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Gfi1.2基因在斑马鱼内耳的表达及顺铂的耳毒性研究

作　者: 岳文杰
导　师: 陈晓巍
学　校: 北京协和医学院
专　业: 临床医学
关键词: 斑马鱼 Gfi1.2 内耳毛细胞
分类号: R764.3
类　型: 博士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的：建立以斑马鱼为模式动物的内耳损伤模型,研究Gfi1在斑马鱼内耳发育不同时间段的表达谱,以及耳毒性药物对内耳毛细胞损伤的发生机制。材料和方法：(1).选用发育至4.3hpf、12hpf、24hpf、48hpf的斑马鱼胚胎,运用原位杂交技术观察Gfi1.2基因在各时期胚胎中的表达情况。(2)选用48hpf的斑马鱼胚胎,分别用0.25mM.0.50mM、0.75mM、1.00mM、1.50mM的顺铂溶液培养8小时,用原位杂交技术观察Gfil.2在经过各种处理后胚胎中的表达情况。(3)选用48hpf的斑马鱼胚胎,用1.00mM的顺铂溶液培养4小时、8小时、12小时,用原位杂交技术观察Gfi1.2在经过各种处理后胚胎中的表达情况。结果：(1)Gfi1.2基因在发育至4.3hpf、12hpf、24hpf、48hpf的斑马鱼胚胎中均有明确表达,在48hpf的胚胎的内耳中有明显的表达。(2)用不同浓度顺铂处理的斑马鱼胚胎经过原位杂交,发现用越高浓度处理的胚胎,Gfil.2的表达越弱。(3)用相同浓度的顺铂处理的斑马鱼胚胎,处理时间越长,Gfil.2的表达越弱。结论：(1)斑马鱼是一种新兴的研究脊椎动物发育的模式生物,由于它具有发育周期短、胚胎透明内耳易于观察、价格相对低廉等优点,因而成为一种研究耳聋基因及内耳发育的优秀模型。本次实验证明,用斑马鱼作为研究药物对内耳毛细胞损害的模型也是可行的。(2)Gfi1是一种转录抑制因子,它在小鼠内耳毛细胞发育的过程中扮演着重要的角色,实验证明它的同源基因Gfil.2在斑马鱼内耳中也有持续表达,而且可以作为毛细胞损害的标记物。(3)顺铂对内耳毛细胞的损害具有浓度依赖性和时间依赖性。

全文目录

中文摘要  4-5
Abstract  5-6
前言  6-8
实验材料和方法  8-16
实验结果  16-24
讨论  24-28
小结  28-29
参考文献  29-33
文献综述  33-48
  References  40-48
附录  48-49
致谢  49

Gfi1.2基因在斑马鱼内耳的表达及顺铂的耳毒性研究

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