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水稻三系不育系天丰A对螟虫和稻瘟病抗性改良研究
作 者: 仲雪婷
导 师: 牟同敏
学 校: 华中农业大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 水稻 不育系 稻瘟病 螟虫 抗性改良 分子标记辅助选择
分类号: S511
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
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稻瘟病是水稻的主要病害之一,在我国的南北稻区都有发生,造成减产。螟虫,包括(稻纵卷叶螟、二化螟和三化螟),是我国水稻生产上的主要鳞翅目害虫,每年都会造成水稻的减产。分子标记辅助选择(MAS)技术和转基因技术是培育抗稻瘟病和抗螟虫水稻的有效途径。本研究将杂交、回交的传统育种方法与MAS技术相结合,分别将供体亲本华108B的抗稻瘟基因Pil,Pi2和Tlc-19的抗虫基因cry1C*导入三系保持系天丰B中,再通过多次自交和选择,初步培育出了抗稻瘟病或抗螟虫的水稻三系不育系。主要的研究结果有:1、水稻三系不育系天丰A的稻瘟病抗性改良:以保持系天丰B为受体亲本,华108B为供体亲本,运用MAS技术和杂交回交转育法,通过1次杂交、3次回交和多次自交将Pi-1和Pi-2基因转入到保持系天丰B中,选育出了同时携带Pi-1和Pi-2基因的新株系2个,携带Pi-2基因的新株系2个,分别命名为华丰1B、华丰2B、华丰3B和华丰4B。在远安和恩施对新保持系的稻瘟病抗性进行了田间鉴定,抗性明显提高,都在中抗水平以上。再以不育系天丰A为母本,4个保持系为父本,通过1次杂交、4次回交,初步育成了4个抗稻瘟病的不育系,命名为华丰1A、华丰2A、华丰3A和华丰4A。花粉不育度观察表明,4个不育系的不育性基本稳定。组合测配和杂种优势鉴定表明,部分组合的产量、稻米品质、生育期和其他主要农艺性状都与天丰A所配组合相当。2、水稻三系不育系天丰A的螟虫抗性改良:以天丰B为受体亲本,Tlc-19为供体亲本,通过1次杂交、3次回交和多次自交并结合bar基因选择标记和基因内分子标记,已经将cry1C*基因转入到保持系天丰B中,选育出了含cry1C*基因的新株系3个,分别命名为华丰6B、华丰7B和华丰8B。再以不育系天丰A为母本,3个保持系为父本,通过1次杂交、4次回交,初步育成了携带cry1C*基因的抗螟虫不育系3个,分别命名为华丰6A、华丰7A和华丰8A。花粉不育度观察表明,3个不育系的不育性基本稳定。组合测配和杂种优势鉴定表明,部分组合的产量、稻米品质、生育期和其他主要农艺性状与天丰A所配组合相当。抗性鉴定表明,不育系和所配杂交组合都抗螟虫。3、基因聚合改良不育系天丰A的稻瘟病和螟虫抗性:以天丰B4/华108B的BC3F1代群体中携带Pi-1和Pi-2基因的单株与天丰B4/Tlc-19的BC3F1代群体中携带cry1C*基因的单株进行杂交,应用MAS技术进行3基因聚合,选育出了8个3基因聚合的保持系株系,并且与天丰A进行了3次回交,其花粉育性和配合力有待进一步研究。
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全文目录
摘要 7-9 ABSTRACT 9-11 缩略词表 11-12 1 前言 12-25 1.1 籼型三系不育系的研究进展 12-15 1.1.1 籼型三系不育系的发展历史 12-13 1.1.2 籼型三系不育系的类型 13 1.1.2.1 细胞质来源分类 13 1.1.2.2 败育类型分类 13 1.1.3 籼型三系不育系选育的方法 13-14 1.1.3.1 远缘杂交核置换 13-14 1.1.3.2 回交转育 14 1.1.3.3 人工制保 14 1.1.4 籼型三系不育系的育种目标 14-15 1.1.4.1 突出品质 14 1.1.4.2 提高抗性 14-15 1.1.4.3 重视异交率 15 1.2 分子标记及分子标记辅助选择 15-16 1.2.1 分子标记的类型 15 1.2.2 分子标记辅助选择技术的原理及优越性 15 1.2.3 分子标记辅助选择在水稻育种中的应用 15-16 1.2.3.1 回交育种 15-16 1.2.3.2 MAS聚合育种 16 1.3 水稻稻瘟病研究进展 16-23 1.3.1 稻瘟病的概述 16 1.3.2 稻瘟病菌的研究进展 16-19 1.3.2.1 稻瘟病菌生理小种的鉴别 17 1.3.2.2 稻瘟病菌的致病机理 17-18 1.3.2.3 稻瘟病菌致病性变异原因 18-19 1.3.3 水稻稻瘟病抗性的研究进展 19-23 1.3.3.1 水稻抗稻瘟病的机制 19 1.3.3.2 稻瘟病无毒基因的研究进展 19-20 1.3.3.3 水稻抗稻瘟病基因的研究进展 20-23 1.3.4 水稻抗稻瘟育种的方法 23 1.3.4.1 杂交育种 23 1.3.4.2 诱变育种 23 1.3.4.3 生物技术育种 23 1.4 转Bt基因水稻的研究进展 23-24 1.4.1 Bt基因的研究进展及其在水稻中的应用 23-24 1.4.2 转cry1C~*虫水稻的培育 24 1.5 研究目的和意义 24-25 2 材料和方法 25-35 2.1 实验材料 25 2.1.1 亲本材料及来源 25 2.1.2 用于组合测配的恢复系材料和对照品种 25 2.2 实验方法 25-35 2.2.1 分子标记辅助选择的技术路线 25-28 2.2.1.1 抗稻瘟病不育系田间回交及MAS技术路线 25-26 2.2.1.2 抗螟虫不育系田间回交及MAS技术路线 26-27 2.2.1.3 抗稻瘟、螟虫基因聚合不育系的选育路线 27-28 2.2.2 DNA样品的微量提取法 28-29 2.2.3 PCR反应程序和分子标记 29 2.2.4 保持系遗传背景的分析 29 2.2.5 不育系花粉育性、自交结实率及异交结实率的考察 29-30 2.2.6 稻瘟病抗性鉴定 30-31 2.2.6.1 病圃 30 2.2.6.2 田间设计 30 2.2.6.3 自然诱发 30 2.2.6.4 调查及分级评价标准 30-31 2.2.7 田间自然条件下螟虫抗性鉴定 31-32 2.2.7.1 稻纵卷叶螟危害的调查 31 2.2.7.2 二化螟和三化螟危害的调查 31-32 2.2.8 不育系和保持系的田间种植和选择 32-33 2.2.8.1 抗稻瘟和抗螟虫不育系及保持系的田间种植和选择 32 2.2.8.2 抗稻瘟、抗螟虫的三基因聚合不育系及保持系的田间种植和选择 32-33 2.2.9 测配材料的田间种植 33-34 2.2.9.1 测配恢复系和不育系的田间种植 33-34 2.2.9.2 测配组合的田间种植 34 2.2.10 水稻农艺性状的考察和稻米品质分析 34 2.2.10.1 水稻农艺性状的考察 34 2.2.10.2 稻米品质分析 34 2.2.11 DUS的测定 34-35 3 结果和分析 35-71 3.1 分子检测和株系选择 35-39 3.1.1 抗稻瘟病保持系的分子检测结果和株系选择 35-36 3.1.2 抗螟虫保持系的分子检测结果和株系选择 36-37 3.1.3 三基因聚合保持系的分子检测结果和株系选择 37-39 3.2 决选保持系株系的全基因组检测 39-42 3.3 决选不育系的育性表现 42-49 3.3.1 不同世代、不同地点的平均花粉育性表现 42-43 3.3.2 海南和武汉的花粉动态表现 43-49 3.4 决选不育系和保持系的主要农艺性状和稻米品质表现 49-55 3.4.1 决选不育系和保持系的主要农艺性状表现 49-53 3.4.2 决选保持系的稻米品质表现 53-55 3.5 决选保持系的稻瘟病抗性表现 55-58 3.6 决选保持系和不育系的螟虫抗性表现 58-59 3.7 华丰1A和华丰7A试繁种的异交率表现 59-61 3.8 华丰1A和华丰7A的DUS测定 61-63 3.9 决选不育系的组合测配效果 63-71 3.9.1 杂交组合的产量表现 63-66 3.9.2 杂交组合的主要农艺性状表现 66-70 3.9.3 部分杂交组合的稻米品质表现 70-71 4 讨论 71-76 4.1 决选的7个不育系和保持系的评价 71-75 4.1.1 华丰1A和华丰1B 71 4.1.2 华丰2A和华丰2B 71-72 4.1.3 华丰3A和华丰3B 72 4.1.4 华丰4A和华丰4B 72-73 4.1.5 华丰6A和华丰6B 73-74 4.1.6 华丰7A和华丰7B 74 4.1.7 华丰8A和华丰8B 74-75 4.2 强优势组合的评价 75-76 4.2.1 华丰3A/成恢727 75 4.2.2 华丰4A/R066 75 4.2.3 华丰7A/华占 75-76 参考文献 76-84 致谢 84-85 附录 85-94
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 稻
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