学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

亚麻原生质体制备、融合及培养技术

作　者: 王丽爽
导　师: 张宗申
学　校: 大连工业大学
专　业: 发酵工程
关键词: 亚麻 红麻 愈伤组织 原生质体 融合
分类号: S563.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 2次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


亚麻（Linum usitatissimum L.）属蔷薇亚纲亚麻科1年生双子叶草本植物。亚麻纤维具有拉力强、柔软、细度好、导电弱、吸水散水快、膨胀率大等特点，素有纤维皇后的美誉。但是亚麻也有一些缺陷如生长迅速慢，生物产量低等。红麻（Hibiscus cannabinus L.）植株高大粗壮、生长周期短、生物产量高、干物质积累快。利用生物技术手段，将亚麻和红麻的原生质体进行融合，有可能克服自然界中形成的物种间的生殖隔离，将二者优势结合育成生长迅速、纤维好的新品种。本研究以亚麻种子和红麻种子为外植体，诱导产生愈伤组织，并从中筛选出生长迅速、松散易碎的愈伤组织，进行原生质体制备，分别研究了分离原生质体的酶液组成、酶解时间、渗透压浓度、酶解液pH值对原生质体分离纯化效果的影响，并对这两种植物材料的原生质体进行了融合研究，为亚麻与红麻的体细胞杂交进行初步的探索。主要研究结果如下：1.以亚麻和红麻的种子为外植体，MS为基本培养基，研究2,4-D、NAA、6-BA三种生长调节物质对愈伤组织诱导和生长的影响。结果表明：MS+2,4-D1.0mg/L为亚麻愈伤组织诱导的最佳培养基，MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.1mg/L为最佳增殖培养基；MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L为红麻愈伤组织诱导的最佳培养基，MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.5mg/L为最佳增殖培养基。2.对通过酶解获得原生质体的条件进行了优化。亚麻原生质体最适分离条件为：2.0%纤维素酶和0.5%果胶酶，0.55mol/L甘露醇，28℃黑暗下50r/min酶解6h最好，原生质体产量可达4.87×105个/g，原生质体活力为62.2%；红麻最适原生质体分离条件为：2.0%纤维素酶和1.0%果胶酶，0.55mol/L甘露醇，28℃黑暗下50r/min酶解处理6h，产量可达5.51×105个/g，原生质体活力为63.6%。3.本文研究了化学法和电融合法诱导两种原生质体融合的效果。结果表明：最佳融合条件为：PEG6000的浓度为40%、Ca2+浓度为0.3mol/L，pH值为9.5时融合百分率最高，可达11.5%；进行电融合时最适宜的电场参数为：交变电场强度为100V/cm，交变电场作用时间50s，直流脉冲强度800V/cm，直流脉冲时间60μs，3次脉冲。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-10
第一章 综述  10-22
  1.1 植物原生质体融合的研究进展  10-12
  1.2 原生质体的分离  12-14
    1.2.1 原生质体游离材料的选择  12
    1.2.2 酶液组成及浓度  12
    1.2.3 酶解时间  12-13
    1.2.4 酶液的渗透压  13
    1.2.5 原生质体活力的测定  13-14
  1.3 原生质体的培养  14-15
  1.4 植物原生质体融合  15-18
    1.4.1 原生质融合的方法  15-17
      1.4.1.1 NaNO_3融合法  15
      1.4.1.2 高 Ca~(2+)高 pH 值法  15
      1.4.1.3 聚乙二醇（PEG）细胞融合法  15-16
      1.4.1.4 电融和法  16-17
    1.4.2 杂细胞的筛选和鉴定  17-18
  1.5 亚麻和红麻研究进展  18-21
    1.5.1 亚麻  18-20
      1.5.1.1 亚麻纤维及其应用  18-19
      1.5.1.2 亚麻的栽培  19
      1.5.1.3 亚麻组织培养的研究  19
      1.5.1.4 生物技术在亚麻育种中的应用  19-20
    1.5.2 红麻  20-21
  1.6 本研究的目的和意义  21-22
第二章 材料与方法  22-27
  2.1 实验材料  22
  2.2 实验仪器与药品  22-23
  2.3 实验方法  23-27
    2.3.1 愈伤组织的诱导  23
    2.3.2 愈伤组织的细胞增殖  23
    2.3.3 愈伤组织的生长曲线的测定  23-24
      2.3.3.1 亚麻愈伤组织生长曲线的测定  23-24
      2.3.3.2 红麻愈伤组织生长曲线的测定  24
    2.3.4 原生质体分离  24-25
      2.3.4.1 CPW 溶液配制  24
      2.3.4.2 原生质体的分离、纯化  24-25
      2.3.4.3 原生质体产量的侧定  25
      2.3.4.4 原生质体活力的侧定  25
    2.3.5 化学融合  25
    2.3.6 电融合  25-27
第三章 结果与讨论  27-44
  3.1 亚麻愈伤组织诱导及筛选  27-30
    3.1.1 亚麻愈伤组织诱导  27-29
      3.1.1.1 外源激素对亚麻愈伤组织诱导和生长的影响  27-28
      3.1.1.2 外源激素组合对亚麻愈伤组织诱导和生长的影响  28-29
    3.1.2 亚麻愈伤组织的增殖与筛选  29-30
    3.1.3 亚麻愈伤组织生长的曲线  30
  3.2 红麻愈伤组织诱导及筛选  30-34
    3.2.1 红麻愈伤组织诱导  30-32
      3.2.1.1 外源激素对红麻愈伤组织诱导和生长的影响  30-32
      3.2.1.2 外源激素组合对红麻愈伤组织诱导和生长的影响  32
    3.2.2 红麻愈伤组织增殖与筛选  32-33
    3.2.3 红麻愈伤组织生长的曲线  33-34
  3.3 原生质体分离  34-39
    3.3.1 不同酶组合及浓度对原生质体分离效果的影响  34-36
    3.3.2 不同酶解时间对亚麻、红麻原生质体分离的影响  36-37
    3.3.3 不同甘露醇浓度对原生质体分离的影响  37-39
  3.4 化学融合  39-41
    3.4.1 PEG 种类及浓度选择对原生质体融合的影响  39-40
    3.4.2 Ca2+浓度与 pH 值对原生质体融合效果的影响  40-41
  3.5 电融合  41-44
    3.5.1 交流电场强度（AC）对原生质体串珠形成的影响  41
    3.5.2 直流脉冲电压（DC）对原生质体融合的影响  41-42
    3.5.3 不同直流脉冲作用时间对融合率的影响  42-44
第四章 结论  44-45
参考文献  45-51
致谢  51

相似论文

  1. 基于微型无人平台导航多传感器信息融合算法研究,V249.32
  2. 多传感器组网及反隐身、抗干扰接力跟踪技术研究,TN953
  3. 图像拼接技术研究,TP391.41
  4. 双传感器图像联合目标检测及系统实现研究,TP391.41
  5. 唇读中的特征提取、选择与融合,TP391.41
  6. 基于基因组重排技术的1，3-丙二醇高产菌株选育,TQ923
  7. 媒介融合中电视媒体的困境与出路,G206
  8. 电视传播中的粉丝文化效应,G223
  9. 水稻及拟南芥神经酰胺基因的克隆及突变体的鉴定,S511
  10. 嗜热菌几丁质结合域及其在酶固定化中应用的研究,Q814
  11. PEG诱导的雨生红球藻细胞融合与变异株的筛选,S968.49
  12. 亚麻籽胶对玉米淀粉糊化和老化特性的影响以及在乳化肠中的应用,TS231
  13. 半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂对口腔肿瘤细胞抑制作用实验研究,R739.8
  14. 共轭多烯脂肪酸的氧化机制及其稳定性改善,O621.25
  15. 改性植物油的流变学性能,TS221
  16. 三网融合背景下供应链采购管理,G229.2-F
  17. 基于雷达影像活动断裂信息提取方法与示范应用研究,P542.3
  18. 亚麻纤维染色性能改进的研究,TS193.8
  19. “墨色相映”,J205
  20. 分布式多视点视频编码容错边信息与相关噪声模型研究,TN919.81
  21. 基于多尺度分析的图像融合算法研究,TP391.41

中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 纤维作物 > 麻类作物 > 亚麻
© 2012 www.xueweilunwen.com