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三角帆蚌供片蚌对珍珠质量的影响

作　者: 刘越
导　师: 李家乐
学　校: 上海海洋大学
专　业: 水产养殖
关键词: 三角帆蚌育珠蚌供片蚌珍珠质量愈合再生
分类号: S966.22
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）是中国最主要淡水珍珠蚌，全世界85%以上的珍珠由三角帆蚌生产。研究三角帆蚌育珠蚌和供片蚌对所产珍珠质量的影响，是制定三角帆蚌育种规划、提高珍珠质量的重要内容。本研究定量分析了育珠蚌和供片蚌对珍珠质量的影响，基于供片蚌对珍珠质量的贡献，开发了三角帆蚌活体取供片蚌外套膜技术，利用组织学方法观察了外套膜活体切除后的愈合再生情况，探索了供片蚌对珍珠质量影响的分子生物学证据，为以提高淡水珍珠质量为目标的供片蚌和育珠蚌良种选育提供参考资料。1三角帆蚌供体和受体对所产珍珠质量的影响在插珠前，测量了供片蚌和育珠蚌各100个的生长性状和特定生长率（SGR）。插珠后18个月，测量了所产100个育珠蚌合计1746颗珍珠的大小、重量、圆度和颜色参数。育珠蚌SGR（壳长）、SGR（壳高）、SGR（壳宽）和SGR（体重）与珍珠珠重和大小均有极显著正相关，相关程度：SGR（体重）＞SGR（壳宽）＞SGR（壳长）＞SGR（壳高），与珍珠圆度及颜色参数a*、b*和C*相关性不显著。育珠蚌SGR（体重）与珍珠明度L*极显著正相关，与珍珠色差△E极显著负相关。珍珠珠重和大小与供片蚌壳高和壳长极显著正相关，圆度与供片蚌壳长、壳宽和体重极显著正相关，相关程度为壳宽＞体重＞壳长。珍珠颜色参数与供片蚌生长性状均无显著相关。珍珠珠重、大小、和颜色参数与育珠蚌内壳颜色参数L*、a*、b*、C*和△E均无显著相关，珍珠圆度与育珠蚌和供片蚌内壳各颜色参数均无显著相关。珍珠珠重和大小与供片蚌内壳L*极显著正相关。供片蚌内壳颜色对珍珠颜色有较大影响，其中珍珠L*与供片蚌内壳L*极显著正相关，与a*、C*和△E极显著负相关。珍珠a*与供片蚌内壳a*、b*、C*和△E极显著正相关。珍珠b*和C*与供片蚌内壳b*和C*极显著正相关，与△E显著正相关。珍珠△E与供片蚌内壳L*极显著负相关，与a*、C*和△E极显著正相关。供片蚌前部和后部外套膜小片所产珍珠珠重、大小、圆度和L*四个性状无显著差异，a*、b*、C*和△E四个性状存在极显著差异。后部外套膜所产珍珠在a*和b*平均值均显著偏大，饱和度C*和色差△E显著高于前部外套膜所产珍珠，表明供片蚌后部外套膜所产珍珠颜色更深更鲜艳，前部所产珍珠颜色较淡且偏白。2三角帆蚌供片蚌贡献外套膜小片后愈合与再生研究了切除外套膜组织后三角帆蚌的存活率、生长率及组织愈合再生过程。在三角帆蚌腹缘前部、中部和后部分别切除小规格（8～12mm×8～12mm）切口，并与对照组同时养殖三个月，成活率分别94.7%、92.0%、95.3%和94.7%，差异不显著。不同切口位置三角帆蚌的SGR（壳长）、SGR（壳宽）和SGR（体重）差异不显著，前部切口组的SGR（壳高）显著小于其它两组和对照组。在腹缘中部切除小规格、中规格（8～12mm×28～32mm）和大规格（8～12mm×48～52mm）外套膜组织后养殖三个月，三组和对照组成活率分别为92.0%、90.0%、90.7%和94.7%，大规格组成活率显著低于其它三组。SGR（壳长）、SGR（壳高）、SGR（壳宽）和SGR（体重）在四个组中趋势为：对照组>小规格组＞中规格组＞大规格组。肉眼观察，组织切除后12d再生组织使伤口面积缩小。再生组织生长至与正常组织在同一水平线上在小规格组、中规格组和大规格组中分别需要40d、75d和90d。组织学观察伤口组织切除后血细胞立刻大量积聚在伤口位置，至12h完全封住伤口。72h上皮形成使伤口完全愈合，15d时3个突起开始形成，25d时再生突起与正常组织相比在形态上差异很小，90d时再生组织无论在形态结构上还是功能上都与无切割处理的正常组织无异。本研究表明在不杀死供片蚌情况下，可取其外套膜制作小片，评价所产珍珠质量，为良种供片蚌选育提供技术支持。3三角帆蚌供片蚌小片对珍珠生长过程起作用的分子证据将背角无齿蚌外套膜小片移植入三角帆蚌体内培育珍珠10个月。利用三角帆蚌和背角无齿蚌ITS1基因片段之间核苷酸序列多态性设计特异性引物。在珍珠囊组织总DNA中扩增出与Genebank中背角无齿蚌ITS-1片段匹配分值为517，覆盖率为99%，E value为3e-143，PCR产物匹配一致性达99%。说明三角帆蚌在接受背角无齿蚌小片养殖10个月后，背角无齿蚌DNA仍存在与珍珠囊细胞内。这表明随着珍珠生长，供体小片细胞并没有死亡溶解，而是在持续增殖。本研究为淡水无核珍珠生长时期，供体细胞一直存在与珍珠囊中提供了证据，为三角帆蚌良种供片蚌选育提供基础资料。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-12
引言  12-14
第一章影响养殖珍珠质量的主要因子  14-23
  1 养殖珍珠质量评价内容  14-15
  2 育珠贝对珍珠质量的影响  15-18
    2.1 育珠贝种类对珍珠质量的影响  15-17
    2.2 育珠贝规格对珍珠质量的影响  17
    2.3 育珠贝壳色对珍珠颜色的影响  17-18
  3 供片贝对珍珠质量的影响  18-19
    3.1 供片贝种类对珍珠质量的影响  18
    3.2 供片贝年龄对珍珠质量的影响  18
    3.3 供片贝壳色对珍珠质量的影响  18-19
  4 插片手术工艺对珍珠质量的影响  19-20
    4.1 手术中化学药物因素对珍珠质量的影响  19-20
    4.2 小片分离方式对珍珠质量的影响  20
    4.3 插片个数对珍珠质量的影响  20
  5 养殖条件对珍珠质量的影响  20-23
    5.1 养殖水体水质及微量元素对珍珠质量的影响  20-21
    5.2 吊养深度对珍珠质量的影响  21
    5.3 吊养方式对珍珠质量的影响  21-22
    5.4 养殖周期对珍珠质量的影响  22-23
第二章三角帆蚌供体和受体对所产珍珠质量的影响  23-36
  1 材料和方法  23-26
    1.1 试验蚌  23
    1.2 插片手术  23-24
    1.3 数据测量  24-25
    1.4 计算  25
    1.5 数据分析  25-26
  2 结果  26-33
    2.1 三角帆蚌育珠蚌和供片蚌生长性状及特定生长率对珍珠质量的影响  26-28
    2.2 三角帆蚌育珠蚌和供片蚌内壳颜色参数对珍珠质量影响  28-29
    2.3 三角帆蚌供片蚌取片部位对珍珠质量的影响  29-33
  3 讨论  33-36
第三章三角帆蚌供片蚌贡献外套膜小片后愈合与再生  36-51
  1 材料和方法  36-38
    1.1 实验材料  36
    1.2 实验方法  36-38
    1.3 实验数据计算与分析  38
  2 结果  38-48
    2.1 三角帆蚌外套膜组织不同切除位置对成活率和生长率的影响  38-40
    2.2 三角帆蚌外套膜组织不同切除规格对成活率和生长的影响  40-41
    2.3 三角帆蚌外套膜组织切除后不同时间组织愈合和再生情况观察  41-48
  3 讨论  48-51
第四章三角帆蚌供片蚌小片对珍珠生长过程起作用的分子证据  51-59
  1 材料和方法  52-54
    1.1 外套膜小片异种移植  52
    1.2 提取珍珠囊总 DNA  52
    1.3 扩增 ITS-1 基因片段  52-54
  2 结果  54-56
    2.1 异种小片移植后所产珍珠  54-55
    2.2 PCR 产物  55-56
    2.3 序列分析  56
  3 讨论  56-59
小结  59-60
参考文献  60-67
硕士期间科研成果  67-68
致谢  68

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