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亚低温对心肺复苏后脑保护机理的研究

作 者: 刘洁
导 师: 郭树彬
学 校: 北京协和医学院
专 业: 急诊医学
关键词: 亚低温 脑保护 心肺复苏 细胞凋亡
分类号: R459.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 33次
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内容摘要


研究目的:亚低温治疗可减少复苏后脑的缺血再灌注损伤,并已列入心肺复苏指南。但亚低温治疗方案尚不完善,保护缺血再灌注后神经元、降低细胞损伤和凋亡的分子机理尚未明确。因此需深入研究为临床广泛应用提供重要科学理论依据,进而有可能为保护缺血再灌注损伤提供新的治疗靶点。方法:将60只健康雄性SD大鼠随机分为A、B两组,每组30只,各组又分再灌注后0、2、6、12、24小时5个亚组,每个亚组6只。夹闭气道7-9分钟出现CA后行CPR至ROSC。A组置于常温,B组30min内用酒精、冰袋将肛温降至30-34℃,并维持12小时。观测大鼠神经功能(NDS)、脑水含量(BWC)、脑组织病理学改变;TUNLE染色法检测大鼠脑细胞凋亡情况。通过RT-PCR技术检测大鼠脑组织中AIF、caspase-3、Fas的mRNA基因的表达水平。结果:与常温组相比,亚低温组大鼠12及24h神经功能缺损评分均偏高分别为12小时67.38±3.42、67.92±2.15和70.90±3.10、69.92±2.27(P<0.05);6及12h脑水含量减少,分别为80.51±0.67、80.02±1.13和78.91±0.87、78.78±0.68(P<0.05);H&E染色病理显示6及12h脑水肿明显减轻,TUNEL结果显示6、12及24h脑细胞凋亡数量减少(P<0.05),RT-PCR结果显示各个时间点大鼠脑组织中AIF、caspase-3、Fas的mRNA基因表达显著下调(P<0.05)。结论:亚低温控制可改善ROSC后神经功能缺损评分(NDS),减轻脑水肿;通过抑制脑组织中AIF、caspase-3、Fas的mRNA凋亡基因表达,起到脑保护作用。

全文目录


目录  3-5
摘要  5-6
Abstract  6-7
前言  7-10
材料与方法  10-26
  1. 材料  10-15
    1.1 实验动物  10
    1.2 试剂盒和主要试剂  10-11
    1.3 主要溶液的配制  11-13
    1.4 RT-RCR引物序列  13
    1.5 耗材  13-14
    1.6 主要仪器设备  14-15
  2. 实验方法  15-26
    2.1 实验分组  15
    2.2 SD大鼠窒息法心肺复苏模型的制备  15-18
    2.3 神经功能缺损评分  18-19
    2.4 脑水含量(brain water content,BWC)测定  19-20
    2.5 细胞凋亡的检测  20-22
    2.6 RT-PCR检测(基因)caspase-3、Fas和AIF mRNA的表达量  22-25
    2.7 H&E染色  25
    2.8 统计学分析  25-26
结果  26-31
  1、神经功能缺损评分(NDS)  26
  2、大鼠脑水含量(BWC)测定  26-27
  3、大鼠脑HE染色观察、TUNEL染色观察  27-29
    3.1 H&E染色观察  27-29
    3.2 TUNEL法检测  29
  4、RT-PCR结果  29-31
讨论  31-40
  1. 复苏动物模型与亚低温控制方案的选择  31-33
  2、神经功能缺损评分(NDS)与亚低温控制  33-34
  3、脑水肿与亚低温控制  34-35
  4、脑细胞凋亡与亚低温控制  35-40
小结  40-41
参考文献  41-48
附录  48-64
  附录1:中英文缩略词表  48-51
  附录2:文献综述  51-64
    参考文献  60-64
致谢  64-66
个人简历  66-67

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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 治疗学 > 急症、急救处理
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