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重组EGFP慢病毒载体示踪转染的脐带间充质干细胞联合β-磷酸三钙移植治疗免股骨头缺损性坏死的研究

作　者: 李涛涛
导　师: 孙康
学　校: 青岛大学
专　业: 外科学
关键词: 股骨头 脐带间充质干细胞 移植 慢病毒载体 β-磷酸三钙
分类号: R681.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：探讨重组增强型绿色萤光蛋白(EGFP)慢病毒载体示踪转染的脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs)联合β-磷酸三钙移植修复兔股骨头缺损性坏死的效果研究,探讨治疗临床股骨头坏死治疗的新途径。方法：UC-MSCs体外培养增殖,骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因质粒与携带重组增强型绿色萤光蛋白(EGFP)慢病毒载体的构建,组合13MP-2基因质粒与携带重组增强型绿色萤光蛋白(EGFP)的慢病毒载体与脐带间充质干细胞(UC-MSCs)共培养；24只新西兰大白兔随机分为2组制作兔股骨头缺损模型,每组12只,A组为骨缺损填充β-磷酸三钙组B组为骨缺损填充重组增强型绿色萤光蛋白(EGFP)慢病毒载体示踪转染的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)+β-磷酸三钙组；植入术后2,4,6,8周时2组分别处死3只新西兰大白兔,并分别对股骨头行MRI影像学和股骨头标本取材行股骨头大体观察,HE染色病理学及新生骨小梁面积百分比测定。结果：股骨头大体观察,MRI和HE病理组织学检查显示术后4周时B组骨缺损处β-磷酸三钙逐步降解,有明显的成骨反应和新骨形成,股骨头关节软骨未脱落,股骨头未塌陷,8周时β-磷酸三钙基本完全降解,股骨头的骨缺损区基本修复完全,股骨头软骨缺损少量软骨缺损,股骨头未塌陷；A组4周时股骨头骨缺损为β-磷酸三钙填逐步降解并有少量纤维组织填充,股骨头软骨脱落,骨头缺损区周围骨质硬化,骨密度增加。8周时股骨头缺损区β-磷酸三钙基本降解,骨缺损周围骨质硬化,股骨头骨小梁紊乱,股骨头变形并塌陷。统计学分析：利用计算机软件计算术后8周的骨缺损区骨小梁面积百分比值,对其进行面积百分比均值的t检验,过统计学分析表明,具有方差齐性,P<0.05.总体有差别,有统计学意义。结论：重组重组增强型绿色萤光蛋白(EGFP)慢病毒载体示踪转染的脐带间充质干细胞(UCB-MSCs)在体内有较强的诱导成骨作用,并能成功修复股骨头骨缺损；β-磷酸三钙与间充质干细胞复合生长良好,并具有良好的组织相容性与可降解性,可以作为良好的骨支架材料。

全文目录


中文摘要  2-4
Abstract  4-7
引言  7-8
材料与方法  8-11
  1.1 材料和试剂  8-9
  1.2 方法  9-11
结果  11-13
  2.1 携带EGFP慢病毒转导UC-MSCs的检测  11-12
  2.2 缺损股骨头MRI检查  12
  2.3 股骨头病理学检查  12
  2.4 MR检查  12
  2.5 组织病理学检测  12-13
  2.6 骨小梁图像分析  13
结论  13-14
附图  14-20
附表  20
讨论  20-24
参考文献  24-25
综述  25-35
  参考文献  30-35
攻读期成果  35-36
致谢  36-37

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 骨科学（运动系疾病、矫形外科学） > 骨骼疾病 > 下肢骨
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