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古尼拟青霉主要成分的分析及药理作用初步研究
作 者: 张倩
导 师: 樊美珍
学 校: 安徽农业大学
专 业: 微生物学
关键词: 古尼拟青霉 古尼虫草 有效成分 镇静催眠 强化营养食品
分类号: R284
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
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古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii Liang)是古尼虫草(Cordyceps gunnii(Berk.)Betk)的无性型。本文对古尼拟青霉菌株RCEF0864液体发酵菌丝体的有效成分进行了分析并与古尼虫草所含成分进行比较。在此基础上以菌丝体为主要生产原料开发出具有改善睡眠作用的强化营养食品。对古尼拟青霉RCEF0864的菌丝体中所含蛋白质、胞内多糖、甘露醇、麦角甾醇、腺苷等成分进行了分析测定。试验结果显示,古尼拟青霉菌丝体中含有丰富的蛋白质、无机元素、胞内多糖等,且多种成分含量均显著高于天然古尼虫草。古尼拟青霉RCEF0864的菌丝体中含有丰富的对人体健康有益的Zn、Fe、Ca等元素,其中Cu元素含量高于古尼虫草中Cu元素含量。本实验针对古尼拟青霉胞内多糖的提取条件进行了研究。单因素实验结果表明,浸提温度、浸提时间、浸提固液比、浸提次数对古尼拟青霉胞内多糖提取效果具有影响作用,并通过正交试验研究胞内多糖最佳提取条件为:浸提温度100℃,浸提时间6小时,浸提固液比为1:50,浸提次数三次。菌丝体中多糖含量为56.74mg/g。本研究也探讨了古尼拟青霉菌丝体冻干粉的镇静催眠作用。以镇静催眠作为主要药效学指标,并通过小鼠镇静催眠模型,检测古尼拟青霉菌丝体冻干粉的镇静催眠活性。实验结果显示古尼拟青霉菌丝体冻干粉具有一定的镇静、催眠作用。以古尼拟青霉菌丝体为主要原料,辅以党参、黄芪、五味子、酸枣仁等中药配伍,经粉碎、混合、并用胶囊充填机生产胶囊,开发具有镇静催眠作用的强化营养食品,按照《保健食品安全性毒理学评价规范》中急性毒性实验要求,对胶囊进行急性毒性实验。结果显示,胶囊无毒副作用,小鼠灌胃最大耐受量大于8514mg/kg。通过以上试验,确立了虫草参芪胶囊的生产工艺,并制定了企业标准,在宁夏回族自治区以宁夏兆丰土特产品有限公司名义报批获得强化营养食品批号,宁卫食证字2009第640100SQ002号,企业标准为:Q/NZFT0003S—2009,已进行规模化生产。
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全文目录
摘要 3-4 Abstract 4-7 1 文献综述 7-14 2 引言 14-15 3 材料与方法 15-24 3.1 材料 15-16 3.1.1 供试菌株 15 3.1.2 主要仪器 15 3.1.3 培养基 15 3.1.4 化学药品和试剂 15-16 3.2 方法 16-24 3.2.1 实验菌株的准备 16 3.2.2 摇瓶种子的制备 16 3.2.3 发酵罐培养 16-17 3.2.4 发酵醪分离干燥 17 3.2.5 天然虫草处理 17 3.2.6 古尼虫草及古尼拟青霉主要化学成分比较分析 17-21 3.2.7 古尼拟青霉胞内多糖提取工艺优化 21-22 3.2.8 古尼拟青霉镇静催眠作用研究 22-23 3.2.9 虫草参芪胶囊急性毒性实验 23-24 4 结果与分析 24-36 4.1 古尼虫草及古尼拟青霉主要化学成分分析比较 24-28 4.1.1 古尼虫草及古尼拟青霉粗蛋白含量比较 24 4.1.2 古尼虫草及古尼拟青霉粗脂肪含量比较 24-25 4.1.3 古尼虫草及古尼拟青霉粗纤维含量比较 25 4.1.4 古尼虫草及古尼拟青霉水分及灰分含量比较 25 4.1.5 古尼虫草及古尼拟青霉无机元素含量比较 25-26 4.1.6 古尼虫草及古尼拟青霉甘露醇含量比较 26 4.1.7 古尼虫草及古尼拟青霉虫草多糖含量比较 26-27 4.1.8 古尼虫草及古尼拟青霉麦角甾醇含量比较 27 4.1.9 古尼虫草及古尼拟青霉腺苷含量比较 27-28 4.2 古尼拟青霉胞内多糖提取工艺优化 28-31 4.2.1 浸提固液比对提取效果的影响 28 4.2.2 浸提时间对提取效果的影响 28-29 4.2.3 浸提温度对提取效果的影响 29-30 4.2.4 浸提次数对提取效果的影响 30 4.2.5 正交实验 30-31 4.3 古尼拟青霉镇静催眠实验结果 31-33 4.3.1 古尼拟青霉菌丝体对小鼠自发活动的影响 31-32 4.3.2 阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响 32-33 4.4 虫草参芪胶囊的开发 33-36 4.4.1 虫草参芪胶囊急性毒性实验 33 4.4.2 虫草参芪胶囊主要成分分析 33-34 4.4.3 虫草参芪胶囊生产工艺 34-35 4.4.4 质量标准的建立 35-36 结论 36-39 讨论 39-41 参考文献 41-48 致谢 48-49 个人简介 49 攻读硕士学位期间发表的学术论文及科研成果 49-50 附件 50-55
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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