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迷迭香提取物延缓衰老的研究

作　者: 陈頔
导　师: 张泽生
学　校: 天津科技大学
专　业: 营养与食品卫生学
关键词: 迷迭香提取物 抗氧化 衰老模型 超氧化物歧化酶 基因表达
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


迷迭香提取物是一种天然高效的抗氧化剂。研究表明,它具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抑菌、抗过敏等多种生物活性,被广泛应用于医药、食品、日化产品等多种领域。本文以致衰老小鼠为动物模型,通过一系列的行为学观察、生理生化指标的测定及分子水平基因表达量的探究,对迷迭香提取物的抗衰老作用进行评价,进而研究探索迷迭香提取物的体内抗氧化、抗衰老作用,为迷迭香提取物的开发与应用提供理论依据。首先,选用D-半乳糖致衰老小鼠和SAM鼠两种衰老模型,多方面、全角度研究迷迭香提取物延缓衰老的作用。D-半乳糖致衰老模型采用颈背部皮下注射法。结果显示：迷迭香提取物各剂量组均可显著提高D-半乳糖和SAM鼠致衰老模型小鼠血清、肝、脑、心脏、肾脏组织T-AOC活力,显著降低MDA含量；明显提高SOD、CAT、 GSH-PX活性,且在一定范围内随着剂量的增加活力增强,各组之间呈现一定的量效关系。在进行的行为学测试中,迷迭香提取物各剂量组与衰老模型组进行比较,迷迭香提取物给药组小鼠明显的表现出运动与学习记忆能力的提高。两种模型小鼠各脏器系数统计的结果显示,迷迭香提取物各给药组小鼠肝、脑、脾脏等脏器均表现了一定的抗萎缩能力。其次,ICR致衰老小鼠肝组织SOD1、GSH-PX1、GSH-Px2mRNA的实时定量荧光PCR实验结果表明：与模型组相比,小鼠肝组织SOD1、GSH-PX1、GSH-PX2基因表达量迷迭香提取物各组显著提高。以上结果说明：迷迭香提取物各组可明显地延缓D-半乳糖致衰老模型小鼠和SAM鼠衰老的进程,具有良好的抗衰老的作用。最后,对迷迭香提取物的体外抗氧化活性进行了研究。实验结果表明,迷迭香提取物具有明显的清除DPPH自由基、ABTS自由基的能力,且具有一定的还原能力,但能力较Vc稍弱,当浓度达到1000μg/mL时,迷迭香提取物清除ABTS自由基的作用效果与Vc相当。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
目录  7-9
1 前言  9-20
  1.1 衰老  9-14
    1.1.1 衰老的概念  9
    1.1.2 衰老的各种学说  9-11
    1.1.3 抗氧化活性评价体系  11-13
    1.1.4 抗氧化剂  13-14
  1.2 迷迭香  14-17
    1.2.1 迷迭香简介  14-15
    1.2.2 迷迭香的化学成分  15-16
    1.2.3 迷迭香的应用  16-17
  1.3 本文的研究目的与内容  17-20
    1.3.1 研究目的及意义  17-18
    1.3.2 研究的主要内容  18
    1.3.3 拟采取的研究路线  18-20
2 材料与方法  20-31
  2.1 实验材料、试剂与仪器  20-22
    2.1.1 实验材料  20
    2.1.2 主要仪器  20-21
    2.1.3 主要试剂  21-22
  2.2 迷迭香提取物体内抗氧化实验模型的建立方法  22-23
    2.2.1 D-半乳糖致衰老模型  22
    2.2.2 SAM鼠  22-23
  2.3 两种致衰老模型小鼠行为毒理学检测及方法  23-25
    2.3.1 平衡木实验(Beam walking)  23
    2.3.2 紧绳实验(Tightrope)  23-24
    2.3.3 旷场实验(Open field)  24
    2.3.4 水迷宫实验(Morris water maze,MWM)  24-25
  2.4 两种致衰老模型小鼠抗氧化指标检测及方法  25-26
    2.4.1 样品制备  25
    2.4.2 抗氧化系统的测定  25-26
  2.5 两种致衰老模型小鼠组织形态学检测及方法  26
    2.5.1 脏器指数测定  26
  2.6 D-半乳糖致衰老小鼠肝组织mRNA表达水平的检测及方法  26-28
    2.6.1 肝组织总RNA的提取  26
    2.6.2 RNA纯度的鉴定  26
    2.6.3 RNA完整性的鉴定  26-27
    2.6.4 cDNA的合成  27
    2.6.5 实时定量PCR  27-28
  2.7 迷迭香提取物体外抗氧化实验检测及方法  28-30
    2.7.1 总还原力的测定  28-29
    2.7.2 DPPH自由基清除率的测定  29
    2.7.3 Trolox等价抗氧化能力法(TEAC)测定清除ABTS自由基能力  29-30
  2.8 数据处理及统计分析  30-31
3 结果与讨论  31-63
  3.1 迷迭香提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化的影响  31-51
    3.1.1 D-半乳糖致衰老小鼠观察指标  31
    3.1.2 D-半乳糖致衰老小鼠行为毒理学测试  31-40
    3.1.3 抗氧化指标检测  40-45
    3.1.4 小鼠组织形态学  45-46
    3.1.5 ICR鼠肝组织mRNA表达水平的测定  46-51
  3.2 迷迭香提取物对SAM鼠抗氧化的影响  51-60
    3.2.1 SAM鼠观察指标  51-52
    3.2.2 SAM鼠行为毒理学测试  52-56
    3.2.3 抗氧化指标检测  56-60
    3.2.4 小鼠组织形态学  60
  3.3 迷迭香提取物体外抗氧化的测定  60-63
    3.3.1 总还原力的测定  60-61
    3.3.2 DPPH自由基清除率的测定  61-62
    3.3.3 Trolox等价抗氧化能力法(TEAC)测定清除ABTS自由基能力的测定  62-63
4 结论  63-65
  4.1 迷迭香提取物对D-半乳糖致衰老小鼠的作用  63
  4.2 迷迭香提取物对SAM鼠的作用  63
  4.3 迷迭香提取物体外抗氧化活性  63-65
5 展望  65-66
6 参考文献  66-73
7 攻读硕士期间论文发表情况  73-74
8 致谢  74

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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