学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

低强度脉冲超声波联合骨形成蛋白2对人牙周膜细胞成骨诱导效应的研究

作　者: 蒋欣益
导　师: 宋锦璘
学　校: 重庆医科大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 生长因子 骨形成蛋白2 低强度脉冲超声波 人牙周膜细胞 成骨分化
分类号: R781.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 19次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


近年来将外源性生长因子应用于牙周组织以促进牙周组织再生的生物学效应受到广泛的研究和关注。骨形成蛋白2(bonemorphogenetic protein2，BMP-2)是一种调节细胞成骨的蛋白，研究证实其作为一种生长因子具有促进细胞成骨以及成牙骨质的作用。在一定条件下，它可诱导牙周膜细胞（human periodontalligament cells，hPDLCs）中的未分化间充质细胞向成骨细胞和成牙骨质细胞分化，对HPDLCs的骨向分化诱导作用也已经较明确。低强度脉冲超声波（low intensity pulsedultrasound，LIPUS）作为一种物理治疗手段，能够促进牙周软硬组织修复、细胞增殖与分化、钙盐的沉积以及刺激胶原的分泌与合成。对长骨骨折的修复也具有显著的促成骨效应。本实验组在前期实验也证实LIPUS对hPDLCs的骨向分化具有促进作用。因此，本研究首次将低强度脉冲超声波与骨形成蛋白2联合引入诱导hPDLCs成骨分化以观察其成骨效应，探讨将LIPUS与BMP-2联合引入牙周组织再生治疗的可行性并提供实验依据。目的：1.体外培养hPDLCs。2.建立hPDLCs的LIPUS体外辐照模型。3.探讨在一定浓度BMP2蛋白诱导下对hPDLCs合成分泌碱性磷酸酶的影响。4.观察LIPUS与BMP-2联合使用对成骨相关基因OPN、col-1表达的影响，为将其联合使用以促牙周组织再生治疗奠定实验基础。方法：1.使用组织块法以及酶消化法和组织块相结合法进行hPDLCs的原代培养传代获得有限细胞系。并鉴定细胞来源为下一步研究提供细胞。2.LIPUS辐照参数根据前期实验[4]所检测到的成骨最适参数：输出强度90mW/cm2，作用时间20min/day。3.将第4代hPDLCs消化后按1×105/ml后接种于接种于六孔板中，将BMP-2配制为浓度分别是50、100、200、400ug/L四个浓度组，将四个浓度的BMP-2溶液加入六孔板中连续作用于HPDLCs,9天后检测各实验组碱性磷酸酶活性并遴选出本实验条件下最适宜的诱导浓度。4.采用第五代hPDLCs，LIPUS按90mW/cm2-20min/d、200ug/LBMP2诱导液诱导7天后，检测各组ALP活性以及PCR检测牙周膜细胞成骨基因OPN、Col－I的表达。结果：1.本实验体外培养的hPDLCs经免疫组化证实所培养细胞来源于中胚层。2.经BMP-2诱导后，各浓度组ALP活性较对照组均有不同程度提高，其中200ug/L组改变最为明显。3.以90mW/cm2-20min/d LIPUS辐照处理以及联合200ug/LBMP-2诱导HPDLCs7d后，成骨基因OPN、Col－I的表达均有不同程度增强、各实验组ALP活性也不同程度增强。结论：1.不同浓度的BMP-2对hPDLCs骨向分化具有促进作用，本实验条件下较适宜作用浓度为200ug/L.2.骨形成蛋白2（200ug/L）连续作用11d，牙周膜细胞ALP合成于第3天开始增加，ALP向胞外分泌增加在第7天开始，第9天达峰值。3.在适宜的LIPUS辐照参数以及BMP-2浓度诱导联合作用下，成骨相关基因OPN、col-1的表达均有所增强，ALP活性也不同程度增强且二者在联合使用时基因表达以及ALP活性较单独使用时更明显。

全文目录


英汉缩略语名词对照  6-7
摘要  7-10
ABSTRACT  10-14
前言  14-18
第一部分 HPDLCs 体外培养、细胞来源鉴定及 LIPUS 辐照模型的建立  18-24
  1 材料和方法  18-21
  2 结果  21-22
  3 讨论  22-23
  4 小结  23-24
第二部分 不同浓度骨形成蛋白２对人牙周膜细胞成骨分化能力的影响  24-29
  1 材料和方法  24-26
  3 结果  26-27
  4 讨论  27-28
  5 小结  28-29
第三部分 低强度脉冲超声波联合骨形成蛋白 2 对人牙周膜细胞表达 OPN、COL-1的影响  29-37
  1 材料和方法  29-33
  2 结果  33-35
  3 讨论  35
  4 小结  35-37
全文总结  37-38
参考文献  38-43
附图  43-46
文献综述  46-52
  参考文献  49-52
致谢  52-53
攻读学位期间发表论文及参与科研项目  53-54

相似论文

  1. 经典Wnt信号关键基因在人早期牙齿发育中的表达检测,R78
  2. 兔骨髓间充质干细胞分离培养及定向分化的研究,R329
  3. 茶黄素与TGF-β3对兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞增殖和诱导分化地影响,R329
  4. 树突状细胞在多柔比星诱导的大鼠肾纤维化模型中的作用,R692.5
  5. MMP-2、VEGF和Ki-67的表达与脑胶质瘤分级的相关性研究,R739.41
  6. Angiopoietin-1对高糖培养内皮细胞血管生成调控因子表达的影响,R587.2
  7. 微波对实验性大鼠周围神经损伤后功能恢复的影响,R651.3
  8. 扶正固本法治疗脓毒症急性虚证患者的临床疗效观察,R278
  9. BMP2和VEGF165在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达,R329
  10. 乳腺癌超声弹性成像与ER、PR及C-erbB-2表达的相关性研究,R445.1
  11. 急性髓系白血病中MT1FmRNA与VEGFmRNA的表达研究,R733.71
  12. 早期不全性胆道梗阻对豚鼠oddi括约肌的影响,R657.4
  13. 血清细胞因子及结核抗体对儿童结核病及潜伏性结核感染的诊断价值,R725.1
  14. 普萘洛尔对体外培养婴幼儿血管瘤内皮细胞VEGF、MMP-2的影响及意义,R739.5
  15. 血清及房水中VEGF、IL-6水平与新生血管性青光眼的相关性研究,R775
  16. 硅油填充继发青光眼患者前房液中生长因子含量变化的相关分析,R779.6
  17. 外界刺激对牙本质牙髓复合体原位形成和内源性生长因子TGF-β1的影响,R78
  18. 糖基化终末产物对脂多糖介导下牙周膜干细胞生物学特性影响的研究,R781.4
  19. OGP和IGF-Ⅰ对人牙周膜细胞生物学功能的影响,R781.4
  20. 张应变抑制牙周膜细胞增殖后苯妥英钠的促增殖作用,R781.4
  21. 剪切力作用下（类）成骨细胞LEF-1的表达,R783.5

中图分类: > 医药、卫生 > 口腔科学 > 口腔内科学 > 牙周病
© 2012 www.xueweilunwen.com