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兰花内生菌对铁皮石斛抗逆性的研究

作　者: 张霞
导　师: 韩正敏
学　校: 南京林业大学
专　业: 微生物学
关键词: 铁皮石斛组织培养内生菌抗逆性
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

铁皮石斛为兰科石斛属草本植物,是我国传统的名贵中药材。由于多年来对野生铁皮石斛的过量采摘,使我国野生铁皮石斛资源锐减,人们开始着手进行人工栽培和繁殖。近年来人工繁殖铁皮石斛虽然取得一些进展,但在组织培养繁殖,组培苗的移栽及在移栽后的生长等方面仍然存在许多问题。如移栽成活率低、移栽后生长缓慢、产量低等。许多研究表明,野生铁皮石斛体内通常有内生菌存在,而组培苗往往缺乏内生菌。本研究在组培研究的基础上,对铁皮石斛组培苗和盆栽苗分别进行了接种内生菌,研究其对铁皮石斛的促生能力和抗逆性的影响。主要研究结果如下：1.为获得组培苗的生长一致性,研究了原球茎的培养方法。发现液体培养要比固体培养更适合原球茎的生长。液体培养的原球茎很少出现不等分化且增值率较高。液体培养的最佳处理为,接种量6g/flask,接种液体积100ml/flask。2.探索了盆栽基质与成活率的关系,了解到铁皮石斛盆栽苗移栽的最适基质配方为树皮2份和草炭5份。3.研究了兰花内生菌对铁皮石斛移栽成活率影响,发现接种内生菌的铁皮石斛的移栽成活率比不接菌的要高,其中接种内生菌GDB254的铁皮石斛苗的成活率最高,为94.31%。4.接种兰花内生菌后,观察了内生菌对铁皮石斛苗生长的促进作用。发现不管接种任何一种菌还是接种混合菌,对铁皮石斛苗高茎粗生长方面,都有很好的促进作用,多数达到了显著性差异水平。其中混合接种内生菌GDB254×GDB162×MLX102×GS222的铁皮石斛苗生长最好。从新芽发生数量的数据分析中看,接种内生菌MLX102对铁皮石斛苗的分生能力有很好的促进作用,接种株根部可分生出许多新芽。而不同的接菌方式和接菌次数对铁皮石斛苗的影响不存在差异。5.接种内生菌后,研究了内生菌对铁皮石斛抗逆性的影响,发现接种内生菌铁皮石斛苗的抗性要比不接菌的好。其中接种GDB162和GS222的铁皮石斛苗表现出较高的抗旱性；接菌的铁皮石斛苗在抗盐性方面没有表现出显著性差异。6.在内生菌与铁皮石斛根部致病菌的对抗中,不管是在铁皮石斛组培苗还是盆栽苗中,接种MLX102的表现都最好,对三种致病菌都有较好的拮抗作用,且与对照存在显著性差异。

全文目录

致谢  3-4
摘要  4-5
Abstract  5-9
引言  9-10
第一章文献综述  10-21
  1. 铁皮石斛及其药用价值  10-15
    1.1 铁皮石斛的生物学和生态学特征  10-11
    1.2 铁皮石斛组织培养方面研究进展  11-14
    1.3 铁皮石斛大田栽培与采收研究  14-15
  2 兰科植物内生菌根真菌研究进展  15-21
    2.1 兰科植物内生真菌的特点  15-16
    2.2 内生真菌与兰科植物的互作关系  16-19
    2.3 内生真菌对铁皮石斛的促生作用和抗逆性  19-21
第二章铁皮石斛原球茎培养和组培苗移栽  21-28
  1 试验材料和方法  21-22
    1.1 试验材料  21-22
    1.2 试验方法  22
  2. 结果与分析  22-27
    2.1 不同培养方式对铁皮石斛原球茎生长的影响  22-23
    2.2 接种量与培养液体积对铁皮石斛原球茎生长的影响  23-25
    2.3 不同栽培基质对盆栽苗成活率的影响  25-27
  3 小结与讨论  27-28
第三章内生菌对铁皮石斛生长发育的影响  28-38
  1 试验材料  28-29
    1.1 供试苗木  28
    1.2 供试菌株  28-29
    1.3 培养基  29
  2 试验方法  29-30
    2.1 菌种的培养  29
    2.2 内生菌的接种  29-30
  3 结果分析  30-36
    3.1 内生菌对组培苗移栽成活率的影响  30-31
    3.2 不同接菌处理对铁皮石斛苗生长的影响  31-34
    3.3 接菌方式对铁皮石斛苗的影响  34-35
    3.4 接菌次数对铁皮石斛苗的影响  35-36
  4 小结与讨论  36-38
第四章内生菌对铁皮石斛抗逆性的影响  38-45
  1 试验材料  38
    1.1 供试苗木  38
    1.2 供试菌株  38
  2 试验方法  38-40
    2.1 丙二醛(MDA)含量的测定  38-39
    2.2. 水分胁迫试验  39
    2.3 绝对干旱和等级干旱试验  39
    2.4 盐分胁迫试验  39-40
  3 试验结果与分析  40-43
    3.1 内生菌对铁皮石斛抗旱性的影响  40-42
    3.2 内生菌对铁皮石斛耐盐性的影响  42-43
  4 小结与讨论  43-45
第五章内生菌对铁皮石的抗病性研究  45-51
  1 试验材料  45
    1.1 供试苗木  45
    1.2 供试菌株  45
    1.3 培养基  45
  2 试验方法  45-46
    2.1 内生菌和病原菌在组培苗中的对峙试验  45-46
    2.2 内生菌和病原菌在盆栽苗中的对峙试验  46
  3 结果分析  46-49
    3.1 组培苗中内生菌与致病菌的对峙试验  46
    3.2 铁皮石斛盆栽苗中内生菌与致病菌的对抗试验  46-49
  4 小结与讨论  49-51
全文总结与讨论  51-53
参考文献  53-57
详细摘要  57-59
Abstract  59-60

兰花内生菌对铁皮石斛抗逆性的研究

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