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一株溶藻细菌对铜绿微囊藻的溶藻机制及其溶藻物质特性的研究
作 者: 牛丹丹
导 师: 刘兆普;郑青松
学 校: 南京农业大学
专 业: 海洋生物学
关键词: 溶藻细菌 铜绿微囊藻 溶藻物质 活性炭 极性 叶绿素荧光特性
分类号: X173
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 13次
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内容摘要
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随着水体富营养化的日益加剧,有害藻类水华爆发日趋频繁,严重影响了水域生态系统的安全及人、畜等的生活健康,因此寻找一种切实可行的方法治理水华迫在眉睫。利用溶藻细菌除藻克服了物理、化学方法的不足和缺陷,成为当前的生物控藻的研究热点,具有非常广阔的应用前景。本研究利用从青岛某富营养化的池塘中分离得到的溶藻细菌,编号为YZ。研究了其对水华主要藻种—铜绿微囊藻(Microcystis aeroginosa Kutzing. var. aeruginosa)的生理生化效应并通过酸碱处理、萃取、活性炭吸附与解吸等方法对其溶藻物质进行初步鉴定。主要研究结果如下:1.通过单因子试验的研究,探索了溶藻细菌YZ的最佳发酵条件,结果发现:当YZ的培养温度为36-38℃,pH为6.0-8.0,转速为180r/min,培养时间为96h时,溶藻效果最明显,菌藻共培养12 d,藻液均接近白色。2.研究了无菌滤液接入量对藻生长的影响,得到最佳投入量,以达到最佳溶藻效果。结果表明:无菌滤液的接入量为10%时,既能排除细菌培养基的干扰,又能达到最大溶藻效果。3.YZ对铜绿微囊藻有强烈的溶解作用,菌液的接种量不同对溶藻效果影响很大。结果表明,加入的无菌滤液越多,溶藻效果越明显,但考虑到改良柠檬酸培养基对杀藻作用干扰,因此按10%的体积比向藻液中接入YZ无菌滤液为最佳。4.YZ可抑制铜绿微囊藻的光合作用。共培养第12d,藻细胞的叶绿素荧光参数均显著下降,Yield、a、Pm分别下降了97%、99%和98%。相对Yield来说,α和Pm下降更显著。5.YZ对铜绿微囊藻的生长构成氧化胁迫,并引起细胞膜脂过氧化反应,共培养12d,藻细胞SOD酶活性先升高再降低,MDA含量不断增加。6.YZ溶藻活性物质具有酸碱稳定性,经pH 2.0和pH 9.0处理的溶藻物质加入铜绿微囊藻藻液4d和12d,仍具有较强的溶藻活性。利用四种不同极性的溶液萃取该活性物质,根据相似相溶的原理,可知该活性物质不是极性很强的亲水性物质,而是一种或多种亲酯性物质。与对照组相比,经活性炭处理的无菌滤液对铜绿微囊藻的降解作用很弱,说明YZ溶藻物质可被活性炭吸附。综上所述,溶藻细菌YZ可以显著破坏铜绿微囊藻的光合系统,抑制其生长,且已被回收吸附,是一种治理水华的理想菌株,虽然目前仅在实验室条件下研究其溶藻特性,但对于大规模生产溶藻剂具有重大的理论意义。
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全文目录
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摘要 7-9ABSTRACT 9-11缩略语 11-12前言 12-13第一章 文献综述 13-29 1. 蓝藻的成因与危害 13-17 1.1 蓝藻水华的成因 13-15 1.2 藻类水华的危害 15-17 2. 去除水华的研究进展 17-21 2.1 物理方法 17-18 2.2 化学方法 18 2.3 生物方法 18-21 3 溶藻细菌的研究现状 21-26 3.1 溶藻细菌的种类及分离方法 21-23 3.2 溶藻物质的研究进展(种类) 23-25 3.3 溶藻方式的研究进展 25-26 3.4 溶藻剂的开发与应用 26 4. 结束语与展望 26-29第二章 溶藻细菌YZ发酵条件的优化 29-43 1. 材料与方法 29-33 1.1 菌种和藻种 29-30 1.2 培养基 30 1.3 试验仪器 30-31 1.4 发酵产物的获得 31 1.5 发酵产物溶藻活性的测定 31 1.6 发酵条件的优化 31-33 2. 结果与分析 33-41 2.1 发酵产物的溶藻效果 33 2.2 发酵条件的确定 33-41 3. 讨论与结论 41-43第三章 溶藻细菌YZ对铜绿微囊藻的溶解效应 43-63 1 材料与方法 44-49 1.1 菌种和藻种 44 1.2 培养基 44-45 1.3 试验仪器 45-46 1.4 藻类的接种与培养 46 1.5 藻的生长曲线及计数方法 46 1.6 溶藻细菌YZ的形态观察与生长曲线的测定 46 1.7 细菌培养基对铜绿微囊藻生长的影响 46-47 1.8 YZ无菌滤液投入量对溶藻效果的影响 47 1.9 溶藻细菌YZ对铜绿微囊藻的生理生化影响 47-49 2. 结果与分析 49-61 2.1 藻的生长曲线及计数方法 49-50 2.2 溶藻细菌YZ的形态观察与生长曲线的测定 50-53 2.3 细菌培养基对铜绿微囊藻生长的影响 53-55 2.4 YZ无菌滤液投入量对溶藻效果的影响 55-56 2.5 溶藻细菌YZ对铜绿微囊藻的生理生化影响 56-61 3. 讨论与结论 61-63第四章 溶藻细菌YZ溶藻物质特异性和稳定性的研究 63-73 1. 材料与方法 63-66 1.1 菌种及藻种 63-64 1.2 培养基 64 1.3 试验器材 64-65 1.4 溶藻物质酸碱稳定性的测定 65 1.5 溶藻物质极性的判定 65 1.6 溶藻物质活性检测 65-66 1.7 活性炭的吸附特性 66 2. 结果与分析 66-70 2.1 溶藻物质酸碱稳定性的测定 66-67 2.2 溶藻物质极性的判定 67-70 2.3 活性炭吸附结果 70 3. 讨论与结论 70-73全文总结 73-75创新点 75-77存在的问题与展望 77-79参考文献 79-87攻读学位期间发表、录用和在投的学术论文目录 87-89致谢 89
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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境科学基础理论 > 环境生物学 > 环境植物学
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