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盐地碱蓬提取物抗衰老活性的研究
作 者: 刘甜甜
导 师: 张泽生
学 校: 天津科技大学
专 业: 食品科学
关键词: 盐地碱蓬 抗衰老 D-半乳糖 果蝇 萃取
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
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盐地碱蓬系藜科碱蓬属一年生草本真盐生植物,其营养丰富,富含多种不饱和脂肪酸、维生素、微量元素。近年来一些研究发现,碱蓬属植物具有抗氧化、降血脂及增强机体免疫力、抗炎等作用。本文在对盐地碱蓬醇提物体外抗氧化活性进行研究的基础上,选用D-半乳糖致衰小鼠模型和果蝇模型进行了体内抗氧化活性的研究;采用不同极性的有机溶剂对醇提物进行液-液萃取分离,选用不同的抗氧化评价体系综合评价不同组分的抗氧化活性,并进一步研究了其对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的保护作用,并对其作用机理进行了初步探讨。实验首次应用行为学的方法测定盐地碱蓬对衰老小鼠学习记忆能力的影响并应用小鼠、果蝇两种不同的动物模型测定其活性,弥补了盐地碱蓬抗衰老活性测定方面的空白,为开发相关产品提供了科学的理论依据。体外抗氧化活性实验结果显示,盐地碱蓬醇提物具有一定的抗氧化和清除自由基的活性,其对DPPH自由基的清除能力接近BHT,0.1mg/mL浓度下对肝匀浆脂质过氧化的抑制达到74.67%。采用D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠,研究其延缓衰老作用。结果显示,给予高剂量(800mg/kg-bw)的盐地碱蓬醇提物,可显著提高小鼠学习记忆能力和适应能力,同时可提高衰老模型小鼠脾的脏器系数。高剂量的盐地碱蓬醇提物可提高血清SOD、GSH-Px酶活力,降低血清MDA含量,显著提高肝脏总抗氧化能力。中剂量(400mg//kg-bw)的盐地碱蓬醇提物能提高血清和脑的SOD活力,极显著降低肝脏MDA含量。同时,高剂量组肝组织的TAOC/MDA值极显著性高于模型组。考察了盐地碱蓬醇提物对果蝇寿命及相关指标的影响。结果显示,各剂量的盐地碱蓬醇提物均可延长果蝇的平均寿命,提高果蝇体内CAT以及CuZn-SOD活力。17mg/mL的盐地碱蓬醇提物对果蝇体内MDA含量的降低作用最明显。采用极性依次增大的有机溶剂(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)对醇提物进行萃取,并对各组分的抗氧化活性与清除自由基自由基能力进行了测定。结果表明:对DPPH自由基的清除能力及总还原力由强到弱排列顺序为:正丁醇相>乙酸乙酯相>水相>石油醚相。乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物都能抑制小鼠肝组织匀浆脂质过氧化反应和抑制红细胞溶血,乙酸乙酯萃取物对红细胞溶血的抑制作用最好。乙酸乙酯相和正丁醇相对体内抗氧化系统的影响结果显示:对血清MDA的降低,SOD及CAT活力的提高作用,乙酸乙酯相优于正丁醇相;对血清GSH-Px酶活力及总抗氧化能力的提高,正丁醇相优于乙酸乙酯相。相比乙酸乙酯相,正丁醇相对肝脏各抗氧化指标的影响更显著。二者对脑组织的MDA, TAOC影响都较小。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-11 1 前言 11-27 1.1 盐地碱蓬概述 11-15 1.1.1 盐地碱蓬的生物学特性 11 1.1.2 盐地碱蓬的营养成分 11-12 1.1.3 盐地碱蓬的化学成分 12-14 1.1.4 盐地碱蓬的开发利用现状 14-15 1.2 衰老与自由基 15-19 1.2.1 衰老 15-16 1.2.2 自由基 16 1.2.3 自由基的产生 16-17 1.2.4 自由基的相关反应 17 1.2.5 自由基对机体生物大分子的损伤 17-19 1.3 氧化的防御系统 19-23 1.3.1 机体抗氧化作用的“三道防线” 19-20 1.3.2 内源性抗氧化物 20-21 1.3.3 外源性抗氧化剂 21-23 1.4 衰老模型 23-25 1.4.1 果蝇属动物衰老模型 23-24 1.4.2 啮齿类动物衰老模型 24-25 1.4.3 其他类型的动物衰老模型 25 1.5 缓衰老功能物质评价常用指标 25-26 1.5.1 肝、脑MAO-B活性 25 1.5.2 过氧化脂质和脂褐素 25 1.5.3 抗氧化酶活性测定 25 1.5.4 动物生存试验(寿命试验) 25-26 1.5.5 免疫功能的指标评价 26 1.6 本课题的研究意义与主要内容 26-27 1.6.1 研究意义 26 1.6.2 主要研究内容 26-27 2 材料与方法 27-35 2.1 实验材料与设备 27-29 2.1.1 实验原料 27 2.1.2 实验动物 27 2.1.3 主要仪器 27-28 2.1.4 主要试剂 28-29 2.2 实验方法 29-35 2.2.1 盐地碱蓬醇提物的制备及体外抗氧化能力的测定 29-30 2.2.2 盐地碱蓬醇提物对D-半乳糖致衰鼠的影响 30-32 2.2.3 盐地碱蓬醇提物对果蝇寿命的影响 32 2.2.4 盐地碱蓬各组分的萃取及总多酚、总黄酮含量的测定 32-34 2.2.5 盐地碱蓬各组分体外抗氧化能力的测定 34 2.2.6 盐地碱蓬正丁醇相和乙酸乙酯相对亚急性衰老模型小鼠的作用 34-35 3 结果与讨论 35-66 3.1 盐地碱莲醇提物体外抗氧化能力的测定 35-37 3.1.1 DPPH自由基清除能力的测定 35 3.1.2 总还原力的测定 35-36 3.1.3 抑制肝组织匀浆脂质过氧化能力的测定 36 3.1.4 抑制红细胞溶血能力的测定 36-37 3.2 盐地碱蓬醉提物对D-半乳糖致衰鼠的影响 37-49 3.2.1 盐地碱蓬醇提物对D-半乳糖致衰鼠生长的影响 37-38 3.2.2 衰老的行为学测试 38-41 3.2.3 盐地碱蓬醇提物对D-半乳糖致衰鼠主要脏器指数的影响 41-42 3.2.4 盐地碱蓬醇提物对小鼠血清抗氧化系统的影响 42-45 3.2.5 盐地碱蓬醇提物对小鼠肝脏抗氧化系统的影响 45-47 3.2.6 盐地碱蓬醇提物对小鼠脑组织抗氧化系统的影响 47-48 3.2.7 盐地碱蓬醇提物对小鼠体内TAOC/MDA比值的影响 48-49 3.3 盐地碱蓬醇提物体内抗氧化活性--对果蝇寿命的影响 49-52 3.3.1 盐地碱蓬醇提物对果蝇寿命的影响 49-51 3.3.2 盐地碱蓬醇提物对果蝇寿命相关指标的测定 51-52 3.4 盐地碱蓬各组分萃取得率及总多酚、总黄酮含量 52-54 3.4.1 各组分萃取得率 52-53 3.4.2 各组分总多酚含量 53 3.4.3 各组分总黄酮含量 53-54 3.5 盐地碱蓬各组分体外抗氧化能力的测定 54-57 3.5.1 各组分DPPH自由基清除能力 54-55 3.5.2 各组分总还原力 55 3.5.3 各组分抑制肝匀浆脂质过氧化作用的测定 55-56 3.5.4 各组分抑制红细胞溶血能力 56-57 3.6 盐地碱蓬正丁醇相和乙酸乙酯相对亚急性衰老模型小鼠的作用 57-66 3.6.1 正丁醇相和乙酸乙酯相对D-半乳糖致衰鼠生长的影响 57-58 3.6.2 正丁醇相和乙酸乙酯相对D-半乳糖致衰鼠主要脏器指数的影响 58 3.6.3 正丁醇相和乙酸乙酯相对小鼠血清抗氧化系统的影响 58-61 3.6.4 正丁醇相和乙酸乙酯相对小鼠肝脏抗氧化系统的影响 61-63 3.6.5 正丁醇相和乙酸乙酯相对小鼠脑组织抗氧化系统的影响 63-64 3.6.6 正丁醇相和乙酸乙酯相对小鼠体内TAOC/MDA比值的影响 64-66 4 结论 66-68 4.1 盐地碱蓬醇提物体外抗氧化能力的测定 66 4.2 盐地碱蓬醇提物对D-半乳糖致衰鼠的作用 66 4.3 盐地碱蓬醇提物对果蝇寿命的影响 66 4.4 盐地碱蓬各组分萃取得率及总多酚、总黄酮含量 66 4.5 各组分体外抗氧化能力 66 4.6 正丁醇相和乙酸乙酯相对亚急性衰老小鼠的作用 66-67 4.7 总结 67-68 5 展望 68-69 6 参考文献 69-76 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 76-77 8 致谢 77
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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