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应用蛋白质组学技术建立Behcet病相关葡萄膜炎诊断模型并筛选血清学标记物

作　者: 王昕
导　师: 李维业
学　校: 北京协和医学院
专　业: 临床医学
关键词: Behcet病相关葡萄膜炎蛋白组学 MALDI-TOF-MS 血清淀粉样蛋白A 载脂蛋白A1
分类号: R773
类　型: 博士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：应用蛋白质组学技术建立Behcet病相关葡萄膜炎诊断模型并筛选血清学标记物。方法：152例血清样本包括Behcet病相关葡萄膜炎活动期、缓解期、小柳原田病(VKH)各31例及59例正常对照,所有样本同批进行MALDI-TOF-MS结合蛋白质芯片分析并绘制蛋白指纹图谱；应用BPS软件建立诊断模型并进行独立样本验证；应用磁珠结合、电泳及质谱技术分离、纯化和鉴定差异蛋白；应用ELISA和免疫沉淀技术验证所得蛋白质。结果：1)在质荷比1000-50000m/z范围内将Behcet病相关葡萄膜炎同VKH及正常对照相比较,建立Behcet病相关葡萄膜炎血清蛋白质组学诊断模型,经独立验证敏感性为84.62%,特异性为90.91%。2)6个蛋白峰(M1711.82、M8688.13、M11490.3、 M11548.2、M39478.0和M58518.8)在Behcet病相关葡萄膜炎活动期与缓解期患者中有表达差异(p<0.05)；其中M1711.82和M8688.13在活动期表达低于缓解期,M11490.3、M11548.2、M39478.0和M58518.8高于缓解期；经分离、纯化、鉴定后并通过ELISA和免疫沉淀验证,M11490.3和M11548.2为血清淀粉样蛋白A (Serum Amyloid A, SAA),M39478.0为载脂蛋白Al(Apolipoprotein Al, ApoAl)。结论：应用蛋白质组学技术建立了Behcet病相关葡萄膜炎血清蛋白质组学诊断模型,并筛选出血清淀粉样蛋白A和载脂蛋白A1作为Behcet病相关葡萄膜炎活动期的血清学标记物。

全文目录

英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
引言  7-9
第一部分：应用MALDI-TOF-MS联合蛋白质芯片技术建立Behcet‘ S病相关葡萄膜炎的蛋白质组诊断模型  9-25
  实验材料与方法  9-13
  实验结果  13-25
第二部分：筛选与BD葡萄膜炎活动性相关的血清学标记物  25-43
  材料与方法  25-33
  实验结果  33-43
讨论  43-48
结语  48-49
参考文献  49-52
综述  52-61
  参考文献  57-61
致谢  61

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