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“井岗701”芦笋四倍体诱导及其组织培养研究

作 者: 陈春桦
导 师: 易克贤;高建明
学 校: 海南大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 芦笋 四倍体 秋水仙素 形态特征 抗性 组织培养
分类号: S644.6
类 型: 硕士论文
年 份: 2014年
下 载: 3次
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内容摘要


芦笋学名石刁柏(Asparagus officinalis L.),英文名Asparagus,又称龙须菜。芦笋除了味道鲜美外,还具有极高的营养价值和药用价值。与二倍体植株相比,多倍体植株的器官一般要大得多,由于芦笋的食用部分为嫩茎,它的增大是提高芦笋的产量的重要因素,因此芦笋的多倍体育种具有重要意义。本试验以南方主栽品种“井岗701”二倍体芦笋的露白种子和幼苗作为试验材料,用秋水仙素诱导多倍体,并对诱导成功的四倍体芦笋进行了组织培养,取得以下研究结果:1.研究秋水仙素浓度、时间、浸泡时的离心速率对诱导效果的影响。结果表明:以0.2%的秋水仙素浸泡露白种子6h效果最好,四倍体诱导率最高为20%,但浸泡时的不同离心速率影响差异不显著;而用0.3%的秋水仙素连续滴苗4d,四倍体诱导率最高为18%;浸泡露白种子法比滴苗法诱导效果好。2.对四倍体和二倍体芦笋的形态特征进行了比较,结果表明:四倍体植株较二倍体叶长、叶厚、茎粗。3.通过对四倍体和二倍体芦笋的部分抗性进行比较,结果表明:在抗热性和抗旱性方面四倍体芦笋明显优于二倍体。4.通过流式细胞仪和细胞染色体鉴定:四倍体芦笋植株的染色体数由20条变为40条:加倍植株中还出现了二倍体和四倍体的嵌合体以及二倍体、四倍体和八倍体的嵌合体。5.通过诱导培养四倍体芦笋再生植株的研究,实验结果表明:四倍体芦笋茎尖诱导愈伤组织的最适培养基为:MS+2.5mg/L2,4-D+1.5mg/L KT+25g/L蔗糖+6.5g/L卡拉胶(pH5.8);适宜愈伤组织增殖诱导分化不定芽的最适培养基为:MS+1mg/L NAA+1.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+7g/L卡拉胶(pH5.8):生根最适培养基为:1/2MS+3mg/L PP333+0.5mg/LIBA+30g/L蔗糖+7g/L卡拉胶(pH5.8)。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-7
目录  7-9
1 前言  9-17
  1.1 芦笋简介  9-12
    1.1.1 芦笋的起源  9
    1.1.2 我国芦笋的栽培和贸易情况  9-10
    1.1.3 芦笋的营养成分及药用功能  10-12
  1.2 诱导倍性的几种常见药剂  12-13
    1.2.1 秋水仙素  12
    1.2.2 氟乐灵  12-13
    1.2.3 安磺灵  13
  1.3 倍性鉴定的方法  13-15
    1.3.1 形态学鉴定法  13
    1.3.2 细胞学鉴定法  13-14
    1.3.3 染色体计数法  14
    1.3.4 流式细胞仪分析法  14
    1.3.5 分子水平的鉴定  14-15
  1.4 四倍体植物组织培养的研究进展  15
  1.5 芦笋四倍体诱导及其组织培养研究进展  15-16
  1.6 本研究工作的内容、目的、意义  16-17
    1.6.1 内容  16
    1.6.2 研究目的  16
    1.6.3 研究意义  16-17
2 芦笋四倍体的诱导技术体系的研究  17-29
  2.1 实验材料、仪器和试剂  17
  2.2 试验方法  17-20
    2.2.1 种子的催芽  17
    2.2.2 浸泡露白种子法  17
    2.2.3 滴苗法  17-18
    2.2.4 流式细胞仪鉴定  18
    2.2.5 茎尖细胞染色体计数  18-19
    2.2.6 二倍体与四倍体植株形态特征的比较  19
    2.2.7 二倍体与四倍体植株抗逆性的比较  19-20
  2.3 数据处理  20
  2.4 结果与分析  20-29
    2.4.1 不同浓度的秋水仙素和浸种方法对四倍体诱导结果的影响  20-22
    2.4.2 不同浓度的秋水仙素和滴苗时间对四倍体诱导结果的影响  22-24
    2.4.3 流式细胞仪间接鉴定  24-26
    2.4.4 茎尖染色体计数直接鉴定  26-27
    2.4.5 二倍体与四倍体植株形态特征的比较  27-28
    2.4.6 二倍体与四倍体植株抗逆性的比较  28-29
3 四倍体芦笋快繁体系的研究  29-40
  3.1 实验材料、仪器和试剂  29
  3.2 试验方法  29-30
    3.2.1 愈伤组织的诱导  29
    3.2.2 不定芽出芽的诱导  29-30
    3.2.3 芦笋生根培养  30
  3.3 数据处理  30
  3.4 结果与分析  30-40
    3.4.1 诱导愈伤的培养基筛选  30-32
    3.4.2 诱导不定芽出芽的培养基筛选  32-35
    3.4.3 诱导再生根的培养基筛选  35-40
4 讨论  40-42
  4.1 芦笋四倍体的诱导技术的研究  40-41
  4.2 四倍体芦笋快繁体系的研究  41-42
5 结论  42-43
6 本实验研究的后续工作  43-44
参考文献  44-49
附录  49-51
致谢  51

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 多年生菜类 > 芦笋、石刁柏(龙须菜)
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