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郴州市黑斑蛙裂头蚴感染情况调查及pnad5和prrnS基因分子鉴定

作　者: 黎建华
导　师: 刘毅
学　校: 湖南农业大学
专　业: 预防兽医
关键词: 蛙裂头蚴感染情况 pnad5 prrnS 分子鉴定
分类号: S947.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 22次
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内容摘要

蛙裂头蚴寄生于蛙的皮下组织、肌肉、胸腹腔等处,有较强的致病性。裂头蚴病分布甚广,其报道多见于东亚、东南亚等国,其他各洲也有报道,在我国各省均有报道。因此,对蛙裂头蚴的感染情况调查和正确鉴别方法的研究对蛙裂头蚴病的防治工作具有重要的意义。本研究从2010年5月-2011年9月,从郴州安仁、郴州永兴、郴州桂东、郴州宜章、郴州嘉禾五个地方的菜市场购买428只黑斑蛙,利用寄生虫学调查方法对郴州市黑斑蛙裂头蚴感染情况进行调查,其结果如下：1.本次调查共检查黑斑蛙428只,其中126只感染裂头蚴,感染率为29.44%。2.经调查发现,郴州安仁、郴州永兴、郴州桂东、郴州宜章、郴州嘉禾的黑斑蛙裂头蚴感染率依次为43.75%、36.19%、17.33%、20.00%、24.0%。3.经调查发现,郴州安仁、郴州永兴、郴州桂东、郴州宜章、郴州嘉禾的黑斑蛙裂头蚴感染强度依次为1-15、1-8、1-2、1-6、1-7。4.分子鉴定与形态学鉴定结果相符。线粒体DNA pnad5和(?)prrnS基因片段核苷酸序列分析结果显示：黑斑蛙裂头蚴pnad5和(?)prrnS序列种内差异较小；种间差异较明显。由此可以得出结论,pnadS和prrnS基因的序列可以作为蛙裂头蚴的遗传标记。此次调查获得了郴州市黑斑蛙裂头蚴感染情况的资料,并通过对黑斑蛙裂头蚴pnad5和prrnS基因的多态性研究,发现pnad5和prrnS两段基因可以作为蛙裂头蚴有效的遗传标记,从而为蛙裂头蚴的分子鉴定以及进一步的分子流行病学调查研究奠定了扎实的基础。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
第一章文献综述  9-13
  1 蛙裂头蚴简介  9-12
    1.1 蛙裂头蚴  9-10
    1.2 蛙裂头蚴感染地区分布  10-11
    1.3 蛙裂头蚴感染途径  11
    1.4 蛙裂头蚴危害  11-12
  2 PCR方法及其序列分析  12
    2.1 PCR方法  12
    2.2 DNA遗传分析  12
  3 研究中DNA序列的筛选  12-13
第二章郴州市黑斑蛙裂头蚴感染情况调查  13-17
  1 材料与方法  13-14
    1.1 材料  13-14
      1.1.1 调查对象  13-14
      1.1.2 器材准备  14
      1.1.3 试剂  14
    1.2 方法  14
      1.2.1 虫体分离  14
      1.2.2 形态学检查方法  14
      1.2.3 判断标准  14
  2 结果与分析  14-16
    2.1 调查结果  14-15
    2.2 形态观察  15-16
  3 讨论  16-17
第三章黑斑蛙裂头蚴pnad5和prrnS基因分子鉴定  17-26
  1 材料与方法  17-22
    1.1 材料  17-18
      1.1.1 虫体样品  17
      1.1.2 仪器设备  17-18
      1.1.3 试剂和酶类  18
      1.1.4 缓冲液及其它溶液的制备  18
      1.1.5 其它试剂  18
    1.2 方法  18-22
      1.2.1 虫体DNA的提取  18-19
      1.2.2 pnad5基因片段的PCR扩增  19-20
      1.2.3 rrns基因片段的PCR扩增  20-21
      1.2.4 pnad5部分基因序列测定和序列分析  21
      1.2.5 prmS部分基因序列测定和序列分析  21-22
  2 结果与分析  22-24
    2.1 PCR扩增结果  22-23
    2.2 测序结果及序列分析  23-24
  3 讨论  24-26
全文结论  26-27
参考文献  27-31
附录  31-32
致谢  32-33
个人简历  33

郴州市黑斑蛙裂头蚴感染情况调查及pnad5和prrnS基因分子鉴定

内容摘要

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