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白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜远缘杂交研究

作　者: 何丽
导　师: 孙万仓
学　校: 甘肃农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 白菜型冬油菜 甘蓝型冬油菜 远缘杂交 杂交亲和性 杂种鉴定 抗寒性评价 SSR分子标记
分类号: S565.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


本研究以强冬性白菜型冬油菜陇油7号和陇油9号、甘蓝型冬油菜Vision及其种间杂种F1、F2为材料进行白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜杂交亲和性、白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜种间杂种鉴定、抗寒性的评价等研究，主要结果如下：1甘蓝型冬油菜与白菜型冬油菜种间杂交不亲和，甘蓝型冬油菜与白菜型冬油菜种间杂交亲和性大于白菜型与甘蓝型油菜种间杂交，亲和指数依次为0.122、0.051。2研究表明，白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜种间杂种的生物学性状介于亲本之间，为中间型；大多种间杂种半直立，秆绿，叶片宽大，全包茎，叶缘少量刺毛，偏向于母本。杂种植株营养生长茂盛，叶片宽厚，分枝发达，表现出较明显的杂种优势。也有部分植株苗弱、死蕾、甚至不育。杂种花色以及花蕾的数目均处于两亲本之间，花期也介于双亲之间，比母本晚，比父本早。但在整体形态上杂种植株偏母本。3甘、白亲本及其种间杂种气孔保卫细胞周长在不同叶片间变异程度小，同时发现同一叶片下部位的气孔保卫细胞周长变异程度较小。白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜亲本与甘×白种间杂种气孔保卫细胞周长在58.90μm和75.83μm处有着明显的分界。陇油7号、陇油9号的每个气孔上叶绿体数为10-12个，种间杂种陇油7×vision、陇油9号×vision叶绿体数在14-16个之间，vision叶绿体数在18-19之间。据此可以将杂种与亲本区别鉴定出来。4研究结果表明，叶片紧密组织指数（CTR）、POD活性、SOD活性、游离脯氨酸含量、可溶性蛋白含量等与油菜抗寒性密切相关，而且白菜型冬油菜的叶片紧密组织指数（CTR）、POD活性、SOD活性、游离脯氨酸含量、可溶性蛋白含量等大于甘蓝型冬油菜，甘白种间杂种叶片紧密组织指数（CTR）、POD活性、SOD活性、游离脯氨酸含量、可溶性蛋白含量介于双亲之间，呈中间值。因此，白甘杂交后代抗寒性要低于白菜型冬油菜，要通过白甘杂交选育具有甘蓝型冬油菜优良特性的白菜型冬油菜品种，必须通过适当的育种方法增强白甘杂种后代的抗寒性。5用SSR标记筛选出的10对多态性引物Ra3E05、Na10-B04、Ra2-A10、Ra2-E07、Na14-C12、Ol11H02a、BrH80C09、Na10-D09、Ra2-D04、Ni3H07。SSR检测白菜型冬油菜（陇油9号）×甘蓝型冬油菜（vision） F2群体的210株单株，结果表明：绝大部分单株扩增出与叶片有刺毛亲本（陇油9号）相同的带型或双亲的组合带型（杂合个体），而少部分叶片无刺毛单株则扩增出与无刺毛亲本（vision）一致的带型。由此可以可以推测10对SSR标记位点与叶片刺毛有连锁。

全文目录


摘要  2-4
Summmay  4-9
缩略词  9-10
第一章 文献综述  10-19
  1 油菜的分布及类型  10-11
    1.1 油菜的分布  10
    1.2 油菜分类  10-11
  2 芸薹属远缘杂交  11-15
    2.1 芸薹属间远缘杂交  11-12
    2.2 芸薹属远缘杂交不亲和性  12-13
      2.2.1 受精前杂交不亲和性  12-13
      2.2.2 受精后杂交不亲和性  13
    2.3 芸薹属中克服远缘杂交不亲和性的主要方法  13-15
    2.4 克服远缘杂交受精后不亲和性的方法  15
  3 远缘杂交杂种的鉴定识别方法  15-16
    3.1 形态鉴定  15
    3.2 细胞学分析法  15-16
    3.3 同工酶电泳分析法  16
    3.4 分子标记技术  16
  4 植物抗寒性研究进展  16-18
    4.1 叶片组织结构紧密度（CTR）  16-17
    4.2 酶活性  17-18
      4.2.1 超氧化物歧化酶（SOD）  17
      4.2.2 过氧化物酶（POD）  17-18
  5 强冬性白菜型冬油菜与甘蓝型油菜远缘杂交的目的意义  18-19
    5.1 研究的目的及意义  18
    5.2 主要研究内容  18-19
第二章 北方强冬性白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜远缘杂交亲和性研究  19-28
  1 试验材料与方法  19-21
    1.1 试验材料  19
    1.2 试验设计  19-20
    1.3 试验方法  20-21
      1.3.1 亲和指数测定  20
      1.3.2 花粉与柱头相互作用的动态观察  20
      1.3.3 花粉活力测定  20-21
  2 结果与分析  21-24
    2.1 白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜远缘杂交亲和指数  21-22
    2.2 甘白杂交花粉在柱头表面的粘合情况  22-23
    2.3 甘白远缘杂种花粉活力分析  23-24
  3 小结  24
  4 讨论  24-26
  附图  26-28
第三章 白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜杂种的表现与鉴定  28-44
  1 试验材料与方法  28-30
    1.1 试验材料  28-29
    1.2 试验方法  29-30
      1.2.1 不同品种植物学性状记载、调查分析  29
      1.2.2 叶片气孔保卫细胞周长及叶绿体个数鉴定种间杂种  29-30
      1.2.3 SSR 分子标记法验证  30
  2 结果与分析  30-39
    2.1 白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜杂种的植物学形态特征  30-31
    2.2 白甘杂种 F_1自交亲和性  31-32
    2.3 白菜型与甘蓝型油菜远缘杂交经济性状表现  32-33
    2.4 油菜不同叶位和部位叶片气孔保卫细胞周长和叶绿体数的比较  33-34
    2.5 各类型油菜亲本及种间杂种保卫细胞周长和叶绿体数比较  34-36
    2.6 亲本及种间杂种气孔保卫细胞周长和叶绿体数关系  36-37
    2.7 亲本及种间杂种气孔保卫细胞叶绿体数关系  37-38
    2.8 用气孔保卫细胞周长与叶绿体结合法鉴定种间杂种及其 SSR 验证  38-39
  3 小结  39
  4 讨论  39-41
  附图  41-44
第四章 白菜型冬油菜与甘蓝型冬油菜远缘杂种抗寒性的相关研究  44-56
  1 实验材料与方法  44-47
    1.1 试验材料  44
    1.2 试验设计  44-45
    1.3 试验方法  45-47
      1.3.1 不同抗寒性品种的抗寒性鉴定  45
      1.3.2 不同品种干物质积累特性  45
      1.3.3 油菜叶片组织结构的制片及观察  45
      1.3.4 过氧化物酶（POD）活性测定  45
      1.3.5 SOD 活性的测定  45-46
      1.3.6 游离脯氨酸含量测定  46
      1.3.7 可溶性蛋白含量测定  46
      1.3.8 可溶性糖含量测定  46-47
  2 结果与分析  47-54
    2.1 甘白远缘杂交后代的抗寒性  47
    2.2 叶片干物质积累与抗寒性的相关性  47-49
    2.3 甘白杂种叶片组织结构与抗寒性的相关性  49-50
    2.4 POD 活性变化  50-51
    2.5 SOD 活性变化  51-52
    2.6 游离脯氨酸含量变化  52-53
    2.7 可溶性蛋白含量变化  53
    2.8 可溶性糖含量变化  53-54
  3 小结  54
  4 讨论  54-56
第五章 甘蓝型与白菜型冬油菜远缘杂种刺毛 SSR 分子标记与遗传图谱构建  56-67
  1 实验材料及方法  56-61
    1.1 实验材料  56
    1.2 基础群体的构建  56-57
    1.3 实验方法  57-61
      1.3.1 F_2代叶片刺毛分离遗传统计  57
      1.3.2 基因组 DNA 提取  57
      1.3.3 DNA 的纯度及浓度检测  57-58
      1.3.4 SSR 反应体系及扩增程序  58-60
      1.3.5 SSR 引物筛选  60
      1.3.6 遗传距离的计算及作图  60-61
  2 结果与分析  61-66
    2.1 陇油 9 号×vision F_2代叶片刺毛有无分离遗传统计  61
    2.2 与刺毛性状相关的 DNA 分子标记  61-62
      2.2.1 基因组 DNA 的提取的结果  61
      2.2.2 SSR 标记在亲本间的多态性初步筛选  61-62
    2.3 SSR 引物在亲本间筛选的结果  62-63
    2.4 初步筛选出的引物在 F_2群体中的分离结果  63-64
    2.5 连锁性分析  64-66
  3 小结  66
  4 讨论  66-67
第六章 全文结论  67-69
参考文献  69-75
致谢  75-76
导师简介  76-77
个人简介  77-78

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 油料作物 > 油菜籽（芸薹）
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