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蒿鳖养阴软坚方对牛血清白蛋白致大鼠肝纤维化治疗作用的初步机理

作　者: 孔维涵
导　师: 方步武
学　校: 天津医科大学
专　业: 药理学
关键词: 蒿鳖养阴软坚方肝纤维化牛血清白蛋白胶原蛋白 α-平滑肌肌动蛋白细胞凋亡
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：探讨蒿鳖养阴软坚方治疗牛血清白蛋白免疫性大鼠肝纤维化的作用及部分机理,为临床用蒿鳖养阴软坚方防治肝纤维化提供实验依据。方法：采用牛血清白蛋白免疫性大鼠肝纤维化模型。SPF级健康Wistar大鼠,随机取正常对照组(正常组)后,其余全部用含BSA弗氏不完全佐剂皮下多点免疫注射5次后,通过琼脂平板双向扩散法检测大鼠外周血中BSA抗体,对抗体阳性大鼠,由其尾静脉注射BSA进行免疫攻击,每周2次,攻击注射15次后造模成功。将造模大鼠按体重随机区组分组法分成模型对照组(模型组)、高、中、低剂量组、复方鳖甲软肝片组、秋水仙碱组。各治疗组均于造模结束后每天灌胃给予该组对应的药物,连续2个月,而正常组和模型组则分别给予相应体积的蒸馏水,直至实验结束。观察肝组织病理变化及纤维组织增生程度,检测肝组织胶原蛋白含量及血清中肝功能指标,免疫组织化学法检测α-SMA和基于T4连接酶的ISOL法检测凋亡。结果：1.肝组织形态学观测：模型组肝脏纤维结缔组织大量增生,肝小叶结构破坏,假小叶形成；治疗组纤维结缔组织明显减少,未见明显的假小叶形成;模型组肝纤维化程度分期及计分显著增高(P<0.01),各治疗组肝纤维化程度分期及计分均明显减低(P<0.01,P<0.05),并且蒿鳖养阴软坚方各剂量(8.20g/kg,2.59g/kg,0.82g/kg)组分别与复方鳖甲软肝片及秋水仙碱组比较差异均未见统计学意义。2.肝组织胶原蛋白含量变化：正常组、模型组、蒿鳖养阴软坚方高剂量组、中剂量组、低剂量组、复方鳖甲软肝片组、秋水仙碱组肝组织胶原蛋白含量分别为：10.10±4.02mg/g,29.22±11.30mg/g,13.76±4.02mg/g,14.02±4.40mg/g,16.08±4.55mg/g,14.58±5.07mg/g,12.58±4.52mg/g;模型组肝组织胶原蛋白含量显著高于正常组(P<0.01),而蒿鳖养阴软坚方高、中剂量组明显低于模型组,且与复方鳖甲软肝片及秋水仙碱组比较差异均未见统计学意义。3.血清AST、ALT、白蛋白、总蛋白水平变化：模型组血清AST、ALT含量显著高于正常组(P<0.05),各治疗组(除外蒿鳖养阴软坚方低剂量组)均明显低于模型组,蒿鳖养阴软坚方各剂量组分别与复方鳖甲软肝片组及秋水仙碱组比较差异无统计学意义;模型组血清白蛋白含量、白／球比值均显著低于正常组(P<0.05),蒿鳖养阴软坚方高剂量组及复方鳖甲软肝片组白蛋白含量明显上升(P<0.05),复方鳖甲软肝片组白/球比值明显提高,蒿鳖养阴软坚方高剂量组白/球比值有提高的趋势,且蒿鳖养阴软坚方高剂量组与复方鳖甲软肝片组比较差异无统计学意义。4.a-SMA:模型组a-SMA阳性染色程度和计分分别显著高于正常组(P<0.01);蒿鳖养阴软坚方各剂量组a-SMA阳性染色程度和计分分别明显低于治疗后模型对照组(P<0.01,P<0.05)。5.HSC凋亡：治疗前对照组HSC凋亡计分明显高于正常组(P<0.05)；蒿鳖养阴软坚方中剂量组HSC凋亡计分明显高于治疗后模型对照组(P<0.05)。结论：1.牛血清白蛋白免疫性肝纤维化的模型制备成功。2.蒿鳖养阴软坚方对BSA免疫性肝纤维化具有治疗作用。3.蒿鳖养阴软坚方治疗BSA免疫性肝纤维化的作用机制可能与抑制HSC的活化,促进活化的HSC凋亡及减轻肝细胞损伤有关。

蒿鳖养阴软坚方对牛血清白蛋白致大鼠肝纤维化治疗作用的初步机理

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