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甲基化对E-钙粘素、Snail基因的双重抑制作用

作　者: 高羽
导　师: 师水生
学　校: 山西医科大学
专　业: 消化内科学
关键词: 胃癌 反义基因 5-氮杂-2’脱氧胞苷 E-cadherin
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


研究目的：探讨肿瘤抑制基因反义Snail与去甲基化药物5-氮杂-2’脱氧胞苷协同对胃癌低分化细胞株BGC-823的作用,探讨其对上皮间质转化相关膜蛋白E-钙粘素的nRNA水平的影响及二者联合作用的可能机制。方法：应用MTT、流式细胞术、PCR、实时荧光定量PCR、检测胃癌细胞株BGC-823分别转染反义Snail、应用5-氮杂-2’脱氧胞苷单独或协同干预后对细胞的增殖抑制、凋亡率及E-钙粘素、Snail基因表达的影响。所有数据采用X±S,经SPSS软件分析,P<0.05差异具有统计学意义。结果：与空白对照组比较2.5uM、5.0uM5-氮杂-2’脱氧胞苷干预均使E-cadherin的mRNA重新高表达,不同浓度药物组间两两比较,0.1A分别与2.5A、5.0A比较差异显著(P<0.05),2.5A与5.0A之间比较无明显差异(P>0.05),三个时间(12h、24h、48h)两两比较,差异均具显著性,5-Aza对E-cad基因表达影响具有浓度-时间依赖性,2.5uM48h时作用最显著。5-Aza处理对Snail基因也呈表达上调,且在2.5uM48h时作用最显著。药物对E-cad的作用在转染反义Snail质粒后仍呈上调表达,转染反义质粒后E-cad显著上调,Snail基因显著下调(P<0.05)。结论：5-氮杂-2’-脱氧胞苷能使低分化胃腺癌细胞株内E-cadherin重新高表达,且作用呈浓度-时间依赖性,2.5A作用48h E-cadherin mRNA表达显著上调。5-Aza同时使Snail基因表达增高,作用具有浓度-时间依赖性。提示启动子甲基化对转录调节因子Snail基因mRNA的表达和E-钙粘素的表达的发挥双重抑制作用：转染反义Snail前后,E-cad基因表达上调而Snail基因表达下调。提示：胃癌细胞中发展中,甲基化起关键作用,且甲基化对转录调节的作用方向与基因的自身甲基化水平有关。转染反义Snai、5-Aza都有抑制低分化胃腺癌细胞生长的作用,促进肿瘤细胞凋亡作用,且抑制作用与药物呈时间浓度依赖性。

全文目录


目录  4-5
中英文索词表  5-6
摘要  6-7
Abstract  7-8
前言  8-10
1. 实验材料  10-12
2. 实验方法  12-22
3. 结果分析  22-28
4. 讨论  28-29
5. 结论  29-30
参考文献  30-33
论文综述  33-39
  综述参考文献  36-39
个人简介  39-40
致谢  40

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胃肿瘤
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