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贵农6号小麦抗白粉病基因的分子标记

作　者: 王宏梅
导　师: 蒋选利
学　校: 贵州大学
专　业: 植物病理学
关键词: 小麦 抗白粉病基因 SCAR SSR 分子标记
分类号: S512.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


小麦种质贵农6号是用中燕96-3（母本）与贵农21（父本）为杂交亲本,从F2开始,运用常规育种方法并结合分子标记辅助选择技术,严格按照矮秆、兼抗、优质、高产等标准对杂种后代进行系统选育,经多代选育而成的新种质。本文运用SCAR,SSR技术,采用分离群体分组分析法（Bulked Segregate Analysis,BSA）,对小麦抗病种质贵农6号抗白粉病基因进行分子标记,验证得出小麦贵农6号含有抗白粉病基因Pm21,SCAR筛选出1条与抗白粉病基因紧密连锁的引物,并对抗病和感病群体进行了验证。1、以感病品种藁98143与抗病种质贵农6号杂交,对杂交后代242个单株F2分离个体和双亲,以小麦白粉病当前流行生理小种315号接种进行抗病性鉴定。结果其中的183个单株表现抗病,59个单株表现感病,卡方（x2）测验表明,x02=0.033＜x0.05,12=3.841,说明F2群体的抗感分离比例符合3R:1S,初步确定贵农6号白粉病抗性是由一对显性基因控制。2、依据BSA方法建立抗病池和感病池,通过SCAR实验,引物Pm21D,E能在抗病亲本贵农6号和抗病池中扩增出大小约为1265bp的标记带,而在感病亲本藁98143和感病池中不能扩增出该标记带,经3次重复均能得出相同的结果。用F2分离群体进行单株分析,结果抗病单株中均有此标记,感病单株均无此标记带。说明贵农6号含有抗白粉病基因Pm21,Pm21基因目前已被定位于6VS染色体上。3、用特异引物D-L,R对贵农6号抗病亲本与藁98143感病亲本和抗病池感病池及杂交后代的F2代抗感单株进行SCAR检测。结果在贵农6号和抗病池中都能扩增出140bp标记,而在感病亲本和感病池中均缺乏该标记,用F2分离群体进行遗传连锁性分析,结果F2的183个抗病单株中有179个抗病单株有此标记,其余4个抗病单株和及F2的59个感病单株均无此标记,经计算,标记与抗病基因间的遗传距离为2.12±0.015cM,说明D-L,R的SCAR标记与贵农6号抗白粉病基因紧密连锁,在杂交育种过程中易于伴随抗病基因遗传,因此可有效利用该标记进行分子辅助选择。4、以贵农6号×藁98143亲本组合及其F2代群体为材料,利用6AS上的SSR标记进行抗白粉病基因的SSR标记筛选,结果所用引物只在感病材料有扩增产物,抗病材料无扩增带。位于6AL上的SSR引物在抗感材料间都有扩增。

全文目录


摘要  5-6
Abstract  6-7
符号说明  7-8
第一部分、文献综述  8-24
引言  24-25
第二部分、贵农6号小麦抗白粉病基因的分子标记研究  25-44
  1 材料与方法  25-26
    1.1 供试材料  25
    1.2 试剂及试验设备  25-26
      1.2.1 试验设备  25
      1.2.2 试剂与常用溶液  25-26
  2 实验方法  26-35
    2.1 F_2代分离群体的构建  26-28
      2.1.1 F_2代的获得  26-27
      2.1.2 白粉病抗性鉴定  27
      2.1.3 BSA(Bulked Segregant Analysis)抗感池分离  27-28
      2.1.4 统计分析方法  28
    2.2 小麦基因组总DNA的提取  28-35
      2.2.1 样品的获取  28
      2.2.2 小麦基因组DNA的提取(CTAB法)  28
      2.2.3 基因组DNA的检测  28-29
      2.2.4 PCR反应  29-32
      2.2.5 遗传连锁性分析  32-35
  3 结果与分析  35-39
    3.1 白粉病抗性鉴定结果  35
    3.2 小麦DNA的提取与纯化  35-36
    3.3 贵农6号抗白粉病基因的标记分析  36-39
      3.3.1 贵农6号抗白粉病基因SCAR分析结果  36
      3.3.2 贵农6号杂交后代单株中特异性标记的检测  36-37
      3.3.3 标记D-L,R的遗传连锁性分析与遗传距离测定  37-38
      3.3.4 贵农6号抗白粉病基因的SSR标记筛选  38-39
  4.结论与讨论  39-44
    4.1 结论  39-40
    4.2 讨论  40-44
      4.2.1 SCAR标记  40
      4.2.2 贵农6号抗白粉病基因Pm21的来源  40
      4.2.3 关于小麦抗白粉病Pm基因  40-41
      4.2.4 关于分离群体分析法(BSA)  41
      4.2.5 分子标记在小麦抗白粉育种中的应用与抗白粉病基因研究展望  41-44
致谢  44-45
参考文献  45-57
附录  57-58

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 麦 > 小麦
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