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一株溶藻细菌对铜绿微囊藻的溶藻机制及其溶藻物质特性的研究

作 者: 牛丹丹
导 师: 刘兆普;郑青松
学 校: 南京农业大学
专 业: 海洋生物学
关键词: 溶藻细菌 铜绿微囊藻 溶藻物质 活性炭 极性 叶绿素荧光特性
分类号: X173
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


随着水体富营养化的日益加剧,有害藻类水华爆发日趋频繁,严重影响了水域生态系统的安全及人、畜等的生活健康,因此寻找一种切实可行的方法治理水华迫在眉睫。利用溶藻细菌除藻克服了物理、化学方法的不足和缺陷,成为当前的生物控藻的研究热点,具有非常广阔的应用前景。本研究利用从青岛某富营养化的池塘中分离得到的溶藻细菌,编号为YZ。研究了其对水华主要藻种—铜绿微囊藻(Microcystis aeroginosa Kutzing. var. aeruginosa)的生理生化效应并通过酸碱处理、萃取、活性炭吸附与解吸等方法对其溶藻物质进行初步鉴定。主要研究结果如下:1.通过单因子试验的研究,探索了溶藻细菌YZ的最佳发酵条件,结果发现:当YZ的培养温度为36-38℃,pH为6.0-8.0,转速为180r/min,培养时间为96h时,溶藻效果最明显,菌藻共培养12 d,藻液均接近白色。2.研究了无菌滤液接入量对藻生长的影响,得到最佳投入量,以达到最佳溶藻效果。结果表明:无菌滤液的接入量为10%时,既能排除细菌培养基的干扰,又能达到最大溶藻效果。3.YZ对铜绿微囊藻有强烈的溶解作用,菌液的接种量不同对溶藻效果影响很大。结果表明,加入的无菌滤液越多,溶藻效果越明显,但考虑到改良柠檬酸培养基对杀藻作用干扰,因此按10%的体积比向藻液中接入YZ无菌滤液为最佳。4.YZ可抑制铜绿微囊藻的光合作用。共培养第12d,藻细胞的叶绿素荧光参数均显著下降,Yield、a、Pm分别下降了97%、99%和98%。相对Yield来说,α和Pm下降更显著。5.YZ对铜绿微囊藻的生长构成氧化胁迫,并引起细胞膜脂过氧化反应,共培养12d,藻细胞SOD酶活性先升高再降低,MDA含量不断增加。6.YZ溶藻活性物质具有酸碱稳定性,经pH 2.0和pH 9.0处理的溶藻物质加入铜绿微囊藻藻液4d和12d,仍具有较强的溶藻活性。利用四种不同极性的溶液萃取该活性物质,根据相似相溶的原理,可知该活性物质不是极性很强的亲水性物质,而是一种或多种亲酯性物质。与对照组相比,经活性炭处理的无菌滤液对铜绿微囊藻的降解作用很弱,说明YZ溶藻物质可被活性炭吸附。综上所述,溶藻细菌YZ可以显著破坏铜绿微囊藻的光合系统,抑制其生长,且已被回收吸附,是一种治理水华的理想菌株,虽然目前仅在实验室条件下研究其溶藻特性,但对于大规模生产溶藻剂具有重大的理论意义。

全文目录


摘要  7-9ABSTRACT  9-11缩略语  11-12前言  12-13第一章 文献综述  13-29  1. 蓝藻的成因与危害  13-17    1.1 蓝藻水华的成因  13-15    1.2 藻类水华的危害  15-17  2. 去除水华的研究进展  17-21    2.1 物理方法  17-18    2.2 化学方法  18    2.3 生物方法  18-21  3 溶藻细菌的研究现状  21-26    3.1 溶藻细菌的种类及分离方法  21-23    3.2 溶藻物质的研究进展(种类)  23-25    3.3 溶藻方式的研究进展  25-26    3.4 溶藻剂的开发与应用  26  4. 结束语与展望  26-29第二章 溶藻细菌YZ发酵条件的优化  29-43  1. 材料与方法  29-33    1.1 菌种和藻种  29-30    1.2 培养基  30    1.3 试验仪器  30-31    1.4 发酵产物的获得  31    1.5 发酵产物溶藻活性的测定  31    1.6 发酵条件的优化  31-33  2. 结果与分析  33-41    2.1 发酵产物的溶藻效果  33    2.2 发酵条件的确定  33-41  3. 讨论与结论  41-43第三章 溶藻细菌YZ对铜绿微囊藻的溶解效应  43-63  1 材料与方法  44-49    1.1 菌种和藻种  44    1.2 培养基  44-45    1.3 试验仪器  45-46    1.4 藻类的接种与培养  46    1.5 藻的生长曲线及计数方法  46    1.6 溶藻细菌YZ的形态观察与生长曲线的测定  46    1.7 细菌培养基对铜绿微囊藻生长的影响  46-47    1.8 YZ无菌滤液投入量对溶藻效果的影响  47    1.9 溶藻细菌YZ对铜绿微囊藻的生理生化影响  47-49  2. 结果与分析  49-61    2.1 藻的生长曲线及计数方法  49-50    2.2 溶藻细菌YZ的形态观察与生长曲线的测定  50-53    2.3 细菌培养基对铜绿微囊藻生长的影响  53-55    2.4 YZ无菌滤液投入量对溶藻效果的影响  55-56    2.5 溶藻细菌YZ对铜绿微囊藻的生理生化影响  56-61  3. 讨论与结论  61-63第四章 溶藻细菌YZ溶藻物质特异性和稳定性的研究  63-73  1. 材料与方法  63-66    1.1 菌种及藻种  63-64    1.2 培养基  64    1.3 试验器材  64-65    1.4 溶藻物质酸碱稳定性的测定  65    1.5 溶藻物质极性的判定  65    1.6 溶藻物质活性检测  65-66    1.7 活性炭的吸附特性  66  2. 结果与分析  66-70    2.1 溶藻物质酸碱稳定性的测定  66-67    2.2 溶藻物质极性的判定  67-70    2.3 活性炭吸附结果  70  3. 讨论与结论  70-73全文总结  73-75创新点  75-77存在的问题与展望  77-79参考文献  79-87攻读学位期间发表、录用和在投的学术论文目录  87-89致谢  89

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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境科学基础理论 > 环境生物学 > 环境植物学
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