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A21978C发酵条件优化及高产菌株选育

作　者: 杨夏露
导　师: 马富英
学　校: 华中科技大学
专　业: 微生物学
关键词: A21978C 达托霉素玫瑰孢链霉菌发酵诱变育种
分类号: TQ920.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

A21978C是对革兰氏阳性菌有抑制作用的脂肽类抗生素，包括达托霉素（A21978C0）及其衍生物A21978C1-C5。目前国内关于A21978C发酵的研究少见报道，产量低，难以实现商业化生产，因此，深入研究A21978C的发酵条件及选育高产菌株具有重要意义。本论文为了提高玫瑰孢链霉菌产A21978C的产量，从发酵条件的优化和高产菌株选育两个方面进行了系统研究，现将研究结论分述如下：对玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus NRRL11973)生物学属性进行考察，发现它在斜面及摇瓶培养基上生长性状良好。发酵液中A21978C由C0-C3四个成分组成。对达托霉素稳定性进行考察，发现其在高温下结构被破坏，碱性条件下发生不可逆变性，变性后抑菌活性消失。研究了玫瑰孢链霉菌的摇瓶发酵条件，得到最优发酵条件为：斜面培养时间13d；接种量6%；发酵最佳初始pH值为6~7；发酵温度28℃；摇床转速150r/min；装液量50mL/500mL；最佳氮源是黄豆粉，最佳碳源是糊精和淀粉；考察不同前体物及关键辅酶因子对A21978C产量影响，结果证实癸酸对A21978C产量影响最大，在发酵24h后添加0.15g/L癸酸，A21978C产量提高了26.3%。最优发酵条件下A21978C产量达到1261.9mg/L，是未优化前产量（306.9mg/L）的4.1倍。使用紫外诱变照射和抗性平板筛选相结合的方法获得了菌株DZ-4，以菌株DZ-4为受体，原始菌株为供体，使用原生质体融合技术，获得菌株DY-4，产量达到1388.1mg/L，是原始菌株产量的1.21倍，经验证菌株DY-4遗传性能稳定。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
1 绪论  9-18
  1.1 A21978C 及达托霉素  9-11
  1.2 A21978C 的发酵工艺研究进展  11-15
  1.3 A21978C 含量的检测  15-16
  1.4 课题立意  16-18
2 材料与方法  18-27
  2.1 实验仪器与试剂  18-20
  2.2 实验用菌种  20
  2.3 实验用培养基  20-21
  2.4 实验方法  21-27
3 结果与讨论  27-56
  3.1 原始菌株发酵生物学属性研究  27-35
  3.2 发酵条件的研究  35-50
  3.3 高产菌株选育  50-56
4 结论与展望  56-58
  4.1 结论  56
  4.2 展望  56-58
致谢  58-59
参考文献  59-65
附录攻读硕士学位期间发表论文  65

A21978C发酵条件优化及高产菌株选育

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