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α-1，3岩藻糖转移酶Ⅳ基因靶向miRNA干扰载体对人肝癌细胞HepG2的肿瘤生物学行为的影响

作　者: 陈松伟
导　师: 陈德
学　校: 广州医学院
专　业: 普通外科
关键词: FUT4 SLeX miRNA 肝癌
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


背景原发性肝癌是世界第6位常见癌症,也是全球癌症的第3大死因,而在我国是第2大癌症死因,全球每年大约有600000人死于肝癌,原发性肝癌不仅严重影响到了人类的寿命及生活质量,同时也对个人家庭及国家经济造成了沉重的负担[1-3]。目前,原发性肝癌的最有效治疗方法仍是以手术切除为主的综合治疗,但肝癌的术后转移复发,严重影响肝癌的远期疗效,有资料表明,肝癌术后1年复发率达20%-64%,3年复发率可高达57%-81%。癌症的转移复发是一个复杂的病理过程,与细胞间的粘附具有密切的联系。目前的研究表明,粘附因子参与肿瘤的转移复发过程,并发挥着重要的作用。在对结肠癌、乳腺癌及前列腺癌等癌组织的研究中发现,细胞表面抗原SLeX在这些癌组织的表达增强,并且与预后具有明显相关性[4.5]。而在肝癌组织中,SLeX的表达水平也比癌周组织增高[6]。同样,在对肝癌组织的研究中,Zhang等[7]发现FUT4的表达水平也增高。现有研究表明,FUTs参与机体的组织发育、血管形成、受精、细胞粘附、信号调节、炎症及肿瘤转移等生理病理过程[8]。通过对炎症反应及其他癌症组织的研究,发现SLeX的合成与FUTs具有关联性,而FUTs也具有多样性,并呈现出一定的时态性和阶段性[9-13]。然而,在肝癌组织中,SLeX与FUT4两者的关联性仍不明确,两者在肝癌的转移复发机制中的作用也未得到具体的阐述。对SLeX及FUT4的研究有利于我们加深对肝癌的转移复发机制的进一步认识,对于肝癌的治疗提供理论指导作用。目的研究FUT4对肝癌细胞株HepG2表面抗原SLeX表达的影响,以及是否对肝癌细胞HepG2的肿瘤生物学行为产生影响,探讨FUT4在肝癌的转移过程中的作用。方法构建针对FUT4的miRNA载体,进行脂质体转染,并用抗生素进行压力筛选,形成稳定转染的细胞株;用FQ-PCR和WB鉴定miRNA对FUT4的干扰效率;比较干扰前后细胞表面SLeX抗原的表达情况,以及肝癌细胞的迁移、侵袭和粘附能力的差异性改变。结果通过miRNA干扰后,肝癌细胞HepG2中的FUT4在蛋白水平及mRNA水平的表达明显降低,细胞表面SLeX抗原的表达也相应减少,而肝癌细胞HepG2的迁移、侵袭及粘附等肿瘤生物学行为也表现出一定的抑制效应。结论在肝癌细胞HepG2中,FUT4参与SLeX抗原的部分合成,并对HepG2细胞株的肿瘤生物学行为具有影响,在肝癌的转移机制中发挥着一定的作用。

全文目录


中文摘要  3-5
ABSTRACT  5-8
中英文索引表  8-9
前言  9-11
材料与试剂  11-25
结果  25-34
讨论  34-42
结论  42-43
参考文献  43-48
综述  48-62
  参考文献  57-62
致谢  62-63

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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