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蚕蛹蛋白质酶解制备蚕蛹活性肽的研究

作　者: 刘旭辉
导　师: 廖丹葵
学　校: 广西大学
专　业: 化学工艺
关键词: 蚕蛹蛋白组成酶解活性肽可控动力学
分类号: TS201.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

蚕蛹是家蚕繁育后代的母体,蕴藏着丰富的蛋白质、脂肪、磷脂、无机盐、维生素等生命营养成分,尤其是蛋白质含量极高,是一种优质的昆虫动物蛋白源,具有很高的营养和药用价值。蛋白质酶解是指蛋白质在酶的催化作用下水解生成肽、胨等低分子量产物的过程,活性肽是蛋白质结构中具有特殊生物活性的碎片序列,可利用动植物蛋白酶解得到。本论文以蚕蛹为研究对象,在通过对蚕蛹成分进行系统分析的基础上,研究酶促水解蚕蛹蛋白制备生物活性肽的规律,内容包括：采用实验法考察了不同缫丝厂干蚕蛹中水分、蛋白质、蛹油的含量；通过正交实验考察得到以石油醚来提取蚕蛹油的优化工艺条件：温度60℃,时间2h,料液比1：10；采用国标法测得脱脂蚕蛹粉主要成分：蛋白质68.86%、脂肪8.7%、水分4.63%、灰分3.12%；采用反向HPLC法测得蚕蛹蛋白质由18种氨基酸组成,8种人体必需氨基酸占总量的60%,氨基酸的配比、含量均符合FAO/WHO所规定的理想蛋白质模式；采用水解度为考察指标,筛选出适宜蚕蛹酶解的蛋白酶为碱性蛋白酶；采用单因素实验法考察得到蚕蛹蛋白质酶解最优工艺条件：底物浓度S0为6%～8%,酶用量Eo/S0为0.05%,pH值9.50,温度50℃,水解时间6.0h,此时蚕蛹酶解的水解度24.67%,蚕蛹酶解产物主要是小分子肽。根据实验数据和经验公式推出,50℃时碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白的水解度动力学模型：DH=4.5511n[1一(1.4663E0、S0+O.O164)t]；水解速率动力学方程：r=(6.9725Eo+0.0781S0)exp[-0.2103(DH)]；酶失活动力学模型：ab=1.4782Eo/S0+0.0156。动力学常数k2=6.9725min-1；,酶失活常数kd=1.4782min-1.经验证动力学模型与实验结果相吻合,说明该模型具有实际应用价值。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-8
符号说明  8-9
第一章绪论  9-15
  1.1 蚕蛹蛋白的研究进展  9-10
    1.1.1 蚕蛹蛋白的性状  9
    1.1.2 蚕蛹蛋白的综合利用  9
    1.1.3 蚕蛹蛋白的研究进展及前景  9-10
  1.2 生物活性肽及其研究现状  10-12
    1.2.1 生物活性肽及其来源  10-11
    1.2.2 生物活性肽的功能及分类  11
    1.2.3 生物活性肽的研究进展  11-12
  1.3 酶解蛋白法制备生物活性肽及其研究进展  12-13
    1.3.1 蛋白质酶解的研究  12
    1.3.2 蛋白酶促水解研究进展  12-13
    1.3.3 酶解蛋白法制备生物活性肽的国内外研究进展  13
  1.4 选题意义及内容  13-15
    1.4.1 选题意义  13-14
    1.4.2 研究内容  14-15
第二章蚕蛹油提取工艺条件的优化  15-22
  2.1 仪器与试剂  15-16
    2.1.1 实验仪器  15-16
    2.1.2 实验试剂和材料  16
  2.2 技术与方法  16-17
    2.2.1 材料预处理  16
    2.2.2 蚕蛹原料成分分析  16
    2.2.3 工艺流程  16-17
    2.2.4 蚕蛹油的提取  17
  2.3 结果与讨论  17-21
    2.3.1 蚕蛹主要成分分析结果  17-18
    2.3.2 温度对蚕蛹出油率的影响  18-19
    2.3.3 浸提时间对蚕蛹出油率的影响  19
    2.3.4 料液比对蚕蛹出油率的影响  19-20
    2.3.5 最佳浸出工艺条件的优化  20-21
  2.4 小结  21-22
第三章脱脂蚕蛹主要成分及蚕蛹蛋白氨基酸组成分析  22-31
  3.1 实验试剂与仪器  22-23
    3.1.1 实验试剂  22-23
    3.1.2 实验仪器  23
  3.2 实验测定与数据处理方法  23-26
    3.2.1 脱脂蚕蛹粉主要成分测定方法  23
    3.2.2 脱脂蚕蛹粉主要成分测定的数据处理方法  23-24
    3.2.3 蚕蛹蛋白氨基酸组成分析  24-26
  3.3 结果与讨论  26-29
    3.3.1 脱脂蚕蛹主要组成分析结果  26
    3.3.2 氨基酸混合标准样品的分析结果  26-28
    3.3.3 样品分析及结果  28-29
  3.4 小结  29-31
第四章酶解蚕蛹蛋白制备蚕蛹活性肽工艺条件优化  31-40
  4.1 材料和方法  31-35
    4.1.1 实验材料和仪器  31
    4.1.2 实验方法  31-35
    4.1.3 蚕蛹蛋白酶解工艺  35
  4.2 结果及讨论  35-39
    4.2.1 蚕蛹蛋白质酶解种类筛选  35
    4.2.2 蚕蛹蛋白碱性酶酶解条件优化  35-39
  4.3 小结  39-40
第五章蚕蛹蛋白质碱性蛋白酶酶解动力学模型研究  40-48
  5.1 实验的材料、药品及仪器  40
    5.1.1 材料与药品  40
    5.1.2 实验仪器  40
  5.2 实验的方法  40-41
    5.2.1 蚕蛹蛋白粉的制备  40
    5.2.2 酶解工艺  40-41
    5.2.3 水解度的测定  41
    5.2.4 总氮测定  41
  5.3 结果与分析  41-47
    5.3.1 碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白的动力学模型  41-43
    5.3.2 碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白动力学参数的确定  43-46
    5.3.3 可控酶解动力学模型的验证  46-47
  5.4 小结  47-48
第六章结论与展望  48-49
参考文献  49-52
致谢  52

蚕蛹蛋白质酶解制备蚕蛹活性肽的研究

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