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小果博落回抗鱼类病原菌活性成分的研究
作 者: 李福元
导 师: 王高学
学 校: 西北农林科技大学
专 业: 基础兽医学
关键词: 小果博落回 分离 鉴定 药动学模型
分类号: S948
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
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本研究试图从小果博落回(Macleaye microcarpa)分离获得杀灭水产病原菌的活性成分,为直接利用这一植物资源创制无公害新型渔药,以其为模板仿生合成新型杀菌、奠定理论基础。该项目的研究,对水产新渔药开发和绿色水产品的生产具有重要的意义。本研究取得了以下几个成果:1.小果博落回抗鱼类病原菌活性部位的研究。分别采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醇和水5种极性不同的溶剂对小果博落回进行提取,并测定不同溶剂提取物的抗菌活性。结果显示:乙醇浸提物24 h时对四种病原菌的的抑菌效果最好,为4mg/mL,其次为氯仿,石油醚和乙酸乙酯,MIC为8 mg/ml-10mg/ml。水提物的抑菌效果最差,对所有病原菌的最小抑菌浓度为10mg/ml。对照组没有表现出抑菌作用。2.小果博落回杀灭鱼类病原菌活性成分的跟踪分离和鉴定。通过柱层析分离、反复重结晶结合活性跟踪的方法,从小果博落回中分离得到4种对四种鱼类病原菌有活性作用的单体成分化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ。其中化合物Ⅰ对四种病原菌的活性最好,对嗜水气单胞菌的MIC为12.5mg/L,化合物Ⅱ对嗜水气单胞菌的MIC为80mg/L,化合物Ⅲ、化合物Ⅳ对嗜水气单胞菌的MIC为100mg/L。化合物Ⅰ对杀鲑气单胞菌,鳗弧菌和哈氏弧菌的MIC为50mg/L,化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ对以上三种菌的MIC范围在100-200mg/L。通过理化性质和光谱分析,鉴定化合物Ⅰ为血根碱,化合物Ⅱ为6-甲氧基二氢白屈菜红碱,化合物Ⅲ为别隐品碱,化合物Ⅳ为隐品碱。3.以血根碱30 mg·kg-1(bw)的剂量灌喂鲫鱼,其药动学模型符合一级吸收一室开放模型。药动学方程: C = 1.793e-0.213t-1.793e0.426t。主要药动学参数为主要药代动力学参数如下:吸收速率常数Ka 0.426 h-1;消除半衰T(1/2) 3.255 h ;药时曲线下面积AUC 25.180μg·h·mL-1;表观容积分布Vd/F 5.594 L·kg-1;清除率CL(s) 1.191 mL·h-1·kg-1;达峰时间Tpeak 3.255 h;药峰浓度Cmax 2.681μg·mL-1。说明鲫鱼对血根碱的摄取比较迅速,吸收较好,可以作为植物源水产药物使用。
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全文目录
摘要 5-6 ABSTRACT 6-10 第一章 文献综述 10-18 1.1 鱼类病原菌性疾病的危害及其防治概况 10-12 1.1.1 鱼类常见的细菌性疾病及其危害 10-11 1.1.2 鱼类细菌病的主要的防治措施 11-12 1.2 博落回属植物的研究进展 12-16 1.2.1 博落回概况 12 1.2.2 博落回属植物中的化学成分研究概况 12-13 1.2.3 博落回属植物的药理作用及应用研究概况 13-16 1.3 博落回生物碱的提取分离研究概况 16-17 1.4 血根碱药代动力学研究概况 17 1.5 本文研究的目的和意义 17-18 第二章 小果博落回抗菌的活性部位 18-21 2.1 材料与方法 18-21 2.1.1 材料 18 2.1.2 方法 18-20 2.1.3 讨论 20 2.1.4 小结 20-21 第三章 小果博落回抗鱼类病原菌活性成分的分离和鉴定 21-37 3.1 材料与方法 21-27 3.1.1 试验材料 21-22 3.1.2 方法 22-27 3.2 结果 27-35 3.2.1 小果博落回抗菌活性成分的跟踪分离结果 27-33 3.2.2 活性单体的结构鉴定 33-35 3.3 讨论 35-36 3.4 小结 36-37 第四章 血根碱在鲫鱼血液中的药物动力学 37-45 4.1 材料与方法 37-40 4.1.1 材料 37-38 4.1.2 方法 38-40 4.2 结果 40-44 4.2.1 小果博落回提取物中有效成分的含量 40 4.2.2 小果博落回乙醇提取物内服对鲫鱼的急性毒性试验 40-41 4.2.3 色谱行为 41 4.2.4 标准曲线和最低检测限(LOD) 41-42 4.2.5 方法的回收率和精密度 42 4.2.6 血根碱在鲫鱼血液中的药代动力学 42-44 4.3 讨论 44 4.4 小结 44-45 结论 45-46 参考文献 46-50 附录 50-62 致谢 62-63 作者简介 63
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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产保护学 > 水产药物学、药理学
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