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18F-FLT PET预测肿瘤放射敏感性的实验研究

作　者: 陈忠杰
导　师: 于金明
学　校: 天津医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 18F-FLT PET显像 预测 放射敏感性 乳腺癌MB-MDA-231细胞 脑胶质瘤LN229细胞
分类号: R730.55
类　型: 博士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：研究18F-FLT PET显像在早期预测乳腺癌MB-MDA-231和胶质瘤LN229细胞和移植瘤放射敏感性中的价值。方法：实验共分二部分。第一部分具体为：(1)乳腺癌MB-MDA-231和胶质瘤LN229细胞行OGy、8Gy和16Gy放疗24h、48h和72h后光学显微镜下观察细胞形态和数量的变化。(2)行OGy、8Gy和16Gy放疗24h后荧光显微镜下检测细胞形态、数量和凋亡细胞的变化。(3)行OGy、8Gy和16Gy放疗24h和48h后流式细胞仪观察细胞周期的变化。(4)行OGy、8Gy和16Gy放疗24h、48h和72h后MTT法检测肿瘤细胞体外生长活性。(5)行OGy、8Gy和16Gy放疗后Western Blot免疫印迹分析TK-1表达。(6)行OGy、8Gy和16Gy放疗后克隆形成实验,分析放射后细胞集落形成率。(7)行OGy、8Gy和16Gy放疗24h、48h和72h后加入18F-FLT显像剂,用γ井型探测仪测定细胞18F-FLT摄取活性差别。另外,该两组细胞48小时的细胞摄取值与克隆形成实验中生存分数作相关性分析。第二部分具体为：(1)乳腺癌MB-MDA-231和胶质瘤LN229移植瘤行OGy、8Gy和16Gy放疗1d、3d和7d后行免疫组化测定TK-1的含量变化。(2)行OGy、8Gy和16Gy放疗1d、3d和7d后行18F-FLT分子显像,测量T/NT值变化的差别。然后对两组肿瘤细胞T/NT值与免疫组化中TK-1的含量作相关性分析。结果：实验第一部分结果：(1)放疗后细胞数量减少,细胞出现皱缩变圆和脱落。可见坏死细胞飘浮及凋亡细胞增多。对比来看.乳腺癌MB-MDA-231细胞在相同条件下比胶质瘤LN229细胞变化更明显。(2)Hoechst33342染色和Mito-Tracker Red染色均示乳腺癌MB-MDA-231细胞抑制率明显，并有统计学差异。Yo-Pro-1染色显示乳腺癌MB-MDA-231组调亡细胞增长率高,并有统计学意义。(3)两组细胞放疗后24h均出现明显的G2/M期阻滞,8Gy剂量放疗时两组细胞变化无明显差别；放疗后48h乳腺癌MB-MDA-231细胞G2/M期阻滞较前增加,而胶质瘤LN229细胞阻滞较前降低,细胞阻滞逐渐解除,再度进入细胞周期,两者差别有统计学意义(p=0.000)。但是,乳腺癌MB-MDA-231细胞16Gy照射后细胞G2/M期没有出现明显G2/M期阻滞。(4)乳腺癌MB-MDA-231细胞对照组吸光度值较胶质瘤LN229细胞对照组高。从抑制率上可以看出放疗后24h和48h胶质瘤LN229细胞抑制率高,但呈逐渐下降趋势,到放疗后72h该细胞系抑制率低于乳腺癌MB-MDA-231细胞,并有统计学差异(p=0.000)(5)两组放疗8Gy后,两组细胞TK-1蛋白表达水平相当,两者抑制率没有统计学差别,但放疗16Gy24h后乳腺癌MB-MDA-231细胞抑制率明显高于胶质瘤LN229细胞,并有统计学差别(p=0.000)。(6)两组放疗后细胞克隆数均下降,但乳腺癌MB-MDA-231细胞生存分数下降更明显,二者有统计学差异(p=0.000)(7)乳腺癌MB-MDA-231细胞放疗后24h18F-FLT摄取轻度下降,然后开始缓慢增长,到放疗48h后又开始下降,8Gy和16Gy剂量组18F-FLT摄取量差别不大；胶质瘤LN229细胞放疗后18F-FLT摄取无明显降低,到24h后16Gy剂量组开始增长缓慢,而8Gy剂量组仍呈线性增长。取放疗后48h18F-FLT摄取量与两组细胞生存分数作相关性分析发现二者有相关性(p<0.05)。第二部分结果：乳腺癌MB-MDA-231移植瘤放疗后24h增殖率出现明显下降,然后逐渐增加,放疗后72h时增殖率仍低于放疗前水平,且8Gy组和16Gy组两者增殖率相差不大。胶质瘤LN229移植瘤放疗24h后8Gy组出现增殖率增高,然后出现下降,放疗后72h可见增殖率低于放疗前水平,16Gy组随着放疗后时间的推移增殖率逐渐下降,放疗后72h降到最低水平。两组动物肿瘤模型18F-FLT PET-CT显像T/NT值变化规律基本同免疫组化中增殖率的变化趋势,两者相关性分析发现二者有相关性,有统计学差异(p<0.05)。结论：(1)实验室各项检测方法显示乳腺癌MB-MDA-231细胞较胶质瘤LN229细胞对放疗敏感。(2)两组细胞18F-FLT摄取量与细胞生存分数呈正相关。(3)两组肿瘤组织18F-FLT显像T/NT值与TK-1增殖率呈正相关。(4)初步显示18F-FLT显像能够预测肿瘤的放射敏感性,尚需临床进一步验证。

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 一般性问题 > 肿瘤治疗学 > 放射疗法
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