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桑叶提取液对甜菜夜蛾幼虫的毒杀作用

作　者: 王师丹
导　师: 孙广玉
学　校: 东北林业大学
专　业: 植物营养学
关键词: 桑叶浸提物 DNJ 槲皮素液相色谱甜菜夜蛾幼虫生长干扰
分类号: S433.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

甜菜夜蛾Spodoptera exigua (Hiibner)属于鳞翅目夜蛾科,是世界性分布的多食性农业害虫,也是主要的世界性害虫。危害多种十字花科蔬菜。目前,我国对甜菜夜蛾的防治措施主要为化学防治。长期使用化学农药造成了许多严重的后果。为了减少和延缓甜菜夜蛾对杀虫剂抗性的产生,人们开始使用植物源杀虫剂。桑树中含有1-脱野尻霉素(DNJ)和槲皮素等具有生物活性的次生代谢产物,能有效抑制糖苷酶活性,可大大降低鳞翅目害虫对植物的危害。本文在国家自然科学基金项目(30771046)的资助下,以桑树叶片的干粉为原料,优化提取工艺,并以甜菜夜蛾为研究对象进行生物活性检测。利用无水乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯和四氯甲烷五种溶剂浸提原料,优化浸提方法,比较粗提物的重量并利用液相色谱法分析各粗提物中DNJ和槲皮素含量。以清水作为对照,研究不同浓度的粗提物水溶液对甜菜夜蛾幼虫生长的干扰作用。其主要结果如下：1、以无水乙醇为溶剂进行提取方法比较,实验得出：超生波提取法效果>温浸提取法效果>冷浸提取法效果。2、以超声波提取法提取,比对无水乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯和四氯甲烷五种溶剂进行DNJ和槲皮素的提取。通过对上述4种溶剂的粗提物进行液相色谱分析得出结论为：(1)DNJ提取率：无水乙醇>四氯甲烷>正丁醇>丙酮>乙酸乙酯。(2)槲皮素提取率：无水乙醇>四氯甲烷>丙酮>乙酸乙酯>正丁醇。3、以超声波提取法提取,以40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇和无水乙醇进行比较。实验得出：60%乙醇>80%乙醇>40%乙醇>无水乙醇。故此本实验结果表明超声波提取法中60%的无水乙醇作为溶剂为最优的提取方案。4、桑叶粗提物水溶液对甜菜夜蛾幼虫的生长抑制率在实验48h-96h间都在80%左右。触杀的效果在实验开始24h后就有明显效果,但胃毒出现明显效果的时间为48h后。虽然胃毒作用的效果比触杀慢,但是,在不同浓度处理的实验中,胃毒对于甜菜夜蛾幼虫的生长抑制率均高于触杀处理的抑制率。5、通过对甜菜夜蛾幼虫持续施药120h来看,随着时间的延续,甜菜夜蛾幼虫的死亡率和校正死亡率均为上升趋势。说明桑叶浸提液对甜菜夜蛾具有毒杀作用,且浓度越高效果越明显。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-6
目录  6-8
1 绪论  8-17
  1.1 课题背景  8
  1.2 桑树的价值  8-11
    1.2.1 桑树的资源概述  8-9
    1.2.2 桑属植物的化学成分研究  9-10
    1.2.3 桑叶的药用价值  10-11
  1.3 桑树中活性物质及其研究概况  11-14
    1.3.1 DNJ的研究概况  11-13
    1.3.2 槲皮素的研究概况  13-14
  1.4 甜菜夜蛾的研究概况  14-16
    1.4.1 甜菜夜蛾的分布及危害  14-15
    1.4.2 甜菜夜蛾的生物学特性  15
    1.4.3 甜菜夜蛾的抗药性研究  15
    1.4.4 甜菜夜蛾的防治措施  15-16
  1.5 在植物源农药的研究概况及特点  16
  1.6 目的意义  16-17
2 桑叶杀虫抑菌活性物质提取工艺  17-31
  2.1 实验材料、方法  17-18
    2.1.1 实验仪器和试剂  17
    2.1.2 供试植物  17
    2.1.3 供试昆虫  17-18
    2.1.4 提取方法  18
  2.2 桑叶中1-DNJ和槲皮素含量测定  18-22
    2.2.1 粗提物样品溶液的制备  18-19
    2.2.2 DNJ标准液的配制  19
    2.2.3 DNJ的衍生化处理  19
    2.2.4 空白溶液的配制  19
    2.2.5 槲皮素标准液的配制  19
    2.2.6 HPLC色谱条件  19
    2.2.7 不同提取方法提取桑叶粗提物的比较  19-20
    2.2.8 不同溶剂提取桑叶粗提物的比较  20-21
    2.2.9 不同浓度的乙醇溶剂对桑叶粗提物的比较  21-22
    2.2.10 结论  22
  2.3 不同粗提物的1-DNJ和槲皮素含量检测  22-29
    2.3.1 标准曲线的绘制  22-23
    2.3.2 精密度试验  23
    2.3.3 稳定性试验  23-24
    2.3.4 加样回收率  24-25
    2.3.5 1-DNJ含量的测定  25
    2.3.6 DNJ的HPLC色谱图分析  25-27
    2.3.7 槲皮素的含量测定  27-29
    2.3.8 HPLC结果与分析  29
  2.4 总结  29-31
3 桑叶粗提物对甜菜夜蛾的毒杀作用  31-34
  3.1 实验方法  31
    3.1.1 供试虫源  31
    3.1.2 供试活性物质  31
    3.1.3 实验处理与设计  31
  3.2 测定方法  31-34
    3.2.1 试虫生长抑制率的测定  31-32
    3.2.2 死亡率测定  32
    3.2.3 校正死亡率测定  32-34
4 结果与分析  34-39
  4.1 不同浓度桑树浸提液粗提物对甜菜夜蛾幼虫生长的抑制作用  34-35
  4.2 不同浓度的粗提物溶液对甜菜夜蛾幼虫的触杀与胃毒作用  35-36
  4.3 甜菜夜蛾死亡率的测定  36-39
5 结论  39-40
参考文献  40-45
攻读学位期间发表的学术论文  45-46
致谢  46-47

桑叶提取液对甜菜夜蛾幼虫的毒杀作用

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