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熟菜品冷藏与分离菌的相关性分析及家用微波炉对熟菜品杀菌时效研究

作　者: 刘世花
导　师: 刘德梦
学　校: 天津医科大学
专　业: 内科学
关键词: 熟菜品药敏分析脉冲场凝胶电泳分型家用微波炉杀菌时效
分类号: R155.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

食源性疾病是由于摄入食品在人体内引起感染和中毒的疾病,是世界范围内的重要公共卫生问题。食物中毒是最典型的食源性疾病,细菌性食物中毒居各类食物中毒的首位,在我国过去对食物中致病菌的研究中,重点多放在流行病学和临床治疗用药上,对于食物中致病菌的耐药性研究相对较少,有必要对食物中致病菌的耐药现状进行研究。PFGE分型能有效地反映出受试菌的流行病学相关性。微波对食物的灭菌应用广泛。在日常生活中人们常将熟食物冷藏在冰箱中,食用前将其用微波炉加热。因此,本研究旨在探讨熟食物在冰箱中有效地冷藏时间,分离菌的药物敏感情况,同种菌的相关性,家用微波炉日常加热杀菌时效,对预防食物中毒的发生及有效地治疗具有重要意义。一、熟菜品冷藏时间与分离菌的相关性分析目的：1.了解熟菜品在冰箱冷藏(4-8℃)下有细菌生长的时间；2.了解分离菌的药敏情况；3.了解分离的同种细菌的相关性。方法：1.60份熟热菜品取自2010～2011年6-8月天津市某三级甲等医院食堂,每份约300g,放入密闭高压灭菌饭盒中,置于冰箱中冷藏0、24、48、72小时分离细菌,细菌分离及菌落总数测定参见《食品卫生微生物学检验》国家标准(GB4789-2010),细菌鉴定采用常见细菌系统鉴定手册。2.采用K-B纸片扩散法测试分离出的革兰氏阴性菌对左氧氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、头孢吡肟、头孢他啶、阿米卡星、哌拉西林、头孢氨噻肟、头孢哌酮、头孢曲松、哌拉西林/三唑巴坦、庆大霉素共12种抗菌药物的敏感性；革兰氏阳性菌对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢唑林、环丙沙星、加替沙星、氯霉素、林可霉素、庆大霉素、头孢曲松、亚胺培南、红霉素共12种抗菌药物的敏感性。3.对分离的同种细菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析：限制性内切酶XbaI、SfiI分别酶切15株大肠杆菌和8株普通变形杆菌基因组DNA后,进行脉冲场凝胶电泳。结果：1.在室内环境平均温度26℃,平均湿度75%下,冰箱冷藏条件下,有16份(26.67%)、17份(28.33%)、17份(28.33%)、10份(16.67%)熟菜品分别于冷藏0、24、48、72小时分离出细菌；7份西胡肉(100%)、7份茄子肉(100%)、7份木须肉(87.50%)、7份芹菜肉(87.50%)在冷藏24小时内即可分离出细菌；共分离出60株细菌,以肠杆菌科(63.33%)为主,其次是葡萄球菌属(11.67%),微球菌属(10.00%),假单胞菌属(8.33%)和枯草芽孢杆菌(6.67%)；菌落总数测定为0.32x105～12.00x105cfu/g,共有31份(51.67%)熟菜品菌落总数超过GB2726-2005《熟肉制品卫生标准》的规定(≤8.0×104cfu/g)。2.药物敏感性分析显示：15株大肠杆菌对左氧氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、阿米卡星、头孢哌酮、庆大霉素的耐药率分别为13.33%、13.33%、13.33%、6.67%、6.67%、13.33%；8株普通变形杆菌对庆大霉素的耐药率为12.50%。3.PFGE显示15株大肠杆菌分为14型,每株有9-18条带型,菌株间相似性系数为21.10%～91.20%；8株普通变形杆菌分为7型,每株有14～19条带型,菌株间相似性系数为34.50%-100%。3.结论：熟菜品在冰箱冷藏72小时即全部有细菌生长；分离出的细菌对药物的耐药率较低；PFGE显示菌株表现出较大的遗传多样性。二、家用微波炉对熟菜品杀菌时效分析目的：探讨家用微波炉对熟菜品的杀菌时效。方法：用微波炉对300g熟菜品进行不同时间的加热,对加热后的熟菜品分离细菌。结果：家用微波炉对300g熟菜品加热1分钟和2分钟,经培养后均有细菌生长,加热3分钟,温度达75℃以上,经培养后未分离到细菌。结论：家用微波炉对300g熟菜品加热3分钟,温度达75℃及以上可达有效地灭菌效果。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-10
缩略语/符号说明  10-11
前言  11-15
  研究现状、成果  11-14
  研究目的、方法  14-15
一、熟菜品冷藏时间与分离菌的相关性分析  15-39
  1.1 材料和方法  15-23
    1.1.1 材料  15-17
    1.1.2 方法  17-23
  1.2 结果  23-32
    1.2.1 熟菜品在冰箱冷藏下不同时间点分离的细菌的情况  23-25
    1.2.2 熟菜品中分离菌的菌相构成  25-26
    1.2.3 熟菜品中细菌的菌落总数测定  26-28
    1.2.4 分离的细菌的药物敏感试验结果  28-29
    1.2.5 PFGE分析结果  29-32
  1.3 讨论  32-37
  1.4 小结  37-39
二、家用微波炉对熟菜品杀菌时效分析  39-43
  2.1 材料和方法  39-40
    2.1.1 材料  39
    2.1.2 方法  39-40
  2.2 结果  40
  2.3 讨论  40-41
  2.4 小结  41-43
结论  43-44
参考文献  44-49
发表论文和参加科研情况说明  49-50
综述  50-59
  综述参考文献  55-59
致谢  59

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