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小果博落回抗鱼类病原菌活性成分的研究

作 者: 李福元
导 师: 王高学
学 校: 西北农林科技大学
专 业: 基础兽医学
关键词: 小果博落回 分离 鉴定 药动学模型
分类号: S948
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 29次
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内容摘要


本研究试图从小果博落回(Macleaye microcarpa)分离获得杀灭水产病原菌的活性成分,为直接利用这一植物资源创制无公害新型渔药,以其为模板仿生合成新型杀菌、奠定理论基础。该项目的研究,对水产新渔药开发和绿色水产品的生产具有重要的意义。本研究取得了以下几个成果:1.小果博落回抗鱼类病原菌活性部位的研究。分别采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醇和水5种极性不同的溶剂对小果博落回进行提取,并测定不同溶剂提取物的抗菌活性。结果显示:乙醇浸提物24 h时对四种病原菌的的抑菌效果最好,为4mg/mL,其次为氯仿,石油醚和乙酸乙酯,MIC为8 mg/ml-10mg/ml。水提物的抑菌效果最差,对所有病原菌的最小抑菌浓度为10mg/ml。对照组没有表现出抑菌作用。2.小果博落回杀灭鱼类病原菌活性成分的跟踪分离和鉴定。通过柱层析分离、反复重结晶结合活性跟踪的方法,从小果博落回中分离得到4种对四种鱼类病原菌有活性作用的单体成分化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ。其中化合物Ⅰ对四种病原菌的活性最好,对嗜水气单胞菌的MIC为12.5mg/L,化合物Ⅱ对嗜水气单胞菌的MIC为80mg/L,化合物Ⅲ、化合物Ⅳ对嗜水气单胞菌的MIC为100mg/L。化合物Ⅰ对杀鲑气单胞菌,鳗弧菌和哈氏弧菌的MIC为50mg/L,化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ对以上三种菌的MIC范围在100-200mg/L。通过理化性质和光谱分析,鉴定化合物Ⅰ为血根碱,化合物Ⅱ为6-甲氧基二氢白屈菜红碱,化合物Ⅲ为别隐品碱,化合物Ⅳ为隐品碱。3.以血根碱30 mg·kg-1(bw)的剂量灌喂鲫鱼,其药动学模型符合一级吸收一室开放模型。药动学方程: C = 1.793e-0.213t-1.793e0.426t。主要药动学参数为主要药代动力学参数如下:吸收速率常数Ka 0.426 h-1;消除半衰T(1/2) 3.255 h ;药时曲线下面积AUC 25.180μg·h·mL-1;表观容积分布Vd/F 5.594 L·kg-1;清除率CL(s) 1.191 mL·h-1·kg-1;达峰时间Tpeak 3.255 h;药峰浓度Cmax 2.681μg·mL-1。说明鲫鱼对血根碱的摄取比较迅速,吸收较好,可以作为植物源水产药物使用。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-10
第一章 文献综述  10-18
  1.1 鱼类病原菌性疾病的危害及其防治概况  10-12
    1.1.1 鱼类常见的细菌性疾病及其危害  10-11
    1.1.2 鱼类细菌病的主要的防治措施  11-12
  1.2 博落回属植物的研究进展  12-16
    1.2.1 博落回概况  12
    1.2.2 博落回属植物中的化学成分研究概况  12-13
    1.2.3 博落回属植物的药理作用及应用研究概况  13-16
  1.3 博落回生物碱的提取分离研究概况  16-17
  1.4 血根碱药代动力学研究概况  17
  1.5 本文研究的目的和意义  17-18
第二章 小果博落回抗菌的活性部位  18-21
  2.1 材料与方法  18-21
    2.1.1 材料  18
    2.1.2 方法  18-20
    2.1.3 讨论  20
    2.1.4 小结  20-21
第三章 小果博落回抗鱼类病原菌活性成分的分离和鉴定  21-37
  3.1 材料与方法  21-27
    3.1.1 试验材料  21-22
    3.1.2 方法  22-27
  3.2 结果  27-35
    3.2.1 小果博落回抗菌活性成分的跟踪分离结果  27-33
    3.2.2 活性单体的结构鉴定  33-35
  3.3 讨论  35-36
  3.4 小结  36-37
第四章 血根碱在鲫鱼血液中的药物动力学  37-45
  4.1 材料与方法  37-40
    4.1.1 材料  37-38
    4.1.2 方法  38-40
  4.2 结果  40-44
    4.2.1 小果博落回提取物中有效成分的含量  40
    4.2.2 小果博落回乙醇提取物内服对鲫鱼的急性毒性试验  40-41
    4.2.3 色谱行为  41
    4.2.4 标准曲线和最低检测限(LOD)  41-42
    4.2.5 方法的回收率和精密度  42
    4.2.6 血根碱在鲫鱼血液中的药代动力学  42-44
  4.3 讨论  44
  4.4 小结  44-45
结论  45-46
参考文献  46-50
附录  50-62
致谢  62-63
作者简介  63

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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产保护学 > 水产药物学、药理学
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