探讨了各种因子对不定根生长和柴胡皂苷合成的影响,建立了北柴胡不定根离体培养体系;观察、比较了北柴胡自然生长的根与组织培养中诱导的不定根在显微结构上的异同点。研究结果表明:1、北柴胡不定根的诱导受到培养基、外源激素、光照条件以及蔗糖质量浓度的影响。通过试验筛选出诱导北柴胡不定根的最适培养基为1/2MS+0.3mg/L NAA+1.0mg/L DSC+40g/L蔗糖,最适培养条件为(20±2)℃和14h/d光照(1500lx～2000lx)。2、不同的培养条件和不同的营养条件对北柴胡不定根的生长和柴胡皂苷的合成均有影响,以不定根生长及柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的合成量为选择指标,发现(25±2)℃,黑暗条件以及1/2MS+0.5mg/LDSC+50g/L蔗糖的培养基既有利于北柴胡不定根的生长,又可促进次生代谢产物的合成。3、北柴胡根的形态和生长发育阶段与根的生长环境有着密切的关系。不定根在原分生组织阶段,根尖结构只有分生区和伸长区,没有根毛区和根冠;在初生分生组织阶段和初生结构阶段,细胞质浓厚,细胞核大,比同一阶段的自然生长的根分生能力强。实验结果为研究北柴胡不定根次生代谢产物的合成及利用不定根进行柴胡皂苷的工业化生产提供了实验依据,对于我国正在实施的中医药现代化计划具有特殊的煮义。

全文目录

中文摘要  8-9
ABSTRACT  9-11
1 综述  11-17
  1.1 我国药用植物资源现状  11
  1.2 药用植物组织培养研究现状  11-13
    1.2.1 药用植物快速繁殖  12
    1.2.2 药用植物有效成分生产  12-13
  1.3 柴胡属植物研究现状  13-17
    1.3.1 柴胡属植物的分类系统  13-14
    1.3.2 柴胡属植物的地理分布  14
    1.3.3 中药柴胡的原植物  14
    1.3.4 柴胡生物学研究  14-15
    1.3.5 柴胡主要化学成分及药理活性研究  15-17
2 北柴胡不定根的诱导  17-22
  2.1 材料与方法  17-18
    2.1.1 材料  17
    2.1.2 方法  17-18
  2.2 结果与分析  18-21
    2.2.1 培养基和外源植物激素对不定根诱导的作用  18-19
    2.2.2 光照对不定根诱导的作用  19-20
    2.2.3 温度对不定根诱导的作用  20
    2.2.4 蔗糖对不定根诱导的作用  20-21
  2.3 结论  21-22
3 北柴胡不定根的离体培养  22-36
  3.1 材料与方法  22-25
    3.1.1 材料  22
    3.1.2 仪器  22
    3.1.3 试剂  22-23
    3.1.4 色谱条件  23
    3.1.5 方法  23-25
  3.2 结果与分析  25-34
    3.2.1 基本培养基、DSC和温度对离体不定根增殖及柴胡皂苷合成的影响  25-27
    3.2.2 盐浓度对离体不定根增殖及柴胡皂苷合成的影响  27-28
    3.2.3 碳源对离体不定根增殖及柴胡皂苷合成的影响  28-31
    3.2.4 氮源对北柴胡不定根增殖及柴胡皂苷合成的影响  31-33
    3.2.5 磷源对北柴胡不定根增殖及柴胡皂苷合成的影响  33-34
  3.3 讨论  34-36
    3.3.1 基本培养基、DSC和温度在不定根离体培养和柴胡皂苷合成中的作用  34
    3.3.2 盐浓度在不定根离体培养和柴胡皂苷合成中的作用  34
    3.3.3 碳源在不定根离体培养和柴胡皂苷合成中的作用  34-35
    3.3.4 氮源在不定根离体培养和柴胡皂苷合成中的作用  35
    3.3.5 磷源在不定根离体培养和柴胡皂苷合成中的作用  35-36
4 北柴胡不定根的显微结构  36-39
  4.1 材料与方法  36
    4.1.1 材料  36
    4.1.2 方法  36
  4.2 结果  36-37
    4.2.1 自然生长的根的显微结构  36-37
    4.2.2 组织培养不定根的显微结构  37
  4.3 讨论  37-39
参考文献  39-44
图版说明  44-45
图版Ⅰ  45-46
图版Ⅱ  46-47
致谢  47-48
个人简历  48-49

药用植物北柴胡不定根离体培养和显微结构研究

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