学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

黄土高原中华蜜蜂囊状幼虫病调查研究及梯度条带PCR检测方法的建立

作　者: 刘新宇
导　师: 张彦明
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 中华蜜蜂囊状幼虫病（CSB）调查研究梯度条带 PCR
分类号: S895.13
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 23次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

蜜蜂囊状幼虫病是一种在世界范围普遍发生的蜜蜂病毒病。蜜蜂囊状幼虫病的病原是直径28～30nm的近似球形的六边形单链RNA病毒颗粒。由于西方蜜蜂对这种病的抵抗力较强，感染后常可以自愈，所以不会造成大的损失。而东方蜜蜂对囊状幼虫病的抵抗能力较弱，一经感染容易蔓延流行，常常使蜂群遭受巨大的损失。本研究对20世纪年代以来黄土高原地区的陕西、宁夏、山西、甘肃等地区中华蜜蜂囊状幼虫病的发生情况进行了调查研究，建立了中华蜜蜂囊状幼虫病病毒的梯度条带PCR检测方法并初步应用，获得了以下结果：（1）黄土高原地区中华蜜蜂囊状幼虫病从20世纪70年代至今，共经历了3次大流行，分别是指70年代初期、80年代末期到90年代初期以及2002年至今。中华蜜蜂囊状幼虫病成为制约本地区中蜂产业发展的最大病害，造成的损失较大。（2）建立了一种新的快速、准确检测CSBV的梯度条带PCR方法，通过对陕南、陕北、关中三个地区的健康蜂及CSBV感染蜂分别进行传统RT-PCR和梯度条带PCR两种方法的检测，结果表明，传统RT-PCR和梯度条带PCR方法对三个地区的感染蜂检测结果一致，但梯度条带PCR方法相对快速和直观。与传统RT-PCR检测方法相比，梯度条带PCR方法能够在电泳检测阶段通过DNA片段的梯度次序即确定病毒存在与否，能够省去PCR产物测序步骤，极大缩短了对该病毒的鉴定周期，对及时发现和鉴定病蜂、采取预防措施提供了重要的技术手段。

全文目录

摘要  6-7
ABSTRACT  7-10
文献综述  10-23
  第一章中华蜜蜂及其囊状幼虫病研究进展  10-23
    1.1 中华蜜蜂简介  10-11
    1.2 中华蜜蜂形态及内部器官特征  11-12
      1.2.1 工蜂的形态特征  11
      1.2.2 蜂王和雄蜂的形态特征  11-12
      1.2.3 内部器官特点  12
      1.2.4 东方蜜蜂与西方蜜蜂的主要区别  12
    1.3 生物学特性  12-14
      1.3.1 群体生物学特性  12-13
      1.3.2 个体生物学特性  13-14
    1.4 中华蜜蜂人工繁育及产业现状  14-17
      1.4.1 古代中华蜜蜂人工繁育的历史  15
      1.4.2 近代中华蜜蜂的利用  15
      1.4.3 中华蜜蜂对经济社会的贡献  15-17
    1.5 中华蜜蜂产业存在的问题  17-19
      1.5.1 中华蜜蜂的保护问题  17
      1.5.2 中华蜜蜂饲养效益低下的问题  17-18
      1.5.3 中蜂应用范围单一的问题  18
      1.5.4 中华蜜蜂的病虫害问题  18-19
    1.6 中华蜜蜂囊状幼虫病  19-22
      1.6.1 发现与历史  19
      1.6.2 症状  19-20
      1.6.3 病原及鉴定方法  20-21
      1.6.4 防治方法与存在的问题  21-22
    1.7 本研究的意义  22-23
试验研究  23-30
  第二章黄土高原中华蜜蜂囊状幼虫病调查研究及梯度条带 PCR 检测方法的建立  23-30
    2.1 材料  23-24
      2.1.1 试验用蜜蜂幼虫  23
      2.1.2 主要试剂  23
      2.1.3 主要仪器  23-24
    2.2 方法  24-26
      2.2.1 中华蜜蜂囊状幼虫病在黄土高原地区流行情况调查  24
      2.2.2 中华蜜蜂囊状幼虫病病样的采集  24
      2.2.3 总 RNA 的提取  24
      2.2.4 cDNA 的制备  24
      2.2.5 引物的设计  24-26
      2.2.6 PCR 扩增  26
      2.2.7 琼脂糖凝胶电泳  26
    2.3 结果  26-29
      2.3.1 中华蜜蜂囊状幼虫病在黄土高原地区流行情况调查结果  26-27
      2.3.2 中华蜜蜂囊状幼虫病传统 RT-PCR 与梯度条带 PCR 检测结果  27-29
    2.4 讨论  29-30
结论  30-31
参考文献  31-33
致谢  33-34
作者简介  34

黄土高原中华蜜蜂囊状幼虫病调查研究及梯度条带PCR检测方法的建立

内容摘要

全文目录

相似论文