学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

载紫杉醇聚乳酸类纳微球的制备及体外药效学比较

作　者: 蔡明明
导　师: 朱宝成; 马光辉
学　校: 河北农业大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 快速膜乳化紫杉醇聚乳酸类共聚物微球特性细胞毒性
分类号: R944.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 169次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

紫杉醇(Paclitaxel,PTX)是一种天然广谱抗癌新药,广泛应用于临床,是多种肿瘤的一线化疗药物,但其难溶性给临床给药带来了巨大挑战。为了增加其溶解性,紫杉醇传统临床制剂中加入的助溶剂聚氧乙烯蓖麻油容易引起过敏、肾毒性及神经毒性等毒副作用。为避免相关毒副作用并增加紫杉醇的溶解性,以微球制剂作为紫杉醇递送系统具有极广阔的应用前景。本论文首先采用快速膜乳化技术结合溶剂挥发法制备了粒径均一的载紫杉醇聚乳酸(Polylactic acid,PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物[Poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]和聚(乳酸-聚乙二醇)二嵌段共聚物[(Monomethoxypoly(ethylene glycol)-b-poly-DL-lactic acid),PELA]微球,并对三种载药微球的表面形貌、粒径分布进行表征,以及系统考察材料析出速率、亲疏水性对药物在微球内分布、载药率、包埋率、体外释放行为以及体外药效的影响,以希望筛选出合适的载紫杉醇聚乳酸材料,并对其进行了表面改性修饰以及不同粒径微球的制备、各种表征以及体外药效学比较研究。研究所得结果主要如下:采用快速膜乳化技术结合溶剂挥发法成功制备了载紫杉醇PLA、PLGA和PELA微球,其粒径大小均在900 nm左右,且粒径分布均一,分散性良好;PLA和PLGA微球表面比较圆整光滑而PELA微球表面则呈现褶皱;PTX、PLA、PLGA和PELA材料在微球固化过程中,随着二氯甲烷的发挥,其不同的析出速率导致了药物在微球内的不同分布,透射电镜图片显示PLA、PLGA微球内药物分布较为均一,PELA微球则有片状结构。由于PLA、PLGA和PELA三种材料亲疏水性的不同导致了微球载药率、包埋率及体外释放行为的不同,综合比较实验结果,亲水性适中的PLGA微球的载药率和包埋率(5.15%,70.46%)最高,并具有较快的体外释放行为。PLA、PLGA和PELA三种载药微球的细胞杀伤效果的定性定量结果均表明,PLA、PLGA及PELA三种空白微球均无明显的细胞毒性,表明三种材料都具有良好的生物相容性和安全性;与Taxol?相比,PLA,PLGA和PELA三种载药微球均表现出较强的细胞杀伤效果;三种载药微球相比较,PLGA载药微球表现出最为显著的细胞杀伤效果;三种微球的细胞内吞结果表明,PLGA微球的细胞内吞量最多,其次是PELA和PLA微球。综合上述实验结果,较PLA和PELA,PLGA材料是最为合适的紫杉醇载体材料。快速膜乳化技术结合溶剂挥发法制备了载紫杉醇PLGA微球,并用壳聚糖衍生物(HTCC)对PLGA微球表面进行镀层修饰,比较了修饰前后载药微球的形貌、粒径、电位、载药率、释药行为和细胞杀伤效果。结果表明,修饰后微球表面圆整光滑,平均粒径为882 nm,载药率可达5.15%,包埋率达70.46%、体外释药22天累积释药率为70.17%,与修饰前没有显著性差异;但修饰后微球表面电荷由修饰前的?14.8 mV翻转为+36.7 mV,肿瘤细胞对PLGA和HTCC-PLGA载药微球的内吞量分别是Taxol?的5.6倍和9.7倍,且HTCC-PLGA载药微球的细胞杀伤效果显著,是一种有潜力的难溶性药物递送系统。快速膜乳化技术结合溶剂扩散法制备不同粒径的载紫杉醇PLGA微球,通过将乳液依次通过不同膜孔径的SPG膜制备了198.2 nm和864.9 nm的载紫杉醇PLGA微球。研究结果表明,两种微球的表面较圆整光滑,粒径均一,且分散性良好;198.2 nm载药PLGA微球的载药率、包埋率以及释放速率均低于864.9 nm载药PLGA微球;但其细胞杀伤效果显著优于864.9 nm载药PLGA微球,主要是由于小粒径微球更利于细胞对其摄取和内吞。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-11
第一章引言  11-23
  1.1 抗肿瘤药物紫杉醇概况  11-15
    1.1.1 紫杉醇理化性质  11-12
    1.1.2 紫杉醇的作用机制  12
    1.1.3 紫杉醇剂型研究进展  12-15
  1.2 微球制剂的研究进展  15-21
    1.2.1 微球载体材料的选择  15-16
    1.2.2 载药微球的传统制备方法  16-19
    1.2.3 膜乳化技术  19-21
  1.3 立题意义  21-23
第二章载紫杉醇聚乳酸类微球的制备、表征及体外释放行为的研究  23-31
  2.1 实验材料和设备  23-24
    2.1.1 实验材料  23
    2.1.2 实验仪器  23-24
  2.2 实验方法  24-26
    2.2.1 空白微球和载药微球的制备  24
    2.2.2 微球粒径分布的测定和表面形貌观察  24
    2.2.3 紫杉醇在微球内部的分布表征  24-25
    2.2.4 紫杉醇与不同膜材析出速率的测定  25
    2.2.5 微球载药率和包埋率的测定  25
    2.2.6 紫杉醇与膜材亲疏水性的测定  25
    2.2.7 载药微球体外释放行为测定  25-26
  2.3 结果与分析  26-30
    2.3.1 载药微球的制备与形貌表征  26
    2.3.2 PTX 在微球内部的分布  26-27
    2.3.3 紫杉醇与不同膜材析出速率的测定  27-28
    2.3.4 微球载药率和包埋率的测定  28-29
    2.3.5 紫杉醇与不同膜材亲疏水性的测定  29-30
    2.3.6 载药微球体外释放行为测定  30
  2.4 讨论  30-31
第三章载药微球体外抗肿瘤活性评价  31-37
  3.1 实验材料和仪器  31
    3.1.1 实验材料  31
    3.1.2 实验仪器  31
  3.2 实验方法  31-32
    3.2.1 细胞培养  31
    3.2.2 细胞毒性实验  31-32
    3.2.3 细胞杀伤效果的CLSM 表征  32
    3.2.4 细胞内吞实验  32
    3.2.5 细胞内吞效果的CLSM 表征  32
  3.3 结果与分析  32-35
    3.3.1 细胞毒性测定  32-34
    3.3.2 细胞杀伤效果的CLSM 表征  34
    3.3.3 细胞内吞实验  34-35
  2.4 讨论  35-37
第四章壳聚糖季铵盐表面修饰对载紫杉醇PLGA 微球体外药效学的影响  37-46
  4.1 实验材料和仪器  37-38
    4.1.1 实验材料  37
    4.1.2 实验仪器  37-38
  4.2 实验方法  38-39
    4.2.1 PLGA 和HTCC-PLGA 载药微球的制备  38
    4.2.2 微球形貌观察、粒径分布和Zeta 电位的测定  38
    4.2.3 微球的红外光谱分析  38
    4.2.4 载药率、包埋率的测定  38
    4.2.5 载药微球体外释放行为测定  38-39
    4.2.6 载药微球的细胞毒性实验  39
    4.2.7 细胞杀伤效果的CLSM 表征  39
    4.2.8 细胞内PTX 含量测定  39
  4.3 结果与分析  39-45
    4.3.1 载药微球的制备与表征  39-40
    4.3.2 载药微球的红外光谱表征  40-41
    4.3.3 载药微球药物装载与体外释药行为评价  41-42
    4.3.4 空白和PLGA，HTCC-PLGA 载药微球的细胞毒性  42-43
    4.3.5 细胞杀伤效果的CLSM 表征  43-44
    4.3.6 细胞内PTX 含量的测定  44-45
  4.4 讨论  45-46
第五章不同粒径载紫杉醇PLGA 微球的制备、表征及体外药效学研究  46-52
  5.1 实验材料和仪器  46
    5.1.1 实验材料  46
    5.1.2 实验仪器  46
  5.2 实验方法  46-47
    5.2.1 不同粒径PLGA 载药微球的制备  46-47
    5.2.2 微球形貌观察、粒径分布的测定  47
    5.2.3 载药率、包埋率的测定  47
    5.2.4 不同粒径载药微球体外释放行为测定  47
    5.2.5 不同粒径载药微球细胞毒性评价  47
    5.2.6 细胞内PTX 含量测定  47
  5.3 实验结果与分析  47-51
    5.3.1 微球形貌观察及粒径分布  47-48
    5.3.2 载药率、包埋率的测定  48-49
    5.3.3 不同粒径载药微球的体外释药行为  49
    5.3.4 不同粒径载药微球细胞毒性评价  49-51
  5.4 讨论  51-52
结论  52-53
参考文献  53-58
在读期间发表的学术论文  58-59
作者简历  59-60
致谢  60-61

载紫杉醇聚乳酸类纳微球的制备及体外药效学比较

内容摘要

全文目录

相似论文