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酒制女贞子治疗骨质疏松症的物质基础和作用机制研究

作　者: 黄君梅
导　师: 董小萍
学　校: 成都中医药大学
专　业: 药物化学
关键词: 抗骨质疏松 红景天苷 酸水解 炮制
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的：建立酸水解法提高女贞子提取物中红景天苷含量的方法；进行女贞子炮制前后浸膏的抗骨质疏松作用的对比研究,为酒制女贞子的抗骨质疏松作用在临床上的应用提供理论基础。方法：以红景天苷和酪醇的含量为考察指标,考察料液比、水解时间和水解温度对红景天苷含量的影响,用HPLC测定含量,采用正交实验法优选女贞子提取物中红景天苷的水解工艺条件,同时优选提取纯化工艺条件。采用HPLC法同时测定女贞子炮制前后浸膏中有效成分红景天苷、羟基酪醇和特女贞苷三者的含量；然后采用ALP活性来考察其对UMR-106细胞的分化作用的影响；采用脂质体瞬时转染的方法,利用转染雌激素受体ERα/β (estrogen receptor α/β)表达质粒的HeLa细胞,观察女贞子酒制前后浸膏对雌激素反应元件ERE (estrogen response element)报告基因的转录激活作用,考察植物拟雌激素样作用；同时选用DPPH、FRAP和ABTS三种抗氧化方法考察其总抗氧化能力大小。结果：女贞子最佳回流提取工艺条件为：6倍量水回流提取3次,每次1h。冰乙酸与女贞子提取液的料液比和水解时间对红景天苷的含量起主要作用,最佳冰乙酸水解条件为：在女贞子浓缩液中加入体积比为20：1的冰乙酸,100℃下回流20h。水解后红景天苷的含量约为未经酸水解的3倍。D4020型大孔树脂纯化女贞子中红景天苷的工艺条件为：上样浓度为0.5g浸膏·mL-1,料液与大孔树脂体积比为1：30,吸附流速为1BV·h-1,用20%乙醇洗脱5倍树脂体积。女贞子中有效成分红景天苷、羟基酪醇和特女贞苷三者的含量酒制后均高于生品；炮制前后均能不同程度地诱导ERE报告基因的转录激活；均能促进UMR-106细胞中ALP活性增强,且酒制品优于生品；酒制后总抗氧化能力高于生品。结论：通过优化提取纯化工艺,采用冰乙酸水解法可显著提高女贞子提取物中红景天苷的含量。女贞子酒制后具有抗骨质疏松作用且优于生品。

全文目录


中文摘要  2-3
ABSTRACT  3-7
前言  7-10
  1、立题依据  7-8
  2、研究目的和方法  8
  3、研究结果  8-9
  4、创新点  9-10
第一部分 酸水解法提高女贞子中红景天苷的工艺研究  10-27
  1.1 引言  10-11
  1.2 女贞子提取工艺  11-16
    1.2.1 材料与仪器  11-12
    1.2.2 对照品溶液的制备  12
    1.2.3 女贞子提取液即供试品溶液的制备  12
    1.2.4 色谱条件与系统适用性试验  12-13
    1.2.5 正交试验法优选女贞子中红景天苷的提取工艺  13
    1.2.6 结果与讨论  13-16
  1.3 正交设计优选酸水解法提高女贞子提取物中红景天苷的工艺  16-19
    1.3.1 优选酸水解工艺  16-18
    1.3.2 正交试验结果  18-19
    1.3.3 实验结果分析  19
    1.3.4 验证性试验  19
  1.4 大孔树脂纯化工艺  19-23
    1.4.1 大孔树脂筛选  20-21
    1.4.2 洗脱溶剂的浓度的选择  21
    1.4.3 上样浓度的确定  21
    1.4.4 吸附流速的确定  21-22
    1.4.5 20%乙醇洗脱量的确定  22
    1.4.6 料液与大孔树脂比例的确定  22
    1.4.7 小结  22-23
  1.5 讨论  23-25
  参考文献  25-27
第二部分 女贞子炮制前后抗骨质疏松作用的对比研究  27-51
  2.1 引言  27-28
  2.2 实验部分  28-38
    2.2.1 主要实验材料与仪器、细胞培养  29-30
    2.2.2 女贞子炮制前后有效成分含量测定  30-31
    2.2.3 女贞子炮制前后促UMR-106细胞分化作用  31-33
    2.2.4 拟雌激素作用检测  33-35
    2.2.5 体外抗氧化能力检测  35-38
  2.3 实验结果  38-46
    2.3.1 女贞子炮制前后有效成分含量分析结果  38-42
    2.3.2 女贞子炮制前后促UMR-106细胞ALP活性  42-43
    2.3.3 女贞子炮制前后的拟雌激素作用  43-45
    2.3.4 女贞子炮制前后抗氧化能力  45-46
  2.4 讨论  46-47
  2.5 总结与讨论  47-48
  参考文献  48-51
第三部分 文献综述  51-63
  3.1 抗骨质疏松症的研究进展  51-54
    3.1.1 骨质疏松症的定义及分类  51-52
    3.1.2 骨质疏松症的发病机制  52-53
    3.1.3 抗骨质疏松症药物研究现状  53-54
  3.2 红景天苷的研究现状  54-56
  3.3 女贞子抗骨质疏松症的研究现状  56-58
  参考文献  58-61
  致谢  61-62
  在校期间公幵发表的学术论文、专著及科研成果  62-63

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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