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慈溪杨梅病害调查及主要病原种类鉴定与病害防治

作　者: 王振荣
导　师: 童蕴慧
学　校: 扬州大学
专　业: 植物病理学
关键词: 杨梅溃疡病杨梅赤衣病杨梅拟盘多毛孢叶斑病杨梅炭疽病杨梅果腐病害控制
分类号: S436.67
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

杨梅(学名：Morella rubra,原名Myrica rubra)是我国的一种特产水果,具有很高的经济价值。杨梅原产于浙江省慈溪和余姚市,现在我国南方多省都有种植。杨梅可遭受多种病害的为害,有些病害能造成枝条枯死,叶片脱落,果实腐烂,甚至成年树木死亡。但是,目前对杨梅病害的研究较少,有些病害种类至今未有明确描述和鉴定。为了综合治理病害,保证杨梅树健康生长,本研究对浙江省慈溪市杨梅果园进行了病害种类调查和主要病原菌鉴定。杨梅上常见的细菌病害为溃疡病,该病发病普遍,株发病率为38.3%,其中重病株占13.2%,轻病株25.1%。该病对杨梅危害较重,可引起枝干死亡。柯赫氏法则确定了分离菌株的致病性。经形态学和16S rDNA序列分析,该病的病原菌为丁香假单胞菌杨梅致病变种Pseudomonas syringae pv. myricae。选择药剂进行毒力测定,农用链霉素等药剂有一定抑菌效果,田间试验农用链霉素防病效果最好,病斑复发率仅8.3%,对照病斑复发率为100%。筛选到一株生防放线菌YZF3,对溃疡病菌的抑制效果与农用链霉素相仿,经形态学和16SrDNA序列分析,鉴定YZF3为黄三素链霉菌(Streptomyces flavotricini)。杨梅真菌病害有几种。有杨梅赤衣病,株发病率为31.7%,其中严重发病的占7.5%,多数病株病斑在树干基部,未出现引起树木死亡现象。叶片病害有杨梅拟盘多毛孢叶斑病,在果园属零星发病。分离获得3株菌,柯赫氏法则确定了2个分离菌株的致病性。经形态学与ITS序列分析,2个菌株为聚多拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sydowiana)和广布拟盘多毛孢(Pestalotiopsis disseminata)。叶片病害还有杨梅炭疽病,在调查果园中也呈零星发病。分离得到6株菌,接种显示具有明显的致病性。形态学鉴定均为炭疽菌,ITS序列分析表明,6株菌均属胶孢炭疽(Colletotrichum gloeosporioides),但用胶孢炭疽特异性引物鉴定,其中只有2株为胶孢炭疽,其它4株菌种类还有待用其它方法鉴定。从病果上根据不同症状分离到4株菌,根据形态特征和ITS序列,这4株菌分别是桔青霉(Penicillium citrinum)、棒曲霉(Aspergillus clavatus)、木霉(Trichoderma sp.)和葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)。其它未知病害有：1.叶片变色,叶肉颜色褪绿,后期黄化,该病害发生普遍,病株率达50.6%,病叶主要分布与幼嫩枝梢,未分离到真菌和细菌,因此该病不属于真菌或细菌病害。2.全株枯死,未分离到真菌和细菌,在调查中仅出现一株。3.枝条枯死,枝条皮层呈环状开裂,枯死,未分离到真菌和细菌,调查中仅发现一株。4.绿藻,绿藻附生在叶片表面,这种植株在果园中零星分布。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-22
  一、杨梅产业现状  9-10
  二、杨梅病害种类  10-18
    (一) 真菌病害  10-14
    (二) 细菌病害  14-15
    (三) 线虫病害  15-16
    (四) 生理性病害  16-18
  三、植物病原菌种类鉴定  18-20
    (一) 形态及生物学性状鉴定  18-19
    (二) 分子生物学方法  19-20
  四、杨梅病害防治措施与现状  20-21
    (一) 农业措施  20
    (二) 化学药剂  20-21
    (三) 生物防治  21
  五、本研究的目的与意义  21-22
材料与方法  22-31
  一、培养基  22-23
    (一) 细菌培养基  22
    (二) 真菌培养基  22
    (三) 放线菌培养基  22-23
  二、试剂与仪器  23-24
    (一) 主要试剂  23
      1、DNA提取液配制  23
      2、PCR、琼脂糖凝胶电泳所需试剂  23
      3、核酸电泳缓冲液  23
    (二) 主要仪器  23-24
  三、实验方法  24-31
    (一) 病害调查方法  24
    (二) 菌株分离与纯化  24-25
      1、病原菌分离与纯化  24-25
      2、土壤放线菌分离与纯化  25
    (三) 细菌鉴定方法  25-27
      1、形态鉴定  25
      2、分子生物学鉴定  25-27
    (四) 真菌鉴定方法  27-28
      1、形态鉴定  27
      2、分子生物学鉴定  27-28
    (五) 拮抗放线菌鉴定  28-29
      1、形态鉴定  28-29
      2、分子生物学鉴定  29
    (六) 病菌致病性测定  29-30
      1、杨梅接种试验  29-30
      2、烟草接种试验  30
    (七) 防治药剂筛选与应用  30-31
      1、药剂筛选  30
      2、田间试验方法  30-31
结果与分析  31-58
  一、杨梅溃疡病  31-38
    (一) 病害特点  31
    (二) 分离株毒性  31-32
      1、对杨梅致病性测定  31-32
      2、烟草过敏性反应  32
    (三) 病菌种类  32-34
      1、形态特征  32-33
      2、16S rDNA特征  33-34
    (四) 病害防治  34-38
      1、药剂筛选  34-35
      2、田间防病试验  35-36
      3、拮抗菌筛选与鉴定  36-38
  二、拟盘多毛孢叶斑病  38-42
    (一) 病害特点  39
    (二) 分离株致病性  39
    (三) 病菌种类  39-42
      1、形态特征  39-40
      2、ITS序列特征  40-42
  三、炭疽病  42-49
    (一) 病害特点  42-43
    (二) 分离株致病性  43
    (三) 病菌种类  43-49
      1、形态特征  43-46
      2、ITS序列特征  46-49
  四、赤衣病  49-50
    (一) 病害特点  49
    (二) 病菌特征  49-50
  五、果实腐烂  50-55
    (一) 病害特点  50
    (二) 分离株种类  50-55
      1、形态特征  50-52
      2、ITS序列特征  52-55
  六、其它病害  55-58
    (一) 藻类病害  55-56
    (二) 未知病害  56-58
      1、叶片变色  56
      2、植株枯死  56-57
      3、枝条枯死  57-58
小结与讨论  58-62
  一、小结  58
    (一) 病害种类  58
    (二) 病原菌种类  58
    (三) 溃疡病防治  58
  二、讨论  58-62
    (一) 杨梅溃疡病  58-59
    (二) 杨梅拟盘多毛孢叶斑病  59-60
    (三) 杨梅炭疽病  60
    (四) 杨梅果实病害  60-61
    (五) 杨梅病害防治  61-62
参考文献  62-70
附录  70-73
攻读硕士学位期间发表论文  73-74
致谢  74-75

慈溪杨梅病害调查及主要病原种类鉴定与病害防治

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