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“井岗701”芦笋四倍体诱导及其组织培养研究
作 者: 陈春桦
导 师: 易克贤;高建明
学 校: 海南大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 芦笋 四倍体 秋水仙素 形态特征 抗性 组织培养
分类号: S644.6
类 型: 硕士论文
年 份: 2014年
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内容摘要
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芦笋学名石刁柏(Asparagus officinalis L.),英文名Asparagus,又称龙须菜。芦笋除了味道鲜美外,还具有极高的营养价值和药用价值。与二倍体植株相比,多倍体植株的器官一般要大得多,由于芦笋的食用部分为嫩茎,它的增大是提高芦笋的产量的重要因素,因此芦笋的多倍体育种具有重要意义。本试验以南方主栽品种“井岗701”二倍体芦笋的露白种子和幼苗作为试验材料,用秋水仙素诱导多倍体,并对诱导成功的四倍体芦笋进行了组织培养,取得以下研究结果:1.研究秋水仙素浓度、时间、浸泡时的离心速率对诱导效果的影响。结果表明:以0.2%的秋水仙素浸泡露白种子6h效果最好,四倍体诱导率最高为20%,但浸泡时的不同离心速率影响差异不显著;而用0.3%的秋水仙素连续滴苗4d,四倍体诱导率最高为18%;浸泡露白种子法比滴苗法诱导效果好。2.对四倍体和二倍体芦笋的形态特征进行了比较,结果表明:四倍体植株较二倍体叶长、叶厚、茎粗。3.通过对四倍体和二倍体芦笋的部分抗性进行比较,结果表明:在抗热性和抗旱性方面四倍体芦笋明显优于二倍体。4.通过流式细胞仪和细胞染色体鉴定:四倍体芦笋植株的染色体数由20条变为40条:加倍植株中还出现了二倍体和四倍体的嵌合体以及二倍体、四倍体和八倍体的嵌合体。5.通过诱导培养四倍体芦笋再生植株的研究,实验结果表明:四倍体芦笋茎尖诱导愈伤组织的最适培养基为:MS+2.5mg/L2,4-D+1.5mg/L KT+25g/L蔗糖+6.5g/L卡拉胶(pH5.8);适宜愈伤组织增殖诱导分化不定芽的最适培养基为:MS+1mg/L NAA+1.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+7g/L卡拉胶(pH5.8):生根最适培养基为:1/2MS+3mg/L PP333+0.5mg/LIBA+30g/L蔗糖+7g/L卡拉胶(pH5.8)。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-7 目录 7-9 1 前言 9-17 1.1 芦笋简介 9-12 1.1.1 芦笋的起源 9 1.1.2 我国芦笋的栽培和贸易情况 9-10 1.1.3 芦笋的营养成分及药用功能 10-12 1.2 诱导倍性的几种常见药剂 12-13 1.2.1 秋水仙素 12 1.2.2 氟乐灵 12-13 1.2.3 安磺灵 13 1.3 倍性鉴定的方法 13-15 1.3.1 形态学鉴定法 13 1.3.2 细胞学鉴定法 13-14 1.3.3 染色体计数法 14 1.3.4 流式细胞仪分析法 14 1.3.5 分子水平的鉴定 14-15 1.4 四倍体植物组织培养的研究进展 15 1.5 芦笋四倍体诱导及其组织培养研究进展 15-16 1.6 本研究工作的内容、目的、意义 16-17 1.6.1 内容 16 1.6.2 研究目的 16 1.6.3 研究意义 16-17 2 芦笋四倍体的诱导技术体系的研究 17-29 2.1 实验材料、仪器和试剂 17 2.2 试验方法 17-20 2.2.1 种子的催芽 17 2.2.2 浸泡露白种子法 17 2.2.3 滴苗法 17-18 2.2.4 流式细胞仪鉴定 18 2.2.5 茎尖细胞染色体计数 18-19 2.2.6 二倍体与四倍体植株形态特征的比较 19 2.2.7 二倍体与四倍体植株抗逆性的比较 19-20 2.3 数据处理 20 2.4 结果与分析 20-29 2.4.1 不同浓度的秋水仙素和浸种方法对四倍体诱导结果的影响 20-22 2.4.2 不同浓度的秋水仙素和滴苗时间对四倍体诱导结果的影响 22-24 2.4.3 流式细胞仪间接鉴定 24-26 2.4.4 茎尖染色体计数直接鉴定 26-27 2.4.5 二倍体与四倍体植株形态特征的比较 27-28 2.4.6 二倍体与四倍体植株抗逆性的比较 28-29 3 四倍体芦笋快繁体系的研究 29-40 3.1 实验材料、仪器和试剂 29 3.2 试验方法 29-30 3.2.1 愈伤组织的诱导 29 3.2.2 不定芽出芽的诱导 29-30 3.2.3 芦笋生根培养 30 3.3 数据处理 30 3.4 结果与分析 30-40 3.4.1 诱导愈伤的培养基筛选 30-32 3.4.2 诱导不定芽出芽的培养基筛选 32-35 3.4.3 诱导再生根的培养基筛选 35-40 4 讨论 40-42 4.1 芦笋四倍体的诱导技术的研究 40-41 4.2 四倍体芦笋快繁体系的研究 41-42 5 结论 42-43 6 本实验研究的后续工作 43-44 参考文献 44-49 附录 49-51 致谢 51
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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 多年生菜类 > 芦笋、石刁柏(龙须菜)
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