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变异链球菌htrA和clpP基因对其氧化应激的影响

作　者: 赵巍
导　师: 于丹妮
学　校: 天津医科大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 变异链球菌 htrA蛋白酶 clpP蛋白酶 氧化应激
分类号: R781.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 8次
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内容摘要


目的建立变异链球菌标准株、htrA基因缺陷株、clpP基因缺陷株及htrA-clpP双基因缺陷株的生长模型,观察比较几种菌株在氧化应激条件下的生长情况的差异,研究变异链球菌htrA、clpP基因缺失对其氧化应激耐受性的影响。方法利用变异链球菌标准株及前期实验成功构建并保存的htrA单基因缺陷株、clpP单基因缺陷株及(?)htrA-clpP双基因缺陷株,测定4种菌株在普通TPY液体培养基中不同时段的吸光度(A值),并将4种菌株分别培养在含H2O2终浓度为0.0005%的TPY液体培养基中37℃微需氧条件下培养,从接种入培养基开始以2h间隔采用酶联免疫检测仪在600nnm下测定各菌株在各时间点的吸光度值,分别确定各菌株在不同培养条件下的生长情况并绘制细菌生长曲线比较其生长情况的差异,并进行统计学分析。结果1.在普通TPY液体培养基中,htrA单基因缺陷株、clpP单基因缺陷株及htrA-clpP双基因缺陷株生长周期均发生改变,对数期峰值提前且此阶段生长速度较标准快(P<0.05),而标准株的对数期峰值及稳定期A值均明显高于缺陷株(P<0.05),24h测得缺陷株A值比标准株A值明显降低；2.在含H202终浓度为0.0005%的TPY液体培养基中,与标准株相比,htrA单基因缺陷株、clpP单基因缺陷株及htrA-clpP双基因缺陷株对H202敏感性增强,此时标准株在各生长时期的生长速度均高于缺陷株的生长速度(P<0.05),标准株和各缺陷株生长能力较无H202条件下明显降低(P<0.05); clpP-htrA双基因缺陷株在氧化应激环境中生长能力弱于clpP、htrA单基因缺陷株,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论变异链球菌htr、clpP基因缺失均可抑制变异链球菌的生长,与变异链球菌标准株相比,htrA、clpP基因单独缺失或同时缺失均可对其氧化应激能力有一定影响。

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中图分类: > 医药、卫生 > 口腔科学 > 口腔内科学 > 龋齿
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