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菊三七化学成分及抗肿瘤活性研究

作　者: 肖梦媛
导　师: 吴和珍
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 菊三七化学成分结构鉴定抗肿瘤作用
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

菊三七来源于菊科菊三七属植物Gynura segetum (Lour.) Merr.的根茎和根,始载于《滇南本草》,具有止痛消肿、活血化瘀、止血消炎、抗癌防癌、抗疟疗痹、清热解毒等功效,为我国传统的民间习用品。该属植物具有多种生物活性,根据文献报道,菊三七属提取物具有明显的抗肿瘤活性,对于皮肤癌等多种肿瘤细胞具有良好的抑制作用,但其抗肿瘤的物质基础及作用机制并不十分明确,有待进一步深入研究。菊三七适当粉碎,以70%乙醇渗漏提取,提取物回收乙醇,残留物采用系统溶剂法依次萃取,得到石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水溶液提取物。以SMMC-7721(人肝癌细胞)和ECA-109(人食道癌细胞)为受试对象,采用MTT法,对上述五个部位进行了抗肿瘤活性筛选,结果显示二氯甲烷部位、正丁醇部位为主要活性部位,SMMC-7721细胞为敏感细胞株。采用硅胶柱色谱、凝胶渗透色谱和MCI-GEL CHP20P柱色谱等方法对活性部位进行系统的分离纯化,从中共分离得到6个单体化合物。通过NMR波谱技术分别鉴定为槲皮素(Quercetin)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、菊三七碱乙(E-seneciphylline).千里光宁(senecionine)、千里光菲灵(Seneciphylline)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol)。以SMMC-7721细胞为受试对象,采用MTT法对上述单体化合物进行了抗肿瘤活性筛选,从中筛选出2个具有抗肿瘤活性的化合物菊三七碱乙和千里光宁,其IC50值分别为：116.64μg·mL-1、95.95μg·mL-1,千里光宁对SMMC-7721细胞的杀伤作用与阳性对照药物卡铂相当。菊三七碱乙和千里光宁抗肿瘤活性为首次报道。采用AO染色的方法进行形态学观察,结果表明千里光宁对SMMC-7721肿瘤细胞具有良好的抑制作用,并呈现剂量依赖性。研究结果为阐明菊三七抗肿瘤作用的物质基础提供了科学依据,也为菊三七的深入研究奠定了基础。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
缩略语释义  9-10
前言  10-12
第一章菊三七的研究概况  12-22
  1 生药学研究  12-13
  2 化学成分研究  13-17
  3 药理作用研究  17-19
  4 临床应用  19-20
  5 毒理研究  20
  6 小结  20-22
第二章菊三七抗肿瘤活性部位筛选研究  22-32
  1 试药与仪器  22-23
  2 实验方法  23-27
  3 结果与讨论  27-31
  4 小结  31-32
第三章菊三七抗肿瘤活性部位化学成分研究  32-44
  1 仪器与试药  32-33
  2 提取与分离  33-36
  3 化合物结构鉴定  36-43
  4 小结  43-44
第四章菊三七抗肿瘤活性成分的筛选研究  44-50
  1 实验试剂及仪器  44
  2 细胞培养  44
  3 MTT实验方法  44-45
  4 MTT实验结果  45-47
  5 荧光染色细胞形态学观察  47-48
  6 小结  48-50
第五章结语与创新  50-51
参考文献  51-56
已发表和待发表文章  56-57
致谢  57-58
附图  58-63

菊三七化学成分及抗肿瘤活性研究

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