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外源生长激素注射对尼罗罗非鱼骨骼肌生长及GH-IGFs生长轴基因表达的影响

作　者: 苗田田
导　师: 赵金良
学　校: 上海海洋大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 外源生长激素骨骼肌生长 GHRs IGFs MyoDs 尼罗罗非鱼
分类号: S917.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

骨骼肌是鱼体躯干的主要组成部分，肌纤维是构成骨骼肌的基本单元，骨骼肌生长包括新的肌纤维生成（即增生生长）及现有肌纤维体积的增大（即肥大生长）两种类型。鱼类肌肉发育生长受遗传、营养、环境和体内多种激素的共同调控。其中，GH-IGFs生长轴是鱼类生长调控的关键通路，此通路始于垂体分泌的生长激素（Growth hormone，GH），经血液循环与其受体结合后，刺激肝脏和其它组织中胰岛素样生长因子（Insulin-like growth factors, IGFs）的合成和分泌，IGFs作用于靶细胞和组织，启动细胞内的信号转导机制，从而促进组织细胞的生长和分化。为了探究外源生长激素对尼罗罗非鱼骨骼肌增生、肥大生长的影响及其分子机理，本研究对同一批次尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）进行为期7周的外源重组人生长激素注射实验，并设置了PBS注射对照组，每周注射一次，测量体重、体长等表型生长指标；隔周采集背部骨骼肌，利用石蜡切片技术分析骨骼肌肌纤维的数目与面积变化；同时，检测肝脏和骨骼肌组织生长激素受体GHR1、GHR2和胰岛素样生长因子IGF-1、IGF-2以及骨骼肌组织中成肌分化因子MyoD1、MyoD2mRNA表达变化。实验结果显示，（1）连续注射7周后，实验组鱼的体长、体重分别比对照组快28.9%和46.9%，两组间差异显著；实验组与对照组鱼背侧第1肌节中的肌纤维数目分别为2479±180、2127±172，总面积分别为5121373±76271μm2、4571134±91395μm2，实验组鱼肌纤维出现了明显的数目增生和面积增大现象。（2）肝脏和骨骼肌组织中生长激素受体GHR1mRNA表达出现显著上调，而GHR2mRNA表达显著下调；肝脏和骨骼肌组织胰岛素样生长因子IGF-1、IGF-2mRNA表达皆明显上调；骨骼肌组织中成肌分化因子MyoD1、MyoD2mRNA表达水平有显著升高。综合上述结果，推测外源生长激素通过上调GH-IGFs生长轴相关基因及MyoDs基因的表达，进而对尼罗罗非鱼的表型生长、骨骼肌肌纤维的增生与肥大产生显著的促进作用。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
引言  10-17
  1 鱼类肌纤维增生、肥大生长的研究进展  10-12
    1.1 增生生长  10-11
    1.2 肥大生长  11
    1.3 增生和肥大生长的影响因素  11-12
  2 鱼类 GH-IGFs 生长轴的研究进展  12-14
    2.1 生长激素的研究  12
    2.2 生长激素受体的研究进展  12-13
    2.3 胰岛素样生长因子的研究进展  13-14
  3 鱼类 MyoDs 基因的研究进展  14-15
  4 本研究所要解决的问题  15
  5 本研究的目的和意义  15-17
第一章外源生长激素注射对尼罗罗非鱼骨骼肌生长的影响  17-24
  1.1 前言  17
  1.2 材料与方法  17-19
    1.2.1 实验材料  17-18
    1.2.2 实验方法  18-19
  1.3 结果与分析  19-23
    1.3.1 外源生长激素对尼罗罗非鱼体重、体长生长影响  19-20
    1.3.2 外源生长激素对尼罗罗非鱼骨骼肌生长影响  20-23
      1.3.2.1 肌纤维数目增生  22
      1.3.2.2 肌纤维面积增大  22-23
  1.4 讨论  23-24
第二章外源生长激素对尼罗罗非鱼GH-IGFs生长轴及肌肉MyoDs 基因表达的影响  24-38
  2.1 前言  24-25
  2.2 材料与方法  25-29
    2.2.1 实验材料  25
    2.2.2 试剂与耗材  25-26
    2.2.3 仪器设备  26
    2.2.4 实验方法  26-29
  2.3 结果与分析  29-35
    2.3.1 总 RNA 提取结果  29
    2.3.2 qPCR 各引物标准曲线及溶解曲线  29-32
    2.3.3 注射生长激素后尼罗罗非鱼肝脏 GHRs mRNA 表达特征  32-33
    2.3.4 注射生长激素后尼罗罗非鱼肝脏 IGFs mRNA 表达特征  33
    2.3.5 注射生长激素后尼罗罗非鱼肌肉 GHRs mRNA 表达特征  33-34
    2.3.6 注射生长激素后尼罗罗非鱼肌肉 IGFs mRNA 表达特征  34-35
    2.3.7 注射生长激素后尼罗罗非鱼肌肉 MyoDs mRNA 表达特征  35
  2.4 讨论  35-38
小结  38-39
参考文献  39-49
硕士在读期间发表或待发表论文  49-50
致谢  50

外源生长激素注射对尼罗罗非鱼骨骼肌生长及GH-IGFs生长轴基因表达的影响

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