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FBJ细胞中神经节苷脂GD1a对NOS2的调节作用

作　者: 曹婷
导　师: 山形达也; 山形贞子
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 神经节苷脂GD1a FBJ骨肉瘤细胞 诱导型一氧化氮合成酶 NOS2 丝裂素激活蛋白激酶MAPK ERK1/2
分类号: R738
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 11次
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内容摘要


研究发现诱导型一氧化氮合成酶(iNOS, NOS2)在肿瘤中的表达高于在正常组织中的表达,并且与肿瘤细胞的生长和转移相关。因此,可将其作为一个未来抗癌治疗的开发靶点。之前的研究表明,神经节苷脂GDla可以抑制FBJ病毒诱导的小鼠骨肉瘤细胞的转移。为了阐明GDla的作用机制,通过比较缺乏GDla的FBJ-LL和M5细胞株与富含GDla的FBJ-S1和LA5-30细胞株,来发现可能被GDla调控并与肿瘤转移相关的分子。RT-PCR, Western blotting和NO浓度的结果显示,在FBJ细胞中,GDla负向调控NOS2的表达。在FBJ-LL细胞中转染GM2/GD2合成酶的cDNA,可以增加GDla的含量,而抑制NOS2的表达,在FBJ-S1细胞中转染GM2/GD2合成酶的dsRNA,可以降低GDls的含量,促进NOS2的表达。在FBJ-LL细胞中加入GDla也可以降低NOS2的表达。以上的结果说明在FBJ细胞中,GDla调控NOS2的表达。为了阐明GDla是通过何种途径来调控NOS2表达的,我们使用了一些信号途径的抑制剂,特别是MAPK途径的抑制剂。因为,据报道MAPK途径是调节NOS2表达的重要通路。用ERK1/2的抑制剂U0126和GDla共同处理FBJ-LL细胞,可以阻断GDla对NOS2的调控。而分别用P38和JNK的抑制剂SB203580和SP600125与GDla共同处理细胞,则不能改变此抑制。此外,采用siRNA技术降低FBJ-LL细胞中的ERK1/2的含量,可以增加NOS2的表达。综上证明,在FBJ病毒诱导的小鼠骨肉瘤细胞中,GDla通过ERK1/2途径负向调节NOS2的表达。此研究也显示,GDla可能通过调控NOS2从而抑制FBJ细胞转移。

全文目录


Abstract  9-11
摘要  11-12
Introduction  12-19
Materials and methods  19-26
Results  26-40
Conclusion and discussion  40-44
References  44-50
List of publications  50-51
Acknowledgements  51

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 运动系肿瘤
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